孙涛
- 作品数：107 被引量：128H指数：6
- 供职机构：山东出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家科技支撑计划国家质检公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程医药卫生生物学更多>>
- 焦磷酸测序技术检测贾第鞭毛虫的方法
- 本发明公开了一种焦磷酸测序技术检测贾第鞭毛虫的方法，属于食源性寄生虫的检测技术领域，首先依据贾第鞭毛虫磷酸丙糖异构酶(triose phosphate isomerase，tim)设计特异性引物及焦磷酸测序引物；再提取待...
- 孙涛邓明俊肖西志王群郑小龙凌宗帅
- 文献传递
- 焦磷酸测序技术检测花生过敏原成分的引物和方法
- 本发明公开了一种焦磷酸测序技术检测花生过敏原成分的引物和方法，正向引物序列为SEQIDNO1；反向引物序列为SEQIDNO2；测序引物序列为SEQIDNO3；方法包括下列步骤：首先依据花生Arah6基因设计特异性PCR引...
- 房保海金莹于仕超孙涛贾俊涛姜英辉谭乐义
- 水样中甲型肝炎病毒和诺如病毒检测质控试剂盒和检测方法
- 本发明公开了一种水样中甲型肝炎病毒和诺如病毒检测质控试剂盒和检测方法，试剂盒包括：HAV？2×RT-PCR？mix、NV？GⅠ+GⅡ分型2×RT-PCR？mix、MS2？2×RT-PCR？mix、无RNase水、HAV阳...
- 房保海岳志芹孙涛张晓文孙明君梁成珠
- 文献传递
- 焦磷酸测序技术检测大豆过敏原成分的引物和方法
- 本发明公开了一种焦磷酸测序技术检测大豆过敏原成分的引物和方法，正向引物序列为SEQ ID NO1；反向引物序列为SEQ ID NO2；测序引物序列为SEQ ID NO3；方法包括下列步骤：首先依据大豆GlymBd30K基...
- 房保海金莹贾俊涛姜英辉孙涛谭乐义王妍婷雷质文
- 文献传递
- A型禽流感病毒通用型核酸检测标准样品的研制及不确定度分析
- 利用基因克隆和体外转录技术,制备A型禽流感病毒通用核酸检测阳性标准样品。根据禽流感基质蛋白基因M的序列,设计全长开放阅读框的克隆引物,RT-PCR获得相应片段,连接至PGEM-T载体,测序后采用体外转录方法制备RNA纯品...
- 孙涛雷质文邓明俊王群郑小龙梁成珠曹丙蕾凌宗帅
- 文献传递
- 西尼罗病毒病诊断技术研究进展被引量：6
- 2014年
- 西尼罗病毒病(WND)是由西尼罗病毒(WNV)感染引起的一种人兽共患的急性传染病,应用各种诊断技术对该病进行准确、及时的诊断是预防和控制该病的前提。论文就近年来WND诊断技术研究进展情况进行综述,包括病原学诊断、血清学诊断和分子生物学诊断。在病原学诊断方面,主要包括病毒分离鉴定、抗原捕获ELISA及基于膜的电化学生物传感器技术等。在血清学诊断方面,主要包括ELISA方法、补体依赖性细胞毒性反应、基于微球的免疫测定方法及表面增强拉曼散射等。在分子生物学诊断方面,主要包括RT-PCR和RT-nPCR、real-time RT-PCR、实时快速反转录环介导恒温扩增及依赖核酸序列的扩增技术等,并对各种方法的前景和优缺点进行了阐述,为实际应用及新方法的建立提供参考。
- 郑小龙朱来华王群孙涛孙明君邓明俊张晓文
- 关键词：西尼罗病毒病病原学血清学分子生物学
- 基于宏基因组学的鸭源样本中坦布苏病毒检测方法的建立
- 2016年
- 利用二代高通量测序技术建立检测鸭源样品中坦布苏病毒的方法。首先将样品过滤和经核酸酶处理,再利用等温链位移扩增(SPIA)技术快速制备样品总cDNA,最后经磁珠纯化和文库构建后,通过Ion Torrent进行高通量测序获得基因组信息。结果显示,通过SPIA扩增和核酸文库制备的优化,可从微量病原样本中获得327pmol/μL的核酸文库样本。Ion Torrent测序共获得1 725 436条reads,约6.2M数据,平均109bp。数据拼接并Blast发现,病原样品的核酸序列可注释鸭坦布苏病毒全部基因组数据,与首次发生在我国的鸭坦布苏病毒BYD-1株参考序列的同源性为100%。将所测病毒序列与其他5种黄病毒科成员进行同源性比对,发现与近3年发生在我国的鸭坦布苏病毒同源性最高,在98%以上。且NS基因进化树分析与鸭坦布苏病毒处于同一分支上,符合鸭坦布苏病毒特征。本研究建立的基于未知病原SPIA扩增结合高通量测序检测方法,可同步获知坦布苏病毒基因的核酸信息。
- 孙涛王超邓明俊郑小龙王群徐彪
- 关键词：宏基因组学
- 隐孢子虫检测技术研究进展被引量：7
- 2013年
- 隐孢子虫是一种危害严重的人兽共感染寄生虫原虫,可致人和动物严重腹泻。由于其种类繁多,传播速度快,对公共卫生安全造成严重威胁。传统的隐孢子虫检测方法主要包括粪便样本的显微镜检查、水样的EPA1623检查,随着免疫学和现代分子生物学的不断发展,很多先进的检测技术如酶联免疫检测技术,免疫荧光技术,PCR,反转录PCR,实时荧光定量PCR,环介导等温扩增技术等不断涌现和应用于临床实践。论文就近年来隐孢子虫的危害及其检测技术最新进展情况进行综述。
- 邓明俊肖西志孙敏吴振兴孙涛张晓文徐彪
- 关键词：隐孢子虫病原学检测免疫学检测分子生物学检测
- VHSV病毒样颗粒的制备方法及其应用
- 本发明公开了一种VHSV病毒样颗粒的制备方法及其应用，该病毒样颗粒是由MS2噬菌体编码外壳蛋白包裹VHSV N基因RNA的一种RNA‑蛋白复合体；将编码组氨酸标签序列插入MS2噬菌体编码外壳蛋白的β发夹环结构序列中，构建...
- 王群孙涛岳志芹姜帆梁成珠房保海
- 文献传递
- 东方马脑脊髓炎病毒PCR-DHPLC检测方法的建立与初步应用
- 2016年
- 为建立检测东方马脑脊髓炎病毒(EEEV)的方法,本研究利用PCR结合变性高效液相色谱技术(DHPLC),针对EEEV NS1基因,设计特异性引物,通过优化反应条件,对核酸扩增产物采用DHPLC进行检测分析,核酸扩增产物形成DHPLC特征峰图,建立了EEEV的PCR-DHPLC快速检测方法。结果显示该方法与其他6种常见马病病毒均无交叉反应,未检测到其他马病病毒的阳性吸收峰,具有较强的特异性;对梯度稀释的标准阳性模板的检测限可达到10拷贝/μL;利用本研究建立的方法与荧光定量RT-PCR对30份临床样品进行检测,两者符合率达100%。本研究建立的PCR-DHPLC法具有特异、敏感、快速、重复性好等优点,可以用于EEE的病原学诊断及流行病学调查。
- 郑小龙王群孙涛孙明君张晓文朱来华梁成珠
- 关键词：变性高效液相色谱RT-PCR荧光定量PCR
