尹冰楠
- 作品数:16 被引量:35H指数:3
- 供职机构:天津医科大学更多>>
- 发文基金:天津市自然科学基金天津市卫生局科技基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学更多>>
- 医学微生物学实验教学体系改革被引量:2
- 2007年
- 针对不同教学对象的特性,建立新型医学微生物学实验教学体系,以利于实现培养新世纪创新性人才目标。在新型实验教学体系下,通过制定个性化教学大纲,体现学生的学制和专业特色;通过丰富教学层次,增加综合性和设计性实验比重,提高学生的创新思维和逻辑分析能力;通过转变传统“上对下”的教学方式,体现学生的自主地位、调动学生的学习主动性。
- 尹冰楠钟启平訾自强
- 关键词:医学微生物学实验教学创新性人才
- 融合基因CDglyES重组腺病毒对卵巢癌细胞抑制作用的体外研究被引量:2
- 2014年
- 目的:构建含CDglyES融合基因的重组腺病毒,体外观察其对人卵巢癌细胞的直接抑制作用及其对血管内皮细胞生长的抑制作用。方法:用细菌内同源重组方法构建腺病毒穿梭质粒prAdCDglyES。采用脂质体介导转染293包装细胞,扩增获取重组腺病毒rAdCDglyES。采用MTT法观察rAdCDglyES对卵巢癌细胞SKOV-3生长抑制的影响,同时观察其表达产物抑制脐静脉血管内皮细胞ECV-304增殖的作用。结果:纯化的rAdCDglyES滴度是1×1013.3TCID50/L,其对SKOV-3细胞生长抑制率是(83.1±6.3)%,与对照组rAd-LacZ(24.1±13.2)%相比有显著性差异(P<0.01)。浓缩的转染rAdCDglyES的细胞培养上清液抑制ECV-304细胞增殖,抑制率是(78.7±1.6)%,而同样浓缩的转染rAd-CD的细胞培养上清液抑制率是(23.9±9.7)%,二者有显著性差异(P<0.01)。结论:研究结果表明重组腺病毒rAdCDglyES具有体外直接和间接抑制人卵巢癌细胞效能。
- 李圃李冬田尹冰楠汤华尹利荣
- 关键词:人卵巢癌细胞胞嘧啶脱氨酶基因内皮抑素重组腺病毒
- 重组腺病毒rAdCDglyES体内抑瘤作用的研究
- 2005年
- 目的:探讨重组腺病毒rAdCDglyES对肺癌的体内抑、杀瘤作用。方法:建立近交纯系C57BL小鼠Lewis肺癌模型;于小鼠荷瘤部位注射定量的重组腺病毒rAdCDglyES并给予5-氟胞嘧啶。通过观测小鼠瘤体大小、重量,中位生存期,及组织病理学改变判定疗效。结果:对荷瘤小鼠连续10d的治疗观测后发现,实验组与对照组之间平均瘤重有显著性差异(P<0.05);对荷瘤小鼠的中位生存期比较发现实验组较对照组天数有显著性差异(P<0.05);对实验组和对照组肿瘤进行HE染色后病理检测,镜下所见,含ES基因的实验组小鼠瘤组织血管数明显少于对照组,仅为对照组的53.85%(14/26)。结论:rAdCDglyES/5-FC对C57BL小鼠的Lewis肺癌有明显的抑杀瘤作用。
- 李光明李冬田尹冰楠李秋香佟惠春
- 关键词:自杀基因
- 融合CD-ES基因治疗恶性肿瘤的实验研究
- 李冬田李秋香佟惠春李菲尹冰楠李光明孙健何明伟朱小代
- 研究将两个不同功能的基因(CD 、ES)作成融合基因,再导入穿梭质粒,最后通过细菌内重组法及在293细胞内包装、扩增重组腺病毒 (rAdCDglyES),使其具有直接杀伤瘤细胞,阻止瘤新生血管形成、间接杀伤瘤细胞和阻止瘤...
- 关键词:
- 关键词:融合基因基因治疗恶性肿瘤
- 肝细胞癌基因治疗的体外实验研究被引量:1
- 2003年
- 目的 :构建一种对肝细胞癌有直接、间接治疗作用的重组腺病毒。方法 :用PCR方法扩增CD基因和glyES基因片段 ,插入腺病毒穿梭质粒。用细菌内同源重组方法与腺病毒骨架质粒重组构建出重组腺病毒质粒。经脂质体介导转染293包装细胞扩增获取重组腺病毒rAd CDglyES。用MTT法检测其对肝癌细胞株 (SMMC -7721)的生长抑制率及其表达产物对经ECGF处理的脐静脉血管内皮细胞 (ECV -304)增殖的影响。结果 :纯化的重组腺病毒滴度为1×1013 3TCID50/L ,对SMMC 7721的生长抑制率达 (82 1±8 3) % ,与对照组 (24 6±14 1) %比较有显著性差异 (P<0 01)。浓缩的转染了该重组腺病毒的细胞培养上清液对ECV 304细胞增殖的抑制率为(78 7±1 8) % ,而同样浓缩的转染了对照重组腺病毒rAd CD的细胞培养上清液的抑制率仅为 (24 2±9 7) % ,两者亦有显著性差异 (P<0 01)。结论 :rAd
- 李菲李冬田张巍佟惠春尹冰楠
- 关键词:肝细胞癌基因治疗体外实验研究胞苷脱氨酶腺病毒
- 含TKglyES融合基因重组质粒的构建
- 2005年
- 目的:构建携带胸腺嘧啶激酶(thymidinekinase,TK)及内皮抑素(Endostatin,ES)融合基因的重组质粒。方法:以pAdE1CMV-TK为模板,经聚合酶链反应(PCR)扩增TK片段,将其插入腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV,再以PET-19b-ES质粒为模板经PCR扩增glyES片段,将其插入TK片段的下游,构建成pAdTrackCMV-TKglyES。结果:酶切、PCR及DNA测序鉴定表明成功构建了携带胸腺嘧啶激酶(thymidinekinase)及内皮抑素(Endostatin)融合基因的重组质粒。结论:为进一步构建病毒载体用于肿瘤基因治疗打下基础。
- 滕颖李秋香李冬田尹冰楠
- 关键词:内皮抑素
- 细菌内同源重组法构建含融合自杀基因CDglyTK的重组腺病毒
- 该研究首先从质粒pBlueScript-CD中PCR扩增出带有酶切识别位点的EC-CD基因片段,利用PCR产物两末端带有的单个A碱基,与带有单个T碱基末端的PMD1 8-T载体借助碱基互补相连接,构建成质粒PMD1 8-...
- 尹冰楠
- 关键词:胸苷激酶胞嘧啶脱氨酶融合自杀基因重组腺病毒基因治疗
- 文献传递
- 人脐静脉内皮细胞的分离培养与鉴定被引量:6
- 2000年
- 目的 :建立体外培养原代人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)的方法 ,并对培养的细胞进行鉴定 ,为人工血管立体环化打下基础。方法 :胶原酶灌注法分离HUVEC ,用含胎牛血清的RPMI—1640营养液培养。光镜、电镜、免疫荧光方法进行形态学鉴定 ,放射免疫法测定其细胞活性与分泌激素功能。结果 :分离的HUVEC体外培养一周左右可长成单层 ,光镜下为多角形 ,呈铺路石子状排列。透射电镜可见W -P小体。荧光染色Ⅷ因子相关抗原阳性 ,培养上清中含高浓度6 -keto -PGF1a与ET。结论 :所培养的细胞为HUVEC 。
- 徐燕訾自强苏琦华王立军尹冰楠栗力刘祖义
- 关键词:人脐静脉内皮细胞体外培养
- 一种简易、廉价、高效构建重组腺病毒载体的方法被引量:9
- 2005年
- 目的:建立构建重组腺病毒载体的简易、廉价、高效方法,为进一步应用含自杀基因的重组腺病毒治疗恶性肿瘤奠定基础。方法:PmeⅠ线性化腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV、切胶纯化,与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1按一定比例混合后,以化学转化法导入大肠杆菌BJ5183,在菌内进行同源重组,构建重组腺病毒质粒rpAdEasyGFP。以脂质体法将重组质粒转染293细胞包装重组腺病毒rAdGFP。结果:细菌内同源重组率高达80%;在293细胞中成功产生重组腺病毒。结论:对目前应用广泛的AdEasy系统进行了有效改进,在获得较高阳性重组率的同时,降低了对实验室设备的要求。
- 尹冰楠李冬田李秋香
- 关键词:腺病毒载体大肠杆菌同源重组
- 腺病毒介导CDES融合基因对乳腺癌细胞的抑制作用
- 2005年
- 目的:构建一种重组腺病毒rAdCDES,在体内外进行抑瘤和放疗增敏作用实验研究。方法:用细菌内同源重组法与腺病毒骨架质粒重组构建出重组腺病毒质粒,经脂质体介导转染293包装细胞扩增获取重组腺病毒rAdCDES。用测定生长曲线和MTT法检测其对人乳腺癌细胞株MCF-7的生长抑制情况;建立津白号鼠乳腺癌模型,观察rAdCDES和放疗对瘤体大小及鼠存活期的影响。结果:成功构建了rAdCDES;rAdCDES对MCF-7细胞生长抑制率达(83.1±8.1)%,与对照rAdLacZ (19.2±7.8)%相比较有显著性差异(P<0.01);体内rAdCDES对小鼠乳腺癌MA737细胞有明显生长抑制作用,延长了小鼠的存活期,且对放疗有肯定的增敏作用。结论:本文所构建的rAdCDES在体内外对乳腺癌细胞均有明显的抑制作用和对放疗的增敏作用。
- 李秋香李冬田佟惠春尹冰楠李光明
- 关键词:乳腺癌腺病毒基因疗法