张民泽
- 作品数：17 被引量：36H指数：3
- 供职机构：华南农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- PRRSV XH-GD株体外传代变化
- 本文就2007年分离的xH-GD株在Marc-145细胞上连续传代，得到了122个不同代次的毒株，在此基础上选取13株不同代次的毒株进行序列测定分析及病毒滴度变化研究，结果显示随着代次的增加，病毒的滴度呈现升高趋势，相反...
- 谢杰雄曹宗喜张民泽赵孟孟黄震张桂红
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒体外增殖病毒滴度生物学特性
- 文献传递
- PRRSV XH-GD株NSP7缺失感染性克隆的构建
- 2014年
- PRRSV的非结构蛋白NSP7是病毒的一种高度保守的非结构蛋白,NSP7可以进一步水解产生NSP7α,NSP7β。目前对于NSP7的研究相对较少,对其生物学功能尚不清楚。为了进一步了解PRRSV NSP7对于病毒的复制的作用,本试验通过反向遗传平台在PRRSV XH-GD全长病毒骨架中分别对NSP7α,NSP7β,NSP7编码区进行缺失,构建NSP7以及NSP7部分缺失株的全长cDNA的重组质粒,并对构建的重组质粒进行病毒拯救。结果表明,对NSP7α,NSP7β,NSP7缺失对病毒的拯救是致死性的,推测NSP7对于病毒的复制具有重要作用,本研究结果对于NSP7的相关功能研究提供一定的参考依据。
- 谢杰雄崔甜甜陈耀张民泽崔进查云峰孙龙赵孟孟邓胜朝张桂红
- 关键词：PRRSV
- 2株猪繁殖与呼吸综合征病毒全基因序列分析被引量：4
- 2012年
- 利用RT-PCR分段扩增的方法,扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)中山分离株(ZS-GD株)、珠海分离株(ZH-GD株)覆盖全长基因组的10个片段,分别克隆入pMD18-T载体进行序列测定,获得了PRRSV ZS-GD株和ZH-GD株基因组全长15320bp的核苷酸序列。利用生物信息学软件对PRRSV ZS-GD株和ZH-GD株全基因组序列进行了遗传进化分析,结果显示PRRSV ZS-GD株和ZH-GD株与美洲型参考株的核苷酸序列相似性分别为88.1%～97.8%和88.4%～98.0%;与欧洲型参考株(Lelystad)的核苷酸序列相似性分别为60.6%和60.4%,且在2株毒的Nsp2蛋白上有30个aa的缺失,表明PRRSV ZS-GD株和ZH-GD株均为美洲型分离株的缺失变异株。
- 张民泽闫明菲谢杰雄黄震曹宗喜吴欣伟郭泗虎张桂红
- 关键词：PRRSV基因组
- 两株猪繁殖与呼吸征病毒的分离鉴定及遗传变异分析被引量：2
- 2012年
- 从广东省发病猪场采集的组织和血清中分离到两株PRRSV,病料经RT-PCR检测为阳性,通过Marc-145细胞进行传代,可产生明显细胞病变,通过间接免疫荧光可检测到荧光信号,两株病毒分别命名为ZH-GD株和ZS-GD株。对两株病毒的ORF5和Nsp2高变区进行序列测定和分析,结果表明,PRRSV ZH-GD株和ZS-GD株的核苷酸序列与欧洲型代表株LV株间的相似性相对较远,与美洲株经典毒株VR-2332间的相似性分别为88.6%和88.1%,与中国经典美洲毒株CH-1a间的相似性分别为94.4%和93.0%。在Nsp2上有30个氨基酸的缺失,与JXA1、XH-GD等高致病性变异株的Nsp2缺失位置一致。分离的两株PRRSV均属于美洲型的变异株PRRSV。
- 张超轶吴欣伟闫明菲张亮权郭泗虎黄昌力黄震张民泽赵付荣张桂红
- 关键词：PRRSV
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立被引量：3
- 2013年
- 根据GenBank中已登录的美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)在Nsp7基因中的保守区域设计合成了1对特异性引物,通过反应条件的优化,建立了检测美洲型PRRSV的SYBRGreenⅠ实时定量PCR检测方法,同时与商品化荧光定量PCR试剂盒进行比对分析。结果表明,该方法特异性强,灵敏度高,能很好的区分美洲型猪繁殖与呼吸道综合征病毒和其他病毒。使用该方法对14份临床样品进行检测,阳性率85.7%,与商品化试剂盒符合率100%。
- 黄震魏春娅闫明菲田悦茹张民泽谢杰雄孙龙张桂红
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒实时荧光定量PCR
- 一株猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定被引量：1
- 2012年
- 为了对从湖南某发病猪场送检的血清中分离到的1株蓝耳病病毒进行鉴定,试验通过接种Marc-145细胞传代后产生明显而稳定的细胞病变,又经过RT-PCR及间接免疫荧光(IFA)检测成功验证;通过对分离株的ORF5基因的测序结果表明,ORF5核苷酸序列与欧洲型代表株LV株及北美经典毒株VR-2332、国内经典美洲株CH-1a的相似性分别为64.5%、87.4%、93.0%,说明其属于美洲型;而将NSP2高变区的测序结果与JXA1等高致病性变异株的Nsp2比较后发现,都在同一位置不连续缺失30个氨基酸。说明成功分离到1株北美型变异株,最终将其命名为PRRSV CZ-HN株。
- 郭泗虎曹宗喜李海琴闫明菲张超轶张民泽赵付荣张桂红
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 猪圆环病毒2型CC株ORF3基因序列分析及真核表达
- 2012年
- 根据GenBank中猪圆环病毒2型(PCV2)的核酸序列,设计了1对引物,采用PCR方法从疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的死亡仔猪病料中扩增出了ORF3基因,将其克隆到高效真核表达载体pEGFP-N2中,筛选出含有ORF3基因的重组质粒,命名为pEGFP-N2-ORF3。对此重组质粒进行测序分析,结果表明,克隆的ORF3基因与其他PCV2的ORF3核苷酸序列相似性为96.2%-99.0%,氨基酸序列同源性为90.5%～98.1%。将重组质粒纯化后转染COS-7细胞,用PCR方法扩增出了特征性的基因片段,并采用特异性单抗进行间接免疫荧光,结果转染pEGFP-N2-ORF3重组蛋白在细胞核和细胞浆中均有表达,尤其在细胞核中表达量较高,且对细胞有一定的毒性。本研究为进一步探讨ORF3的结构和功能提供理论依据。
- 黄文明徐廷川张亮权张得玉张民泽张桂红
- 关键词：圆环病毒2型ORF3真核表达
- 广东地区猪链球菌的耐药性特点及四环素耐药基因携带情况被引量：16
- 2013年
- 猪链球菌(Streptococcus suis,SS)是危害世界养猪业的重要细菌性病原菌之一,本研究旨在了解猪链球菌临床分离株的耐药性特点和四环素耐药基因的携带情况,为临床上该病的防控提供科学依据。本试验采用K-B法和CLSI推荐的肉汤微量稀释法检测猪链球菌广东分离株对18种抗菌药物的耐药性。结果显示,被检菌株对四环素类、磺胺类和氨基糖苷类抗菌药物表现较强的耐药性,尤其对四环素类药物的耐药率高达98.2%;对头孢菌素类药物比较敏感;菌株都耐受6种或6种以上的抗菌药物,其中以6和14重耐药菌株的数量最多,分别占20%和17%。本试验设计了4对引物检测四环素耐药基因携带情况,结果发现56株菌中以携带tetM基因为最多(85.71%)。结果表明tetM很可能是介导广东SS分离株对四环素产生极高耐药率的主要原因之一。
- 黄文明欧阳昀张民泽黄震谢杰雄孙龙张桂红
- 关键词：猪链球菌耐药性四环素耐药基因
- 靶向Lead sequence的RNAi抑制PRRSV复制
- RNA干扰(RNAi)技术是基因功能研究的有效工具，为了了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)lead序列在病毒复制中的作用，针对lead序列选取小干扰RNA(siRNA)位点，构建相应的短发夹RNA(shRNA)表达...
- 赵孟孟曹宗喜张民泽黄震谢杰熊孙龙张桂红
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒基因序列
- 文献传递
- 猪源戊型肝炎病毒ORF2部分基因的原核表达及其鉴定被引量：2
- 2012年
- 本试验旨在表达猪源戊型肝炎病毒(sHEV)ORF2部分基因片段,纯化表达产物并进行抗原性分析。以sHEV的cDNA为模板,PCR扩增ORF2基因片段,构建重组质粒pET32a-dORF2,转化表达菌BL21,IPTG诱导,SDS-PAGE凝胶电泳和Western blotting进行检测。试验结果表明,获得60ku的目的蛋白,该蛋白具有良好的抗原性,主要以可溶性形式存在。
- 欧阳昀张亮权刘志刚齐海涛徐廷川张民泽张超逸张桂红
- 关键词：戊型肝炎病毒ORF2基因重组质粒原核表达
