张树政
- 作品数：91 被引量：710H指数：14
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国科学院科研项目中国科学院知识创新工程重要方向项目更多>>
- 相关领域：生物学化学工程轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 泡盛曲霉(Aspergillus awamori)葡萄糖淀粉酶基因克隆及在酒精酵母中的表达与分泌被引量：6
- 1997年
- 泡盛曲霉(Aspergillus awamori)产生的葡萄糖淀粉酶是一种诱导的糖蛋白,它具α-1,4和α-1,6-D-glucan glucohydrolase活性,广泛用于需糖化淀粉的工艺.若将该酶基因导入啤酒酵母,构建能直接利用淀粉的酵母工程菌株,可省去淀粉液化和糖化的过程.国际上已有将泡盛曲霉的葡萄糖淀粉酶导入啤酒酵母的报道.该酶作用最适温度为60℃,对食用乙醇生产工艺较为有利.因此,我们用RT-PCR技术克隆了泡盛曲霉葡萄糖淀粉酶Ⅰ基因,将其置于酵母烯酸酶(Enolase)启动子(Promotor)和终止子(Terminator)之间,构建了表达载体,转化非营养缺陷型酒精酵母AS.2.1364,获得能将淀粉转化为葡萄糖并可发酵产生酒精的转基因酵母菌株.1 材料与方法(1)菌种及培养基 泡盛曲霉(Aspeergillus awamori)NMRL3112,葡萄糖淀粉酶Ⅰ基因供体,采用文献的培养基;酒精酵母(Sacchromyces cerevisiae)AS.2.1364为葡萄糖淀粉酶基因受体,采用YPD培养基;转化酵母采用YPDS培养基,含1%葡萄糖和1%可溶性淀粉.大肠杆菌TG1作为pAC1(由刘宏迪保存)及测序质粒pGEM-3zf(+)的宿主菌,采用LB培养基,氨卞青霉素抗性.
- 王永吉刘宏迪孙彤张树政
- 关键词：泡盛曲霉葡萄糖淀粉酶基因克隆酒精酵母
- 嗜热菌的耐热 L-乳酸脱氢酶的研究被引量：8
- 1991年
- 从广东各地的热温泉(55—95℃)水样中,分离到200余株最适生长温度高于70℃的极端嗜热菌。其中一株编号为 HG25,具有耐热胞内 L-乳酸脱氢酶(L-Lactate dehydrogenase EC.1.1.1.27.,简称 LDH),有栖热菌属(Thermus)的特征,革兰氏阴性,无芽孢,好氧,不运动,产黄色素,最适生长温度为65—75℃,最高生长温度为85℃,最低为40℃,不水解淀粉,不从葡萄糖产酸,DNA 的 G+C 百分含量为65mol%,L-乳酸脱氢酶经硫酸铵分级沉淀、DEAE-纤维素柱层析作了初步提纯,比活提高7倍,LDH 还原丙酮酸反应的最适温度为60℃,最适pH为8.0,酶在70℃稳定,保温10分钟后,仍保留85%的原始酶活力。失活半寿期(t_(1/2))为85℃10分钟。
- 杨寿钧蔡妙英刘俊凤顾雅君王政一张树政
- 关键词：嗜热菌栖热菌属L-乳酸脱氢酶
- 溜曲霉β-N-乙酰氨基己糖苷酶的化学修饰被引量：1
- 1992年
- 用几种蛋白质侧链修饰试剂对β-N-乙酰氨基己糖苷酶进行化学修饰,在一定条件下,当巯基、羟基、酪氨酸残基分别被 IAA 及 NEM、PMSF、NAI 修饰后,酶活力不受影响,说明这些基团与活力无关。当羧基、组氨酸及色氨酸残基分别被 EDC、DEP、NBS 修饰后,酶活力大幅度下降,说明这些基团或者参与了酶催化作用,或者位于酶活性位区附近。
- 李梅陶勇严自正张树政
- 关键词：溜曲霉乙酰氨基
- 海枣曲霉β-D-岩藻糖苷酶的研究被引量：3
- 1992年
- 虽然β-D-岩藻糖苷酶(EC3.2.1.38)已从多种动植物中分离纯化,但因它们的专一性均不高而难以确证。我们从海枣曲霉(Aspergillus phoenicis)培养物中提取,经过 PEG6000-磷酸缓冲液双水相分离,相继用 DEAE-sephadex A-50、羟基磷灰石、Sephadex G-100等柱层析分离,获得了凝胶电泳均一的β-D-岩藻糖苷酶,比活力提高500倍。酶反应的最适条件为40℃和 pH 6.0,在35℃以下和 pH5.5—6.5稳定。凝胶过滤法测分子量为50000—60000,用 SDS-PAGE 测出分子量为57000。酶的 K_m 值为2.4mmol/L,V_(max)为12.8μmol·min^(-1)·mg^(-1)。金属离子 Ag^+、Hg^(2+)对酶有强抑制作用,巯基乙醇和牛血清清蛋白以及甘油和多种糖能提高酶活力。化学修饰结果表明,-SH、—COOH 基团和组氨酸、色氨酸残基为酶活力所必需。该酶只能水解 pNP-β-D-岩藻糖苷,有严格的底物专一性,并能专一地受 D-岩藻糖和 D-岩藻糖酸-γ-内酯所抑制,为迄今为止最专一的β-D-岩藻糖苷酶,堪称该酶的典型代表。
- 曾宇成李玉德顾雅君张树政
- 关键词：岩藻糖苷酶海枣曲霉
- 含低聚糖饮料的制备方法
- 本发明提供一种延长供能，增强机体耐力和做功能力，具有易消化低甜度，低渗特性的含有低聚糖饮料，该饮料不仅适用于运动员，对于正常人和一般劳动者来说，食用这些新型糖，对骨骼生长，改善消化机能，增强免疫答应能力也有很好的效果。本...
- 王俊英孙显良张树政刘沁涛姜丽萍陈吉棣
- 文献传递
- 耐热中性蛋白酶产生条件及酶的亲和层析纯化被引量：13
- 1994年
- 从云南西双版纳分离的耐热菌株中筛选到菌号为HY-69的菌株,经鉴定为嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus).该菌产中性蛋白酶.对该菌株的产酶条件进行了研究,酶的产量和耐热性均优于其它菌株.发酵液经超滤浓缩、硫酸铵沉淀后以亲和层析纯化.粗酶分别以Cbz-L-phe-T-sepharose 4B和Cbz-D-phe-T-sepharose 4B纯化,并对两种材料的纯化效果进行了比较,得到了PAGE和SDS-PAGE均一的酶.
- 金城杨寿钧刘宏迪张树政
- 关键词：嗜热
- 人免疫缺陷病毒(HIV)与糖基化被引量：14
- 2001年
- 张树政
- 关键词：HIV病毒糖基化艾滋病糖链
- 糖苷酶和糖基转移酶的研究进展
- 张树政
- 关键词：糖苷酶糖基转移酶
- 黑曲霉木聚糖酶的纯化与性质被引量：33
- 2000年
- 由凝胶电泳酶谱检测到黑曲霉１４９发酵液中存在两型木聚糖酶，依次为Ｘ－Ⅰ和Ｘ－Ⅱ．通过硫酸铵分级沉淀及ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ５０柱层析分别将Ｘ－Ⅰ、Ｘ－Ⅱ纯化到凝胶电泳均一。由ＳＤＳ一凝胶电泳和浓度梯度凝胶电泳测得Ｘ－Ⅰ和Ｘ－Ⅱ的分子量分别为３７ｋＤａ，７６ｋＤａ，２４ｋＤａ和２３ｋＤａ，Ｘ－Ⅰ具有亚基。二者的含糖量分别为２７６％和７．３％。Ｘ－Ⅰ和Ｘ－Ⅱ最适反应温度分别为５０℃和５５℃，ｐＨ为４６和５．２。在ｐＨ４．６～９．２和ｐＨ４．０～１０．０之间Ｘ－Ⅰ、Ｘ－Ⅱ活力稳定。５０℃保温２４ｈ，Ｘ－Ⅰ活力仍为１００％，而Ｘ－Ⅱ的活力已降为２．８％。ＨｇＣｌ２和ＡｇＮＯ３显著抑制Ｘ－Ⅰ、Ｘ－Ⅱ的活力。Ｘ－Ⅰ与Ｘ－Ⅱ水解不同来源的木聚糖，其产物有所不同。
- 陈红歌朱静梁改芹严自正贾新成张树政
- 关键词：黑曲霉木聚糖酶纯化纸浆漂白
- 焦曲霉右旋糖酐酶的纯化和性质被引量：6
- 1992年
- 用制备凝胶电泳从焦曲霉(Aspergilluts ussus)菌株的培养液中分离纯化了右旋糖酐酶(EC 3.2.1.11)。纯酶经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析为均一的,比活力为820 u/mg,提高20.5倍。酶作用最适 pH 为5.0—5.5,最适温度为50℃,在 pH 4.5—7.5和40℃以下稳定,在50℃保温30分钟酶活力损失55%。用 SDS-凝胶电泳测定酶的分子量为68000,用聚丙烯酰胺凝胶薄层等电聚焦电泳测得 pI 值为5.5。紫外吸收光谱在274nm 有最大吸收值,低谷在252 nm。纯酶只作用于α-1,6-葡萄糖苷键,水解右旋糖酐的产物为异麦芽糖、异麦芽三糖、葡萄糖和少量的较高聚合度的异麦芽寡糖,该酶为内切型的。作用于交联葡聚糖凝胶(Sephadex)时,随其交联度的增加酶作用能力减弱。纯酶作用于不同分子量的右旋糖酐(MW:2×10~4、1×10^(?)、4×10~4)的K_m值分别为0.30%、0.61%和0.70%。Hg^(2+)、Ag^+对酶完全抑制,Cu^(2+)、Mn^(2+)、Pb^(2+)、Be^(2+)、Fe^(3+)和 F^-对酶有一定的抑制作用,金属螯合剂 EDTA 对酶活性无影响,N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)对酶强烈抑制。
- 程秀兰孙晋武王海燕严自正张树政
- 关键词：纯化
