孙现超
- 作品数：192 被引量：378H指数：11
- 供职机构：西南大学更多>>
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- 相关领域：农业科学文化科学一般工业技术轻工技术与工程更多>>
- 番茄抗性相关基因SlHin1的克隆、表达与抗病毒功能被引量：5
- 2017年
- 【目的】克隆番茄抗性相关基因Sl Hin1(harpin-induced gene 1),分析其生物信息学特征、组织表达和亚细胞定位情况,研究其在抗烟草花叶病毒侵染、移动中的作用,为番茄抗性育种提供理论依据。【方法】通过RT-PCR及基因克隆方法,从番茄总RNA中克隆得到基因SlHin1;应用生物信息学方法分析其DNA序列及其编码的蛋白序列特性,使用MEGA6.0对SlHIN1氨基酸序列及其同源序列进行多序列比对,并构建同源物种间系统进化树;将该基因片段通过Sal Ⅰ和Bam HI双酶切连接至荧光表达载体pCV-m GFP-C1,采用GFP标记的方法进行亚细胞定位检测,分析编码蛋白表达位置;利用实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)分析该基因在番茄不同组织的表达量水平;将该基因片段通过Nco Ⅰ和Bam HI通过双酶切连接至植物表达载体pFGC5941,用土壤农杆菌EHA105瞬时过表达该基因并接种标记有绿色荧光的烟草花叶病毒侵染性克隆,以检测植株对病毒的抗性变化,间接ELISA法检测病毒的含量,探究该基因的抗病毒功能。Western blot验证SlHIN1蛋白在本氏烟内的表达情况。【结果】利用RT-PCR方法从番茄材料(Solanum lycopersicon cv.Ailsa Craig)的叶片组织中克隆得到全长为675 bp的番茄抗性相关基因Sl Hin1,将序列分别提交至Gen Bank,得到序列号KU195820。序列比对及生物信息学分析表明,其基因预测编码225个氨基酸,分子量为26.1 k D,理论等电点为9.35,结构上具有LEA-14保守结构域,不具有跨膜区段,并且位于番茄基因组10号染色体上(Solyc10g081980);多序列比对及进化树分析表明,该基因编码的蛋白与茄科植物HIN1氨基酸同源性80.0%以上而与水稻、高粱单子叶植物的亲缘关系较远;亚细胞定位显示定位在细胞膜上与PSORT Prediction预测的亚细胞定位最高概率一致;qRT-PCR结果分析表明该基因具有组织特异性,表达量在根、叶、茎间依次降低;在本氏烟中瞬时过表达Sl
- 彭浩然潘琪魏周玲蒲运丹张永至吴根土青玲孙现超
- 关键词：番茄烟草花叶病毒抗病毒
- 一种可防治辣椒疫病的灰色链霉菌及其应用
- 本发明涉及一种可防治辣椒疫病的灰色链霉菌ZAM4‑4，于2022年10月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.25982，还涉及所述灰色链霉菌ZAM4‑4在辣椒疫病中的应用。本...
- 马冠华龙梅梅陈国康窦彥霞董国菊孙现超马小舟樊光进
- 一种抗菌铜纳米颗粒复合凝胶的制备方法
- 本发明公开了一种抗菌铜纳米颗粒复合凝胶的制备方法，属于纳米凝胶制备领域，将生物基高分子与具有还原性的生物基小分子混合，制备成混合溶液，加入表面活性剂后制成纳米乳液，再加入铜离子、交联剂，搅拌至破乳，离心收集后得到复合凝胶...
- 马小舟王晶瞿赛姣孙现超樊光进蔡璘汪代斌徐宸
- 大麦条纹花叶病毒中国株基因组RNA1的全长序列分析被引量：1
- 2008年
- 【目的】获得大麦条纹花叶病毒中国株(BSMV-CH)基因组RNA1的全长cDNA,进行序列分析,明确与国外报道株系间的亲缘关系和分类地位【。方法】以自然侵染BSMV-CH的大麦叶片中提取的总RNA为模板,用RT-PCR方法获得BSMV-CH RNA1的全长cDNA,克隆到载体pMD18并测序,用DNAstar软件将获得的序列与GenBank登录的BSMVRNA1序列进行对比,分析各株系序列RNA1之间的同源性,构建系统发育树分析BSMV-CH与国外株系间的亲缘关系。【结果】BSMV-CH的RNA1全长为3795bp(GenBank注册号:AY789693),基因组RNA15′端有一个甲基化的帽子结构,3′端有一个PolyA结构和一段239bp长的类似tRNA的保守序列,BSMV-CH基因组RNA1含有一个长度为3417bp的ORF,推测可编码一个1138个氨基酸的复制酶基因。BSMV-CH的基因组RNA1与国外报道其它株系核苷酸的同源性为95.4%～95.6%。复制酶基因同其它株系核苷酸和氨基酸的同源性分别为94.9%～95.2%和96.5%～96.8%,PolyA的长度比其它株系明显要长。【结论】BSMV-CH和CV42与CV17、ND18、TSE及TSG间的亲缘关系明显低于CV17、ND18、TSG和TSE间的亲缘关系;BSMV-CH与CV42表现相对较近的亲缘关系,但BSMB-CH是不同于CV42的一个BSMV新株系。
- 孙现超邱并生
- 关键词：大麦条纹花叶病毒同源性亲缘关系
- 一种pH调控药物释放载药水凝胶及其制备方法
- 本发明涉及植物病虫害防治药物技术领域，尤其涉及一种pH调控药物释放载药水凝胶及其制备方法，本发明将海藻酸钠表面羟基进行修饰为醛基，得到多醛基海藻酸钠，并让其与春雷霉素的氨基反应形成席夫碱，与氯化钙进行螯合反应，制成载药水...
- 孙现超向顺雨陈海涛马小舟黄进汪代斌王丽陈雪
- 文献传递
- 一种可防治根肿病的黄暗色链霉菌及其应用
- 本发明涉及一种可防治根肿病的黄暗色链霉菌CD1‑1，于2022年10月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.25979，还涉及所述黄暗色链霉菌CD1‑1在根肿病中的应用。本发明...
- 董国菊陈国康王青窦彦霞马冠华孙现超
- 贵州烟区烟草花叶病主要病毒种类检测
- 采用抗原直接包被酶联免疫吸附测定(EIJSA;对贵州烟区烟草花叶病样品进行了病毒种类检测。52个烟草样品共检测到烟草花叶病毒(TMV;及黄瓜花叶病毒(CMV;两种病毒，其检出率分别为32.69％和46.15％，未发现这两...
- 青玲包凌云陈炎杨水英孙现超窦彦霞
- 关键词：烟草花叶病检出率
- 重庆地区烟叶辣椒脉斑驳病毒的检测与鉴定被引量：1
- 2023年
- 为确定重庆烟区烟草叶片上出现黄化斑点、枯斑等症状的病原,进而制定出科学的综合防治措施,对采自重庆市涪陵和巫溪烟区与北碚试验田的18份烟叶样品进行了病毒种类检测与鉴定。根据病毒外壳蛋白基因序列设计了特异性引物,采用RT-PCR扩增及BLAST序列对比分析,结果表明:涪陵烟区烟叶上出现黄化斑点、枯斑等症状的样品中检测出烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)和辣椒脉斑驳病毒(Chilli veinal mottle virus,ChiVMV),检出率分别为54.55%和100%;巫溪烟区样品中检测出TMV和马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY),检出率分别为100%和66.67%;北碚烟草试验田病叶样品中检测出ChiVMV,检出率为100%。其中,ChiVMV为重庆地区烟草上首次发现。
- 田绍锐温玉霞马婷陈海涛徐宸汪代斌孙现超
- 关键词：烟草
- 重庆南瓜病毒病病原ELISA检测及CMV变异分析被引量：11
- 2010年
- 利用7种植物病毒的抗体,对采自重庆7个区县的67份南瓜病毒病样品进行了抗原直接包被酶联免疫吸附分析(ACP-ELISA)检测。检测结果表明,在这67份样品中,至少59份感染了所要检测病毒,其中,感染黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、番茄花叶病毒(Tomato mosaic virus,ToMV)、芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)、蚕豆萎蔫病毒2号(Broad bean wilt virus 2,BBWV-2)、马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)和马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)的样品分别为80.60%、77.61%、74.63%、82.09%、76.12%、83.58%和55.22%。在检测呈阳性的59份样品中有93.22%的样品受到2种以上病毒的复合侵染,而受7种病毒复合侵染的样品高达60.00%,表明在南瓜上病毒复合侵染现象相当严重。进一步对54份受CMV侵染的南瓜样品检测发现,CMV亚组Ⅰ(CMVⅠ)病毒侵染的样品有49份,占90.74%,CMV亚组Ⅱ(CMVⅡ)病毒侵染的样品为11份,占20.37%;其中6份(11.11%)样品检测到CMVⅠ和CMVⅡ的复合侵染。以免疫捕获反转录PCR(IC-RT-PCR)扩增了一个CMVⅠ分离物(CMV-CQ)近全长CP基因并进行序列分析,结果证实其属于CMV亚组Ⅰ型,其核苷酸序列与国内CMVⅠ型赤豆分离物(CMV-RB)的同源性最高,为98.1%。
- 青玲包凌云周常勇杨水英孙现超
- 关键词：南瓜病毒病ELISA检测外壳蛋白基因
- 我国枣树上发现植原体复合侵染
- 枣疯病（Jujube witches’ broom）是由植原体（Phytoplasma）引起的一类病害,因其防治难度大,具有毁灭性,俗称为枣树的"癌症"。国内外研究者利用16S rDNA基因片段对引起枣疯病的植原体进行分...
- 李婷婷武改霞孙现超青玲杨水英
- 关键词：枣疯病复合侵染
- 文献传递
