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二维电泳和质谱技术鉴定BmNPV包埋型病毒粒子的蛋白组成: 2008年; 【目的】BmNPV包埋型病毒ODV(occlusion-derived virus)粒子在BmNPV感染家蚕初期起了非常重要的作用,主要包含了病毒感染初期所必须的蛋白质,解析其蛋白组成有利于进一步理解病毒和宿主关系,同时也为了进一步了解BmNPV的生活史提供依据。【方法】利用二维电泳对ODV病毒蛋白进行分离,采用考马斯亮兰G-250染色,经质谱鉴定。【结果】共获得70个蛋白点,大部分集中在等电点5～9之间,约占蛋白点总数的61%。其中59个蛋白点适合质谱分析,数据库检索出20种蛋白,其中13种与AcMNPV中鉴定一致,而另7种蛋白是BmNPV中新鉴定出来的。此外,在二维电泳图谱上显示GP41蛋白点有21个,VP39蛋白点有9个。【结论】超速离心结合PCR技术提取ODV蛋白方法可行;二维电泳和质谱联用技术是一种研究病毒蛋白质组快速有效的方法。; 蔡克亚陈克平刘晓勇姚勤李军; 关键词：质谱 BMNPV 蛋白质组

家蚕对浓核病毒中国株(BmDNV-3)抗性及感性品系中肠的差异蛋白质分析被引量：5: 2007年; 【目的】通过比较家蚕Bombyx mori抗性及感性品系的中肠蛋白质表达谱,获得家蚕对家蚕浓核病毒中国株(BmDNV-3)抗性相关的蛋白。【方法】利用双向电泳(2-DE)对感性品种华八35和抗性品种秋丰接种病毒后48h的蛋白质表达谱进行比较分析,并对其中的差异蛋白进行MALDI-TOF-TOF质谱分析,通过NCBInr和MSDB数据库进行蛋白点的鉴定和功能分析。【结果】获得重复性较好的差异蛋白点16个,其中质谱鉴定出5种蛋白,它们分别是糖基转移酶(glycosyltransferase)、糖基转移酶-S(GlcAT-S)、21.5kD小热休克蛋白(21.5kDsmall heat shock protein)、V-ATP酶(vacuolar ATPsynthase)和精氨酸激酶(arginine kinase)。这5种蛋白在抗性品系秋丰中的表达量均高于感性品系华八35。【结论】糖基转移酶和糖基转移酶-S仅在抗性品系中存在,提示它们可能是与抗性有关的蛋白。此外,增强的应激反应和能量代谢也可能与家蚕对BmDNV-3的抗性产生相关。; 包方姚勤李军刘晓勇余蔚尹慧娟陈克平; 关键词：家蚕浓核病毒抗性 MALDI

家蚕抗BmNPV品系与感性品系血淋巴液蛋白质组的差异分析被引量：18: 2008年; 利用遗传学的原理,通过杂交和回交的方法,建立家蚕抗BmNPV、感BmNPV以及近等基因系模型,利用2-D电泳和MALDI TOF/TOF MS质谱技术,从蛋白质组水平上研究家蚕对BmNPV抵抗性。其结果是获得家蚕高抗NB,高感306,近等基因系BC_8五龄起蚕血淋巴液蛋白质差异表达谱,分别获得180、190、187个蛋白点,其中80%的蛋白点集中在等电点5～9范围之内。从三块凝胶上共获得明显差异蛋白点12个,由质谱鉴定出5种蛋白,其中氨基酰化酶(Aminoacylase)仅出现在抗性品系NB、近等基因系图谱中,感性品系没有出现,初步推测是家蚕抗BmNPV特有蛋白,这是首次报道结果。; 蔡克亚陈克平刘晓勇姚勤李军; 关键词：MALDI 蛋白质组家蚕

家蚕中肠组织抗核型多角体病毒病的相关蛋白分析被引量：9: 2008年; 家蚕中肠上皮是病毒经口侵入遇到的第一个组织。昆虫幼虫抵御杆状病毒的感染,可通过选择性的使感染的中肠上皮细胞发生调亡并在释放病毒粒子进入血淋巴之前使感染的细胞从中肠脱落。为研究家蚕抗核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopoledrovirus,BmNPV)病的机制,通过对BmNPV高度抗性和高度敏感性的家蚕品系杂交和回交构建了近等基因系。本文对家蚕高抗,敏感及近等基因系5龄起蚕中肠组织的蛋白质表达谱进行了二维电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)分析,并利用基质辅助激光解吸电离飞行时间(matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight,MALDI-TOF)质谱对差异蛋白进行鉴定。结果发现了5个差异表达的蛋白。推测这些蛋白可能与家蚕中肠对BmNPV的抗性或感性有关。; 刘晓勇陈克平姚勤李军蔡克亚; 关键词：家蚕中肠家蚕核型多角体病毒二维电泳

河豚鱼骨骼肌蛋白组分析被引量：2: 2009年; 为了建立一套对河豚骨骼肌总蛋白进行蛋白组分析的技术体系,采用高分辨率的双向电泳技术对河豚骨骼肌总蛋白进行分离,银染后用IMAGEMASTERTM软件分析2D凝胶图谱,共检测出112种以上的蛋白。利用基质辅助质量飞行时间质谱(MALDITOFMS)对分离较好的33个蛋白点进行肽质量指纹图谱分析,并用MASCOT在线软件通过检索NCBInr,MSDB及UniProtKB/TrEMBL等数据库,鉴定其中的21个蛋白点,包括原肌球蛋白等结构蛋白以及各种与代谢相关的酶、与信号传导和细胞凋亡相关的蛋白等。该体系为动态监测河豚鱼骨骼肌在不同水环境及饲料的不当添加等情况下蛋白表达谱的变化提供了新的方法。; 陆健郑建洲刘海军李军陈克平; 关键词：河豚骨骼肌双向电泳蛋白质组学

柞蚕微孢子蛋白的质谱鉴定: 柞蚕微孢子是引起柞蚕微粒子病的病原。柞蚕微孢子纯化后经液氮研磨,用SDS和DDT的蛋白提取液抽提,凝胶电泳分离,考马斯亮兰染色后割取20条分离较好且条带清晰的蛋白条带做质谱鉴定。肽质量指纹图谱在NCBI效据库里搜索到9种...; 王林玲陈克平姚勤李军刘晓秀陈慧卿; 关键词：蛋白质谱鉴定肽质量指纹图谱; 文献传递

细菌群体感应信号网络及其应用被引量：5: 2014年; 群体感应(Quorum sensing,QS)是一种细菌细胞与细胞间的通讯系统,即细菌通过分泌扩散性小分子信号感知细菌群体的密度,从而引起一组特定基因在转录水平协调表达。大量研究已表明,群体感应系统控制细菌多种生理行为和过程,以及与真核宿主(寄主)的互作。参与群体感应调控的信号分子多种多样,QS系统所调控的功能也具有多样性,甚至菌株专化性。通过聚焦同一细菌中由多个QS系统组成的信号网络,综合评述了不同QS系统之间如何相互作用全局调控基因表达,以及QS系统如何通过与其它全局调控系统整合精细调节细菌的社会行为以及环境适应性及其应用前景。; 徐芳李军段云飞刘晓光; 关键词：细菌信号分子

基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪在家蚕蛋白质组中的应用: 2007年; 随着家蚕基因组全序列框架图的完成,家蚕蛋白质组学研究也就成了当前家蚕研究的主要方向之一。而双向电泳技术和质谱技术的发展为大规模研究家蚕蛋白质组提供了强有力的平台。近年来,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱在蛋白质组学研究中的应用日益广泛,为此着重对其在家蚕蛋白质组学研究中的应用进行探讨。; 李军陈克平; 关键词：家蚕蛋白质组

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李军