张忠明
- 作品数：89 被引量：161H指数：6
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- 相关领域：生物学农业科学医药卫生化学工程更多>>
- 用酵母双杂交系统筛选与拟南芥成膜素相关蛋白(PhrIP1)相互作用的蛋白质
- 2007年
- 用酵母双杂交系统,以pEG202-PhrIP1为诱饵筛选拟南芥AD-cDNA文库,寻找与成膜素相关蛋白(PhrIP1)相互作用的蛋白质。结果表明,在5×106个转化子中得到6个阳性克隆,经测序及体外蛋白质相互作用证实,得到与PhrIP1相互作用的2个靶蛋白,即Ran2小GTP结合蛋白和CIPK6钙调节激酶。
- 马立安王芳张忠明
- 关键词：酵母双杂交系统
- 3种植物Ran基因的克隆及序列分析被引量：1
- 2009年
- [目的]研究洋葱、大蒜和油菜中Ran基因与拟南芥Ran2基因的同源性,以确定3种植物材料能否作为拟南芥的替代材料研究Ran的定位。[方法]采用RT-PCR方法,以拟南芥Ran2的引物分别从洋葱、大蒜和油菜分裂细胞提取的总RNA中克隆出同源基因,进行测序、比对分析。[结果]洋葱、大蒜和油菜的Ran基因开放阅读框分别为666、663和666bp;分别编码221、220和221个氨基酸,分子量约24.3kD;与拟南芥AtRan2氨基酸序列同源性分别为99.1%、100.0%(除末端缺少1个天冬氨酸D外)和96.4%;进化树分析显示洋葱和大蒜Ran基因与拟南芥进化关系更近。[结论]为进一步研究植物Ran基因的生物学功能奠定了基础。
- 马立安张忠明
- 关键词：RT-PCR
- 基于DNA随机改组技术的扩增内标制备方法
- 一种生物技术领域的基于DNA随机改组技术的扩增内标制备方法，步骤包括：根据目的基因设计得到特异性检测引物和TaqMan探针；根据目标片断上的探针结合部位的DNA序列，采用DNA随机改组软件随机生成改组序列，将生成的改组序...
- 史贤明龙飞施春雷张忠明
- 文献传递
- 百脉根AD-cDNA文库的构建及与结瘤因子受体NFR1相互作用蛋白的鉴定被引量：3
- 2007年
- 以豆科植物百脉根为材料,构建了AD-cDNA表达文库。其库容量达到每3μg DNA 2×106酵母转化子,空载率为12.5%,平均片段长度为1.5 kb。以百脉根结瘤因子受体激酶基因1(nod factor receptor kinase,NFR1)蛋白激酶结构域的DNA片段(NFR1-PK)为诱饵,利用酵母双杂技术,筛选与NFR1相互作用的基因。结果在含X-gal的四缺选择性培养基上筛选到120个克隆。经质粒抽取、PCR鉴定、回转酵母验证得到80个阳性克隆。对26个确定阳性克隆的外源片段进行测序和同源性分析,通过NCBI数据库比对分析鉴定含有JAB1、AT-RICH结构域等4个与NFR1-PK相互作用的不同基因。通过半定量RT-PCR观察在百脉根中这些基因的表达情况,其结果可为进一步研究NFR1基因的功能和调控机制提供材料。
- 朱浩朱辉杨绮陈春芬张忠明
- 关键词：百脉根酵母双杂交
- 添有扩增内标的副溶血弧菌PCR检测方法
- 本发明涉及的是一种食品安全技术领域的添有扩增内标的副溶血弧菌PCR检测方法。本发明包括(1)人工构建合成扩增内标序列，并设计特异引物；(2)使PCR反应体系处于最优的反应条件；(3)PCR扩增；(4)提取不同血清型的副溶...
- 史贤明龙飞施春雷陈万义张忠明
- 文献传递
- 紫云英根瘤菌与豌豆根瘤菌共生质粒间的相互作用被引量：4
- 1992年
- 将豌豆根瘤菌共生质粒pJB5JI导入紫云英根瘤菌含共生质粒的7653R菌株和消除了共生质粒的7653R+1菌株中。7653R+1接合子获得了在碗豆上结瘤的能力,7653R接合子却不能在豌豆上结瘤。从而揭示出紫云英根瘤菌的共生质粒能抑制导入的豌豆根瘤菌共生质粒pJB5JI功能的表达。同时pJB5JI的导入使7653R接合子在其正常宿主紫云英上的结瘤固氮能力较亲本7653R显著提高。试验同时考察了pJB5JI导入紫云英根瘤菌后的稳定性。
- 张学贤周俊初张忠明李阜棣陈华癸
- 关键词：紫云英根瘤菌豌豆
- 百脉根小G蛋白ROP6在根瘤菌共生信号转导中作用机理的研究
- 柯丹霞朱辉张忠明
- 百脉根结瘤信号通道蛋白NSP1和NSP2的转录激活作用被引量：4
- 2010年
- 共生结瘤过程是根瘤菌与宿主植物交换信号分子的相互作用过程,结瘤信号通道蛋白基因NSP1和NSP2是结瘤因子诱导的共生信号转导途径的必要元件。LjNSP1和LjNSP2蛋白都包含植物所特有的GRAS结构域,推测为转录调节子,但缺乏明确的生化证据。为验证这一推测,本研究采用酵母双杂交系统,将两者分别融合到酵母GAL4转录因子的DNA结合结构域上,根据是否能激活报告基因的表达来验证它们的转录激活能力。结果表明LjNSP1和LjNSP2在酵母体内均具有转录激活的能力。为进一步确定转录激活的区域,对LjNSP1和LjNSP2构建了一系列的缺失突变,鉴别出转录激活区段均位于两者的N-末端的可变区域。为验证作为转录因子的LjNSP1和LjNSP2是否具有结合某种特定基因的启动子的能力,进行了酵母单杂交实验。其结果表明,LjNSP1和LjNSP2蛋白均能够结合根瘤起始基因NIN的启动子,但不能结合钙离子结合蛋白基因CBP1的启动子。
- 储晓洁康恒胡晓晶张忠明
- 关键词：百脉根转录激活酵母单杂交
- 紫云英根瘤菌( Rhizobium Astragali ) 基因文库的构建及结瘤基因的分离
- 张忠明
- 关键词：紫云英根瘤菌结瘤基因基因文库
- 酵母人工染色体载体的改造和修饰
- 1995年
- 将能在植物中表达的烟草花叶病毒ＣａＭＶ３５Ｓ启动子、ＧＵＳ基因、潮霉素（Ｈｙｇｒｏｍｙｃｉｎ）基因及ＮＯＳ终止子组建到酵母人工染色体（ＹＡＣ）载体，构建了具有能在植物细胞中表达和选择ｐＹＡＶ、ＧＵＳ、ｐＪＳ９７／ｐＪＳ９８－ＨＹＹＡＣ载体系统和一个标记ＹＡＣ克隆的ｐＵＲ４３－ＨＹ质粒。
- 张忠明Gres.,PM
- 关键词：酵母人工染色体烟草植物基因烟草花叶病毒
