张宝辉
- 作品数：33 被引量：138H指数：8
- 供职机构：中国医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 木犀草素通过诱导型一氧化氮合酶/一氧化氮途径抑制哮喘幼鼠气道炎症被引量：17
- 2020年
- 目的探讨木犀草素对哮喘幼鼠肺组织及血清诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及一氧化氮(NO)的影响。方法36只BALB/c幼鼠,雌雄不限,随机分为对照组、哮喘组和木犀草素组,卵蛋白致敏的方法制备哮喘幼鼠模型。收集支气管肺泡灌洗液(BALF),进行细胞总数计数及嗜酸性粒细胞计数,免疫组织化学方法与Western blot方法检测各组幼鼠肺组织iNOS蛋白表达,硝酸还原酶法检测肺组织iNOS活性及NO含量,ELISA方法检测肺组织白细胞介素-4(IL-4)及干扰素-γ(IFN-γ)水平。结果细胞计数结果显示,木犀草素能够降低哮喘幼鼠BALF细胞总数及嗜酸性粒细胞数(P<0.01)。免疫组织化学与Western blot结果显示,木犀草素能够降低哮喘幼鼠肺组织iNOS蛋白表达(P<0.01)。硝酸还原酶法检测结果显示,木犀草素能够降低哮喘幼鼠肺组织iNOS活性及NO含量(P<0.01)。ELISA结果显示,木犀草素能够降低哮喘幼鼠肺组织IL-4表达水平,上调哮喘幼鼠肺组织IFN-γ表达水平(P<0.01)。结论木犀草素能够降低哮喘幼鼠气道炎症,其机制可能与抑制诱导型一氧化氮合酶/一氧化氮信号途径有关。
- 邹华石立慧王颖张宝辉
- 关键词：木犀草素诱导型一氧化氮合酶一氧化氮幼鼠
- MiR-141对胃癌细胞SGC-7901增殖、侵袭能力的影响被引量：5
- 2017年
- 目的观察miR-141在胃癌组织中的表达变化,及miR-141对胃癌细胞株SGC-7901增殖、侵袭能力的影响。方法收集116例胃癌患者的胃癌组织及癌旁正常胃组织,采用real-time PCR方法检测miR-141的表达水平,将化学合成的miR-141拟物和miR-141抑制剂转染至胃癌SGC-7901细胞,分别于培养12、24、48、72 h后采用MTT法检测细胞增殖能力,培养24 h后Transwell小室检测细胞侵袭能力,采用Western blot法检测细胞中的MMP-2、MMP-9蛋白的表达。结果胃癌组织中miR-141相对表达量显著低于癌旁组织(P<0.01)。转染miR-141模拟物24、48、72 h后,SGC-7901细胞增殖能力显著降低,转染miR-141抑制剂后SGC-7901细胞增殖能力显著升高(P<0.01)。转染miR-141模拟物24 h后,穿膜细胞数、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白相对表达量显著降低,转染miR-141抑制剂后穿膜细胞数、MMP-2、MMP-9蛋白相对表达量显著升高(P<0.01)。结论胃癌组织中miR-141低表达可能与胃癌的发生发展有关,miR-141抑制胃癌细胞增殖、侵袭的作用机制可能与下调MMP-2、MMP-9蛋白表达有关。
- 张伯恒张宝辉
- 关键词：人胃癌SGC-7901细胞增殖
- 哮喘小鼠C_7～T_5节段脊髓后角BDNF及其受体TrkB的表达研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨在哮喘发病中,脑源性神经营养因子(BDNF)及其高亲和力受体酪氨酸激酶B(TrkB)在哮喘小鼠C7～T5节段脊髓后角内的表达变化。方法BALB/c小鼠20只,按随机数字表法均分为正常对照组和哮喘组,利用AniRes2005肺功能仪测小鼠气道阻力、免疫荧光方法和Western blot方法检测各组小鼠C7～T5节段脊髓后角内BDNF及其高亲和力受体TrkB的表达变化。结果哮喘组小鼠吸气阻力和呼气阻力明显高于正常组(P<0.01),哮喘模型建立成功。免疫荧光结果显示哮喘组C7～T5节段脊髓后角内BDNF及TrkB阳性产物的平均光密度值(MOD)显著高于正常对照组(P<0.01),Western blot方法检测也得到了相同的结果。结论哮喘小鼠C7～T5节段脊髓后角内BDNF及TrkB的表达升高。
- 张宝辉方秀斌刘晓湘
- 关键词：哮喘脑源性神经营养因子酪氨酸激酶B脊髓后角小鼠
- 大鼠脊髓压迫损伤后COX-2基因和蛋白的表达被引量：4
- 2008年
- 目的观察大鼠脊髓压迫损伤后COX-2mRNA和蛋白在脊髓组织内表达的时间特征,以及COX-2的空间分布特点。方法以压迫装置致脊髓损伤后,在伤后不同时间点(30min、3h、6h、24h、72h、1w)分别应用RT-PCR、Western blotting、免疫组化技术检测COX-2mRNA和蛋白表达和分布。结果RT-PCR和Western blotting显示,COX-2mRNA和蛋白伤后30min表达开始增加,于伤后6h达到峰值,伤后1w表达接近基础水平。免疫组化提示,COX-2蛋白在假手术组表达仅见于脊髓血管内皮细胞,伤后COX-2蛋白表达见于损伤区附近脊髓灰质内的神经元和血管内皮细胞,损伤中心部位COX-2免疫阳性细胞少见。结论脊髓压迫损伤早期可快速诱导COX-2基因的表达上调和蛋白的合成,伤后COX-2蛋白分布发生变化,主要位于脊髓神经元和血管内皮细胞。
- 于德水纪宇红张宝辉谷艳婷刘丽波吕刚
- 关键词：环氧化酶-2脊髓损伤脊髓逆转录聚合酶链反应
- 白藜芦醇抑制哮喘幼鼠肺组织TLR4与TRIF的表达
- 2018年
- 目的探讨白藜芦醇对哮喘幼鼠肺组织toll样受体4(TLR4)与β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)表达的影响。方法 45只BALB/c幼鼠随机分为对照组、哮喘组和白藜芦醇组。采用卵清蛋白(OVA)刺激,建立幼鼠哮喘模型。HE染色观察各组幼鼠肺组织病理学改变,测定各组幼鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及嗜酸粒细胞(EOS)数,Western blot方法检测各组幼鼠肺组织TLR4与TRIF的蛋白表达变化,real time PCR方法检测各组幼鼠肺组织TLR4 mRNA与TRIF mRNA的表达水平。结果与对照组相比,哮喘组幼鼠肺组织可见明显的炎性细胞浸润,气道管壁明显增厚,BALF中细胞总数及嗜酸粒细胞计数显著升高,P<0.01;与哮喘组相比,白藜芦醇组幼鼠肺内炎性细胞浸润明显减轻,BALF中细胞总数及嗜酸粒细胞计数显著降低,P<0.01。与对照组相比,哮喘组幼鼠肺组织TLR4与TRIF的蛋白与mRNA表达水平显著升高,P<0.01;与哮喘组相比,白藜芦醇组幼鼠肺组织TLR4与TRIF的蛋白与mRNA表达水平显著降低,P<0.01。结论白藜芦醇能够抑制哮喘幼鼠肺组织TLR4与TRIF的表达。
- 魏晶王青筠王颖陆颖王莹巍张宝辉
- 关键词：哮喘白藜芦醇TOLL-LIKERECEPTORTRIF幼鼠
- Akt/PKB对哮喘小鼠Fas表达的调节作用被引量：3
- 2010年
- 目的探讨在哮喘发病中,Akt/PKB(protein kinase B)对哮喘小鼠C7-T5节段脊神经及相应节段脊髓后角内Fas表达的调节作用。方法BALB/c小鼠30只,按随机数字表法均分为正常对照组、哮喘组、Akt/PKB阻断组,利用肺功能仪测小鼠气道阻力、免疫荧光方法检测各组小鼠C7-T5节段脊神经及相应节段脊髓后角内Fas的表达、Western blot检测各组小鼠C7-T5节段脊神经内Fas的表达。结果哮喘组小鼠吸气阻力和呼气阻力明显高于正常组(P<0.01);免疫荧光结果显示哮喘组C7-T5节段脊神经及相应节段脊髓后角内Fas阳性产物的平均光密度值(mean optical density,MOD)高于正常对照组(P<0.01);而Akt/PKB阻断组与哮喘组相比,上述部位Fas阳性反应产物的MOD值明显升高(P<0.01)。Western blot结果显示:与正常对照组比较,哮喘组小鼠C7-T5节段脊神经内Fas的相对灰度值(integrated density value,IDV)与内参照IDV的比值明显降低(P<0.05),而Akt/PKB阻断组Fas目标带的IDV与内参照IDV的比值则明显高于哮喘组(P<0.05)。结论在NGF介导的哮喘发病机制中,Akt/PKB能下调哮喘小鼠C7-T5节段脊神经及相应节段脊髓后角内Fas的表达。
- 张宝辉朱小兵刘晓湘方秀斌
- 关键词：哮喘蛋白激酶B脊神经节脊髓后角
- 促红细胞生成素对哮喘小鼠肺组织VEGF及ICAM-1表达的影响被引量：1
- 2019年
- 目的探讨促红细胞生成素对哮喘小鼠肺组织血管内皮生长因子(VEGF)及细胞间黏附分子(ICAM)-1的影响。方法36只BALB/c小鼠,雌雄不限,随机分为对照组、哮喘组和促红细胞生成素组,卵蛋白致敏的方法制备哮喘小鼠模型。用乙酰甲胆碱行支气管激发试验,测定各组小鼠气道阻力的变化;收集支气管肺泡灌洗液(BALF),进行细胞总数计数及嗜酸性粒细胞计数,免疫组织化学和Westernblot方法检测各组小鼠肺组织VEGF与ICAM-1的表达。结果促红细胞生成素能够降低哮喘小鼠的气道阻力,降低BALF中细胞总数及嗜酸粒细胞数(P<0.01)。免疫组织化学和Westernblot的光密度值分析结果显示,促红细胞生成素组小鼠肺组织VEGF与ICAM-1蛋白表达的平均光密度值显著低于哮喘组小鼠(P<0.01)。结论促红细胞生成素可降低哮喘小鼠气道阻力及肺内炎症,与下调VEGF与ICAM-1的蛋白表达相关。
- 王燕冯大鹏孙连碧张宝辉
- 关键词：哮喘促红细胞生成素气道阻力VEGFICAM-1小鼠
- 哮喘小鼠C7-T5节段脊髓后角Kinesin-1的表达
- 2014年
- 目的探讨哮喘发病中驱动蛋白-1(Kinesin-1)在哮喘小鼠C7~T5节段脊髓后角内的表达变化。方法 BALB/c小鼠20只,按随机数字表法均分为正常对照组和哮喘组,利用AniRes2005肺功能仪测小鼠气道阻力,免疫荧光方法和Western印迹方法检测各组小鼠C7~T5节段脊髓后角内Kinesin-1的表达变化。结果哮喘组小鼠吸气阻力和呼气阻力明显高于正常组(P<0.01),哮喘模型建立成功。免疫荧光结果显示哮喘组C7~T5节段脊髓后角内Kinesin-1阳性产物的平均光密度值(MOD)显著高于正常对照组(P<0.01),Western印迹方法检测也得到了相同的结果。结论哮喘小鼠C7~T5节段脊髓后角内Kinesin-1的表达升高。
- 张宝辉方秀斌刘晓湘
- 关键词：哮喘脊髓后角
- 白藜芦醇抑制哮喘幼鼠肺组织Sirt1与AMPK的表达被引量：11
- 2018年
- 目的探讨白藜芦醇对哮喘幼鼠肺组织沉默信息调控因子1(Sirt1)与腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)表达的影响。方法 45只BALB/c幼鼠随机分为对照组、哮喘组和白藜芦醇组。采用卵清蛋白(OVA)刺激,建立幼鼠哮喘模型。HE染色观察各组幼鼠肺组织病理学改变,测定各组幼鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及嗜酸粒细胞(EOS)数,Western blot方法检测各组幼鼠肺组织Sirt1与AMPK的蛋白表达变化,real time PCR方法检测各组幼鼠肺组织Sirt1 mRNA与AMPK mRNA的表达水平。结果与对照组相比,哮喘组幼鼠肺组织可见明显的炎性细胞浸润,气道管壁明显增厚,BALF中细胞总数及嗜酸粒细胞计数显著升高;与哮喘组相比,白藜芦醇组幼鼠肺内炎性细胞浸润明显减轻,BALF中细胞总数及嗜酸粒细胞计数显著降低。与对照组相比,哮喘组幼鼠肺组织Sirt1与AMPK的蛋白与m RNA表达水平显著升高;与哮喘组相比,白藜芦醇组幼鼠肺组织Sirt1与AMPK的蛋白与mRNA表达水平升高更为显著。结论白藜芦醇能够促进哮喘幼鼠肺组织Sirt1与AMPK的表达。
- 魏晶王青筠王颖陆颖王莹巍张宝辉
- 关键词：哮喘白藜芦醇SIRT1AMPK幼鼠
- BDNF对哮喘小鼠C7-T5节段脊髓后角Kinesin-1表达的上调作用
- 2013年
- 目的探讨在哮喘发病中，脑源性神经营养因子（BDNF）对哮喘小鼠C7～T5节段脊髓后角内驱动蛋白-1（Ki．nesin-1）表达的调节作用。方法BALB／c小鼠30只，按随机数字表法均分为正常对照组、哮喘组、Anti．BDNF抗体组，利用AniRes2005肺功能仪测小鼠气道阻力、免疫荧光方法和westernblot方法检测各组小鼠cC7～T5节段脊髓后角内Kinesin-1的表达。结果哮喘组小鼠吸气阻力和呼气阻力明显高于正常组（P〈O．01），与哮喘组相比，Anti．BDNF抗体组吸气阻力和呼气阻力则明显降低；免疫荧光结果显示哮喘组C7-T5节段脊髓后角内Kinesin．1阳性产物的平均光密度值（MOD）显著高于正常对照组（P〈O．01）；而anti—BDNF抗体组与哮喘组相比，Kinesin-1阳性反应产物的MOD值则明显降低（P〈0．01）。westernblot方法也得到了相同的结论。结论BDNF被阻断后，哮喘小鼠C7～T5节段脊髓后角内Kinesin-1的表达降低。
- 张宝辉刘晓湘方秀斌
- 关键词：脊髓后角
