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P450cam突变体蛋白表达、纯化与结晶的改进及其四突变体(F87L/Y96F/L244A/V247A)晶体结构被引量：2: 2004年; 在P4 5 0cam突变体蛋白纯化过程中使用 2 80nm/ 392nm双波长比值检测蛋白质纯度 ,采用 β 巯基乙醇对蛋白质进行还原性保护 ,有效地缩短了纯化进程 ,纯化效率相应提高 .以PEG 80 0 0为沉淀剂经悬滴汽相扩散法筛选得到适合衍射的P4 5 0cam四突变体 (F87L/Y96F/L2 4 4A/V2 4 7A)晶体 ,在Mar Research面探测器系统上收集了0 2 2nm分辨率的X射线衍射数据 .采用同晶差值傅立叶法解析结构 ,最后的晶体学R因子和Rfree分别为 0 197和 0 2 4 7,键长偏差为 0 0 0 177nm ,键角偏差为 1 96°.结构测定显示P4 5 0cam四突变体 (F87L/Y96F/L2 4 4A/V2 4 7A)和P4 5 0cam野生型的整体构象无重大变化 ,突变后活性口袋变大而疏水性增加 ,这与突变设计预期目标一致 .; 刘斌斌孙蕾徐峰娄智勇庞海L.L.WONG刘一苇; 关键词：纯化晶体结构

SARS冠状病毒钉状蛋白的高免疫原性片段、编码序列及其应用: 本发明一方面提供了SARS冠状病毒钉状蛋白的SG3片段，该片段由148个氨基酸构成，具有很高的免疫原性和血清学反应特异性，并且可以在原核表达系统中高效表达。本发明另一方面提供了SG3片段的编码序列，以及SG3片段的克隆、...; 饶子和庞海李慎海李雪梅韩雪清金英花徐彦辉; 文献传递

人肝L-丝氨酸脱氢酶的晶体结构研究: ＜正＞L-丝氨酸脱氢酶（以下简称SDH）广泛存在于各物种中,催化丝氨酸和苏氨酸发生转氨作用,生成丙酮酸和氨。这是丝氨酸碳骨架进入三羧酸循环的关键入口方式,在生物体生理活动中具有重要意义。SDH是一种磷酸吡哆醛（PLP）依...; 孙蕾Mark Bartlam刘一韦庞海饶子和; 文献传递

SARS冠状病毒钉状蛋白的高免疫原性片段、编码序列及其应用: 本发明一方面提供了SARS冠状病毒钉状蛋白的SG3片段，该片段由148个氨基酸构成，具有很高的免疫原性和血清学反应特异性，并且可以在原核表达系统中高效表达。本发明另一方面提供了SG3片段的编码序列，以及SG3片段的克隆、...; 饶子和庞海李慎涛李雪梅韩雪清金英花徐彦辉; 文献传递

人乳头瘤病毒16型(新疆株)E6基因的原核表达: 2002年; 根据人乳头瘤病毒 16 (新疆株 ) E6基因编码序列设计引物 ,从含有 HPV16 E6基因的质粒中扩增出含 HPV16 E6基因的 DNA片段 ,该片段全长 4 5 0 bp,将所得片段与 p MD18- T载体连接 ,转化到 JM10 9大肠杆菌中 ,筛选的阳性克隆扩增后 ,提取质粒 DNA,用 Bam H I和 Sal I酶切 ,回收 4 5 0 bp的目的片段 ,定向克隆到 p ET2 8a中 ,转化 JM10 9受体菌 ,从 JM10 9受体菌中提出质粒 ,再转化到 BL2 1(DE3)中 ,筛选出转化体 ,用 IPTG诱导表达 ,在 PAGE上见到所表达的18k D的特异性的 HPV16 (新疆株 ) E6蛋白条带。; 李慎涛庞海张富春; 关键词：人乳头瘤病毒16型 E6基因原核表达 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳基因表达

利用谷胱甘肽S转移酶表达标签捕获系统性红斑狼疮相关基因IFIT1的相互作用蛋白质被引量：22: 2003年; 目的　试图运用蛋白组学的策略研究系统性红斑狼疮 (SLE)相关的干扰素诱导蛋白IFIT1的蛋白质相互作用 ,以揭示其可能的功能。方法　应用荧光实时定量PCR进一步验证SLE患者外周血白细胞转录水平IFIT1基因的表达 ;应用分子克隆技术在大肠杆菌克隆并表达谷胱甘肽S转移酶 (GST) IFIT1融合蛋白 ;利用GST表达标签 ,以GST IFIT1为饵蛋白捕获SLE外周血白细胞蛋白裂解物中与IFIT1存在相互作用的蛋白质 ,MALDI TOF MS肽指纹图谱进行蛋白质鉴定。结果　荧光实时定量PCR证实IFIT1基因确在SLE(4 0例 )较正常对照 (2 9例 )表达上调 (P <0 0 0 1)。克隆表达了GST IFIT1融合蛋白 ,并捕获到一个与IFIT1存在相互作用的蛋白质 ,经肽指纹图谱初步鉴定为Rho/Rac鸟嘌呤核苷交换因子。结论　IFIT1是SLE新的相关基因。运用蛋白组学的策略研究IFIT1蛋白质水平的相互作用显示 ,IFIT1与Rho/Rac鸟嘌呤核苷交换因子存在相互作用 ,IFIT1可能通过该途径影响Rho蛋白的活化 ,参与SLE的发病。; 叶霜庞海顾越英沈南陈顺乐陈兴国华晶钱捷饶子和; 关键词：谷胱甘肽S转移酶系统性红斑狼疮基因 IFIT1 蛋白质

人核心蛋白聚糖成熟蛋白编码序列的cDNA克隆与表达: ＜正＞核心蛋白聚糖（Decorin）是一种富含亮氨酸的蛋白聚糖,含有一个核心蛋白和一个单链氨基多糖,是许多结缔组织胞外基质的成分。人的Decorin cDNA编码330个氨基酸,分子量为36.32kD。Decorin的...; 李慎涛庞海李雪梅吴昕张晓雪段昕吴昊饶子和; 文献传递

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庞海