李云富
- 作品数：12 被引量：15H指数：2
- 供职机构：丽珠集团疫苗工程股份有限公司更多>>
- 发文基金：广东省重大科技专项更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程生物学更多>>
- 轮状病毒抗原ELISA定量检测方法的建立被引量：2
- 2016年
- 目的建立轮状病毒（rotavirus,RV）抗原双抗体夹心ELISA定量检测方法,用于RV灭活疫苗生产过程中抗原含量的检测。方法采用RV全病毒免疫豚鼠,制备抗RV血清,纯化后作为检测抗体。以购进的羊抗A群轮状病毒多克隆抗体作为包被抗体,经辣根过氧化物酶（HRP）标记的羊抗豚鼠血清抗体作为酶标抗体,建立双抗体夹心ELISA法,检测样本中RV抗原含量,并对该方法进行验证及应用。结果所建立的方法,包被抗体的使用浓度为5μg/ml,检测抗体的使用浓度为3.2U/ml,酶标抗体使用浓度为10ng/ml。测定的线性范围为3～94ng/ml,R2在0.993以上,线性关系良好,定量限度为3ng/ml;对不同浓度的RV抗原参考品进行检测,回收率在91.5%～109.3%;变异系数均小于5.2%;与冻干乙型脑炎灭活疫苗、灭活乙型脑炎病毒液、小牛血清、人白蛋白、MA104细胞培养上清液、M199培养基均无交叉反应;通过RV灭活疫苗原液纯化过程中间品抗原含量的检测,能有效反映抗原纯化趋势。结论已建立了RV抗原双抗体夹心ELISA定量检测方法,该方法线性好,特异性强,灵敏度高,准确性好,可用于RV疫苗生产过程中间品及终产品的抗原定量检测。
- 李云富付臻鹏李刚罗翀黄海彬黄勇刘春庭林上炎周淑芳
- 关键词：轮状病毒抗原双抗体夹心ELISA
- 昆虫细胞的培养和尿激酶原表达的研究
- 汪春义李云富姜海平陈万革叶世德
- 关键词：昆虫细胞
- 轮状病毒在不同细胞上培养效果的比较
- 2016年
- 目的比较轮状病毒(rotavirus,RV)在不同细胞上的培养效果,确定RV最适培养细胞株。方法采用原代牛肾细胞(PCKC)、MA104细胞、CV-1细胞、Vero细胞4种细胞培养RV,观察RV在不同细胞培养过程中细胞病变效应(cytopathic effect,CPE),并检测病毒收获液的病毒毒力及病毒RNA。结果 MA104和PCKC细胞较适宜RV的增殖培养,其次是CV-1细胞,而Vero细胞感染病毒后3 d才出现CPE,6 d才有约75%的细胞圆缩死亡,这时收获的病毒液滴度也不及前3种细胞的病毒收获液滴度,且收获液的病毒RNA电泳的条带较模糊。结论 MA104、PCKC、CV-1细胞较适宜RV的增殖培养,而应用于大规模生产疫苗的Vero细胞培养RV要想达到前3种细胞的效果,还需进一步完善感染和培养方法。
- 李云富李刚黄伟荣黄勇刘春庭付臻鹏林上炎罗翀
- 关键词：轮状病毒细胞培养
- 干扰素脂质体的质量控制研究被引量：2
- 2006年
- 目的 建立稳定的干扰素脂质体质控体系。方法 采用电子显微镜、粒度分析仪、气相色谱仪以及酶标仪等仪器和检测手段，对干扰素脂质体的形态、粒径、包封率、有机物的残留量以及稳定性等进行分析。结果 干扰素脂质体透射电镜下观察为圆形，直径50～350nm，粒径呈正态分布，平均粒径为200-210nm，跨距为0．80～1．10，包封率达到90％以上。有机物残留量低于《中国药典》二部（2005版）规定的标准。在2～8℃下保存6个月，渗漏率不高于20％，而总活性基本不变。结论 该干扰素脂质体的质控体系的检测项目比较全面，检测结果稳定，可用于产品的质量控制。
- 李云富张水华李久立杨虹易艳蓉王妍
- 关键词：干扰素脂质体
- 昆虫细胞的培养和尿激酶原表达的研究被引量：1
- 1999年
- 汪春义李云富姜海平陈万革叶世德
- 关键词：昆虫细胞培养尿激酶原
- 鼠神经生长因子病毒灭活效果的验证被引量：1
- 2014年
- 目的对鼠神经生长因子（mouse nerve growth factor,mNGF）病毒灭活工艺进行验证。方法以伪狂犬病毒（pseudorabies virus,PRV）和Sindbis病毒为指示病毒,考察辛酸钠法对mNGF原液中病毒的灭活效果,并比较灭活后与未灭活原液的mNGF活性、纯度、等电点及其-20℃贮存0、3、6个月的稳定性。结果 mNGF原液经0.3%辛酸钠、pH（5.0±0.2）、（25±1）℃灭活90 min,PRV和Sindbis病毒滴度均下降6 lgCCID50/ml以上,灭活60、90 min样品盲传3代后,均未检测出病毒。灭活后与未灭活原液的mNGF活性无差异,比活性均在5.0×10^5 AU/mg以上,蛋白纯度均为100%,等电聚焦主区带均在8.65～9.30之间;-20℃贮存0、3、6个月,蛋白纯度均为100%,比活性均无明显差异,且6个月内比活性均未明显降低。结论辛酸钠法可安全、快速、高效地灭活mNGF原液中的指示病毒及其所代表的相关病毒,保证了产品的质量及其工艺的稳定性,保障了临床用药的安全性。
- 扈会平赵淑媛唐正均李云富曾娟梅孙玉龙刘兵黄剑波
- 关键词：神经生长因子辛酸钠病毒灭活
- 30L生物反应器连续灌注培养重组CHO-C_(28)细胞表达HBsAg的研究被引量：5
- 1999年
- 应用３０ Ｌ生物反应器和微载体悬浮 培养技术，通过电脑全自动控制，连续灌注培养分泌ＨＢｓＡｇ 的重组ＣＨＯ－Ｃ２８细胞。试验了培养方式、连续灌流速度，反应器转速和细胞对葡萄糖消耗等工艺条件。观察培养６０ 天，细胞的生长形态、ＨＢｓＡｇ 分泌动态和染色体数。研究结果表明，连续培养６０ 天，细胞密度可达７．０×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍ ｌ，平均维持在（５．０～６．０）×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍ ｌ，收液的ＲＰＨＡ 滴度可达１∶５１２，ＨＢｓＡｇ 每天平均产量为３０ ｍ ｇ。
- 官桂范李志强王妍李云富耿星涛陈万革叶世德
- 关键词：CHO-C28细胞表面抗原乙型肝炎生物反应器
- 分泌型rhGM-CSF中试产品的质量分析
- 2001年
- 参照 2 0 0 0版《中国生物制品规程》对 3批粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 (rhGM CSF)原液及半成品进行理化及生物学活性检定 ,结果显示 3批rhGM CSF原液及半成品均符合 2 0 0 0版生物制品规程的各项检定标准。对 3批rhGM CSF中试产品质量分析 ,说明rhGM CSF的生产工艺合理 ,产品质量稳定 。
- 迟春萍王妍刘淑玲张秀霞刘冬梅李健平金铎李云富
- 关键词：RHGM-CSF分泌中试产品粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子生物制品
- 生物反应器培养昆虫细胞制备尿激酶原的研究
- 使用美国NBS公司生产的篮式生物反应器和FibraCel disks片状载体对Sf9昆虫细胞进行高密度贴壁培养，建立了生物反应器昆虫细胞及杆状病毒制备尿激酶原(pro-UK)的新工艺。研究中，比较了载体的处理方法对Sf9...
- 李云富
- 关键词：尿激酶原生物反应器昆虫细胞细胞培养
- 文献传递
- CHO细胞培养中NH_3量的监测和分析被引量：3
- 1997年
- 用酶和电极两种方法分析重组CHO细胞分泌r－HBsAg过程中NH3量，以探讨在基因工程细胞培养中利用碳源的最适条件，结果表明两种方法规律性基本一致，产NH3量最高，酶法测为2．3mmol／L，电极法测为6．0mmol／L。
- 王妍李云富张驰李志强官桂范耿星涛罗璇叶世德
- 关键词：乙型肝炎表面抗原生物制品细胞培养
