徐辉
- 作品数：88 被引量：678H指数：15
- 供职机构：吉林大学药学院再生医学科学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程生物学政治法律更多>>
- 过量氟对肾组织细胞周期的影响被引量：7
- 2002年
- 目的研究氟对大鼠、家兔肾细胞周期的作用特点,进一步探讨氟中毒发生机理。方法在常规食、偏食条件下,经饮水投与不同剂量氟,应用流式细胞仪方法检测肾组织细胞周期。结果家兔中剂量氟中毒与对照组比较,G2期细胞显著升高,高氟剂量组G1期细胞数较对照组明显减少,而G2期细胞却增多明显。而大鼠投氟组肾组织细胞各时相细胞所占比例数与对组相比无明显差异。结论过量氟对肾组织细胞周期的影响,在不同剂量和不同氟中毒模型有一定程度的差别,并且对肾细胞主要表现为期、期的变化,从而抑制细胞进入分裂期。
- 张秀云徐辉赵建华王丽蓉张桂珍李广生
- 关键词：氟中毒细胞周期肾组织发病机理
- 基因干扰免疫球蛋白结合蛋白对氟刺激成骨细胞作用的影响
- 2015年
- 目的 通过RNA干扰技术观察在不同剂量氟暴露条件下,成骨细胞内免疫球蛋白结合蛋白（binding immunoglobulin protein,BiP）表达减少对细胞成骨标志物和关键转录因子表达的影响.方法 采用小鼠成骨细胞（MC3T3-E1）作为细胞体外培养模型.取对数生长期MC3T3-E1细胞,接种子96孔板,培养24h后,加入含不同剂量氟离子[0.0（对照组）、0.1、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0、20.0、32.0、64.0 mg/L]的培养液,于培养第1、3、7、14天采用Cell Counting Kit-8试剂盒检测细胞活性.不同剂量氟离子（2.0、8.0、20.0 mg/L）联合短片段RNA（small interfering RNA,siRNA）干扰BiP转染处理成骨细胞2d,利用实时定量PCR和蛋白杂交技术检测BiP基因mRNA和蛋白水平,同时检测成骨细胞内成骨标志物和关键转录因子的变化.结果 染氟第1、3、7、14天,不同剂量氟处理组间细胞活性比较,差异有统计学意义（F=46.7、118.6、214.6、325.6,P均＜0.05）.染氟20.0 mg/L未转染组成骨细胞的BiP基因mRNA水平较对照组显著升高（11.22±3.25比7.94±1.31,P＜0.05）.染氟2.0 mg/L未转染组成骨细胞碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）mRNA表达较对照组显著提高（12.81±3.62比6.86±2.13,P＜ 0.01）,而染氟20.0 mg/L未转染组细胞的ALP mRNA表达显著下降（0.89±0.17比6.87±2.14,P＜ 0.01）.与相同剂量氟处理组比较,染氟2.0、8.0 mg/L联合转染BiP siRNA组细胞ALP mRNA表达显著下降（12.81±3.62比7.43±2.06;5.92±2.38比3.96±0.21,P均＜0.05）;染氟2.0 mg/L联合BiP siRNA转染组细胞骨钙素（osteocalcin,OCN）mRNA表达下降（4.29±0.99比1.29±0.86,P＜ 0.01）.染氟2.0 mg/L未转染组细胞成骨细胞关键转录因子Runx2（Runt-related transcription factor 2）表达高于未转染对照组（6.61±0.48比2.66±0.39,P＜0.05）.成骨细胞转染BiP siRNA后各加氟组Runx2表达较转染对照组显著下降（1.13±0.22比4.81±1.03,3.20±0.66比4.81±1.03,0.02±0.02比4.81±1.03,P均＜0.
- 赵志涛杨晨王岩李广生徐辉
- 关键词：氟化物成骨细胞RNA干扰
- 染氟小鼠成骨细胞系MC3T3-E1细胞中还原型谷胱甘肽和氧化型谷胱甘肽观察
- 2012年
- 目的观察染氟小鼠成骨细胞系MC3T3-E1细胞中还原型谷胱甘肽（GSH）和氧化型谷胱甘肽（GSSG）的水平。方法采用噻唑蓝（MTT）法检测不同染氟条件下[F-剂量分别为0（对照）、0．5、1．0、2．0、4．0、8．O、12．O、20．0mg／L]MC3T3-E1细胞1、2、4、10d的细胞活性。另外，按染氟剂量，将MC3T3一E1细胞分为O（对照）、2、8、20mg／L组，分别染氟2、4、10d，采用高效液相色谱-串联四极杆质谱技术检测细胞内GSH、GSSG和谷氨酰胺（Gin）水平。结果染氟1d时2．0mg／L组细胞活性（O．57±0．05）明显高于对照组（0．49±0．03．P〈0．01）；染氟4d时8．0、12．0mg／L组细胞活性（0．49±0．07、0．47±0．09）明显低于对照组（0．63±0．06，P〈0．05或〈0．01）；染氟10d时8．0mg／L组细胞活性（1．52±0．29）明显高于对照组（0．86±0．23），而20．0mg／L组细胞活性（0．54±0．07）明显低于对照组（P均〈0．01）。染氟2、10d时20mg／L组细胞中GSH水平[（13．92±4．63）、（0．53±0．30）μmol／L]明显低于相应的对照组[（26．42±3．67）、（24．85±5．68）μmol／L，P均〈0．01]。染氟2d时2mg／L组、染氟4d时8mg／L组、染氟10d时8mg／L组细胞内GSSG水平[（1．12±0．62）、（2．13±0．62）、（2．97±1．30）μmol／L]明显高于相应的对照组[（0．55±0．22）、（1．46±0．46）、（1．35±0．50）μmol／L，P〈0．05或〈0．01]。染氟4d时2mg／L组和染氟10d时8、20ms／L组细胞内Gin水平[（62．80±17．41）、（122．26±19．51）、（19．38±8．11）μmol／L]明显低于相应的对照组[（83．28±14．32）、（147．154-16．95）μmol／L，P均〈0．05或〈0．01]。结论染氟能明显改变成骨细胞内的GSH、GSSG和Gln水平，从而影响细胞内氧化还原平衡态。
- 赵志涛史立群吕鹏徐辉李广生
- 关键词：氟骨症谷胱甘肽
- Bcl-2在染氟大鼠肾小管上皮细胞氧化应激态中的表达被引量：7
- 2005年
- 目的观察不同染氟(NaF,F-)条件下大鼠肾小管上皮细胞氧化应激能力变化及Bcl-2在氧化应激时的表达。方法采用体外原代细胞培养方法,相差显微镜观察大鼠肾小管上皮细胞形态结构变化;测定大鼠肾小管上皮细胞在染氟(F-)0.050、0.250、0.750、1.250mmol/L和不同氟暴露时间条件下,肾小管上皮细胞的增殖活性和丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性;利用半定量RT-PCR方法分析大鼠肾小管上皮细胞在氟暴露0.050～0.625mmol/L48hBcl-2的表达。结果相差显微镜下,染氟0.750、1.250mmol/L组部分肾小管上皮细胞缩为圆形和有细胞脱落现象。在24h,0.005mmol/L组(0.48±0.10)、0.025mmol/L组(0.46±0.12)、0.250mmol/L组(0.36±0.04)肾小管上皮细胞的增殖活性较对照组(0.29±0.09)有不同程度升高,但在72h,1.250mmol/L组(0.16±0.02)细胞的增殖活性明显降低。肾小管上皮细胞MDA水平在染氟48h内,0.25mmol/L组(626.15±124.02)、0.75mmol/L组(498.74±119.88)、1.250mmol/L组(441.99±53.57)与对照组(232.62±21.00)比较,升高显著;SOD酶活性在48h内,随着染氟量的增加而有升高,在0.750mmol/L组(1298.66±248.53)、1.250mmol/L组(1664.70±277.68),酶活性明显高于对照组(741.67±265.56);CAT酶活性,在0.
- 徐辉张静敏常明崔伦文李广生
- 关键词：氟化物氧化性应激BCL-2基因氟中毒
- 氟中毒大鼠肾组织抗氧化酶基因水平的变化被引量：8
- 2009年
- 目的探讨氧化应激在慢性氟中毒大鼠肾脏损伤机制的作用。方法给大鼠饮水投氟3个月,通过生化技术测定血清中尿酸(UA)与脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的含量及抗氧化酶超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力;抽提肾组织的总RNA并利用RT-PCR方法检测组织中GSH-Px、SOD、硫氧还蛋白(Trx)的mRNA表达水平。结果常食投氟组大鼠血清中GSH-Px、SOD及MDA含量均有不同程度升高,其中GSH-Px的升高有统计学意义(P<0.05),而低钙加氟组的血清MDA含量较之对照组明显升高;血清的尿酸含量在常食100 mg F-/L组和低钙100 mg F-/L组较之相应的对照组明显降低。常食投氟组肾组织的GSH-Px、SOD,Trx在mRNA水平上含量已有不同程度升高,SOD基因表达显著升高(P<0.05),偏食对照组大鼠肾组织SOD基因表达水平亦显著升高。结论一定浓度的氟刺激肾组织抗氧化酶基因的表达,与血清内抗氧化酶活性升高相一致;低钙协同氟的毒性作用,进一步加剧机体的氧化应激态,尿酸在拮抗氟引起的氧化应激中具有一定作用。
- 张静敏王春艳李新徐辉
- 关键词：氟中毒抗氧化酶尿酸硫氧还蛋白
- 黄芩素对染氟成骨细胞氧化应激水平的影响被引量：3
- 2008年
- 目的探讨黄芩素在染氟成骨细胞细胞内氧化还原水平的变化中发挥的抗氧化作用。方法观察染氟成骨细胞内脂质过氧化产物(MDA)及抗氧化酶(SOD、GPX)活性在黄芩素作用前后的变化。结果低浓度氟和高浓度氟均在成骨细胞引起不同程度的氧化应激态变化,联和应用黄芩素降低了染氟成骨细胞内的氧化应激水平。结论黄芩素很可能清除了成骨细胞内由氟诱导产生的过多氧自由基,进而减弱了不同浓度氟对成骨细胞的毒性作用。
- 张秀云徐辉李向军张文博李广生
- 关键词：氟化物成骨细胞氧化应激黄芩素
- 氟化钠对肾小管上皮细胞骨桥蛋白与bax、bcl-2基因表达的影响被引量：13
- 2005年
- 目的 研究氟化钠对肾小管上皮细胞骨桥蛋白与bax、bcl- 2基因表达的影响,以探讨氟对肾损害的发生机制。方法 采用原代肾小管上皮细胞的培养技术,利用逆转录 聚合酶链式反应测定bax、bcl -2基因和骨桥蛋白在氟处理的情况下细胞的mRNA表达水平的变化。结果 氟处理48h后 7 5、12 5mg/L组的肾小管上皮细胞bax的mRNA水平 (吸光度比值分别为 2. 37±0 .18和2. 64±0. 19)比对照组(吸光度比值为 1 .26±0. 16)有升高;在 5、7 5mg/L组的bcl 2的mRNA表达水平(吸光度比值分别为 0 .80±0. 22和 0. 71±0 .22)比对照组(1. 19±0. 03)下降。与对照组 (骨桥蛋白吸光度比值 1 49)比较,氟处理 48h后肾小管上皮细胞的骨桥蛋白mRNA水平随着染氟量 (≤7. 5mg/L)的增加而逐渐升高,在 7 5mg/L染氟量处理下,骨桥蛋白mRNA水平 (吸光度比值 2.01±0. 40)与对照组比较,差异有统计学意义。结论 氟化钠可促进bax和抑制bcl-2的表达使细胞凋亡,随着氟浓度的升高,凋亡率逐渐升高;在一定的氟剂量下骨桥蛋白表达增多,发挥保护肾脏作用。
- 徐辉张静敏张秀云李广生
- 关键词：骨桥蛋白肾小管上皮细胞氟化钠MRNA水平
- 慢性氟中毒大鼠血清中OPG、RANKL、IL-1β和TNFα的变化被引量：3
- 2009年
- 目的探讨氟中毒大鼠血清中OPG、RANKL、IL-1β和TNFα的变化及它们之间的关系。方法通过低钙与含氟饮食建立氟中毒大鼠模型,采用Elisa法测定氟中毒大鼠血清中OPG、RANKL、IL-1β和TNFα表达。结果氟摄入可以提高血清OPG、IL-1β和TNFα水平;低钙饮食提高血清OPG水平,不影响IL-1β和TNFα水平;低钙与氟摄入协同能提高血清RANKL水平。结论慢性氟中毒大鼠血清中OPG、RANKL、IL-1β和TNFα发生了变化;OPG升高是主要的,可以反应机体内破骨或协同破骨因素总的变化程度。
- 王春红王秀丽顾莲芝徐辉李广生井玲
- 关键词：氟中毒OPGRANKLIL-1ΒTNFΑ
- 果糖胺测定标准参照物的合成及果糖胺测定的临床意义被引量：2
- 2003年
- 目的:介绍果糖胺测定标准物(1-脱氧-1-吗啉果糖)的合成方法,以及果糖胺测定的临床意义。方法:参照Hodge法并作,改良合成1-脱氧-1-吗啉果糖(DMF)后做相关实验。结果:合成的DMF与SIGMA公司产品红外吸收光谱一致,同时以两种DMF为标准参照物,用初速度法测定正常体检标本30例获得糖化血清蛋白正常值,测定了30例糖尿病人糖化血清蛋白,其结果均为与正常组相比较两者有显著性差异(P<0.01)。结论:合成DMF方法简单,性能可靠,能为广大实验室所采用。
- 张秀云徐辉李才
- 关键词：果糖胺糖尿病
- 过量氟对大鼠脑肝肾细胞周期与细胞凋亡的影响
- 本研究为了进一步探讨氟中毒与氧化应激及细胞凋亡的关系,在营养平衡饲料和偏食饲料条件下分别投予不同浓度氟化物,选择脑、肝及肾组织为靶器官,应用流式细胞仪系统观察了氟对三种组织活性氧产生、细胞凋亡及细胞周期的影响。研究结果表...
- 张桂珍高申郑德明徐辉刘霆卜丽莎
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