李德龙
- 作品数：16 被引量：28H指数：4
- 供职机构：山东农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项哈尔滨市科技攻关计划项目国家肉鸡产业技术体系建设专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 鸡传染性腺胃炎的诊断
- 2011年
- 1病原学
临床表现为腺胃炎的病例，其病原学非常复杂，因分离到的病原难以复制出临床典型病例，故真正病原尚未定论。我国学者朱国强等从江苏腺胃肿大的病鸡中分离到H95病毒，
- 李德龙刘思当
- 关键词：传染性腺胃炎病鸡典型病例病原学病毒
- 禽白血病病毒双抗体夹心ELISA方法的建立
- 为建立一种快速有效的检测禽白血病病毒的方法,以原核表达的HLJ09MDJ-1（ALV-J）p27蛋白制备的单克隆抗体作为包被抗体,p27蛋白制备的多克隆抗体作为检测抗体建立了检测ALV的双抗体夹心ELISA（DAS-EL...
- 负炳岭刘文李德龙秦立廷刘在斯吴关祁小乐王永强高宏雷高玉龙王笑梅
- 关键词：禽白血病病毒单克隆抗体多克隆抗体双抗体夹心ELISA
- 文献传递
- 禽白血病病毒双抗体夹心ELISA方法的建立
- 为建立一种快速有效的检测禽白血病病毒的方法，以原核表达的HB09JY03(ALV-J)p27蛋白制备的单克隆抗体作为包被抗体，p27蛋白制备的多克隆抗体作为检测抗体建立了检测ALV的双抗体夹心EusA(DAs-ELISA...
- 负炳岭高玉龙王笑梅刘文李德龙秦立廷刘在斯吴关祁小乐王永强高宏雷
- 关键词：禽白血病病毒单克隆抗体多克隆抗体
- 文献传递
- 禽白血病病毒衣壳蛋白p27基因的原核表达及多克隆抗体的制备被引量：1
- 2012年
- 从J亚群禽白血病病毒(ALV-J)HB09JY03株感染的DF-1细胞的冻融裂解液中提取DNA,通过PCR方法扩增出约720bp的gag-p27基因片段,克隆至pMD18-T载体。鉴定正确后,将该片段克隆至pET-30a(+)原核表达载体,经IPTG诱导表达。表达产物经His Trap TMHP纯化后,测蛋白浓度达到9mg/mL。用兔抗自然p27蛋白阳性血清进行Western blot检测,表明重组p27蛋白有抗原反应活性。免疫新西兰大白兔后,产生的抗体与禽白血病全病毒抗原可以发生特异性反应。所制备的重组p27蛋白和多克隆抗体将在ALV的抗原分析、血清学诊断等方面有着重要的应用价值。
- 李德龙刘在斯贠炳岭吴关高玉龙秦立廷祁小乐王永强高宏雷刘思当王笑梅
- 关键词：禽白血病P27基因原核表达多克隆抗体
- 禽白血病病毒群特异性抗原单克隆抗体的制备与鉴定被引量：2
- 2012年
- 为制备禽白血病病毒(ALV)群特异性抗原的单克隆抗体(MAb),本研究从ALV-J病毒株感染DF-1细胞的冻融裂解液中提取DNA,通过PCR方法扩增出ALV群特异性抗原p27基因,并将其克隆至pMD18-T载体中,酶切鉴定后进行序列测定和分析。最后将p27基因亚克隆至载体pET-30a(+)中,转化受体菌BL21,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE检测获得融合蛋白。经过western blot检测,表达的蛋白具有良好的反应原性。将纯化的p27蛋白作为抗原,免疫7周龄BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得5株能稳定分泌特异性MAb的杂交瘤细胞株。5株MAb与纯化的p27蛋白以及不同亚群ALV可以发生特异性反应。所制备的MAb为禽白血病的诊断方法研究奠定了基础。
- 贠炳岭李德龙胡晓亮刘在斯秦立廷吴关刘文祁小乐王永强高宏雷高玉龙王笑梅
- 关键词：禽白血病病毒P27蛋白原核表达单克隆抗体
- 鸡脾脏转移因子的理化性质鉴定及对肉仔鸡应用效果的研究被引量：1
- 2011年
- 本文对山东莘县金鑫畜禽有限公司研发提取的鸡脾脏TF进行理化性质鉴定、增强鸡体免疫功能和生产性能、体内外抗病毒及体外抗菌试验。结果表明,该鸡脾脏TF主要成分为多肽,理化性质鉴定、无菌试验和安全试验结果均符合脾脏TF质量标准,在鸡胚和BHK细胞上有一定的抗病毒效果,直接抗菌作用不明显。临床药效试验表明该TF可以显著提高肉鸡的生产性能和免疫机能。
- 车国喜李德龙耿群臧喜龙刘立涛李超任庆海石迎
- 关键词：脾脏
- 东北地区野生鸟类B亚群禽白血病的分子流行病学调查及env基因的序列分析被引量：3
- 2013年
- 为掌握我国东北地区野生鸟类感染禽白血病病毒(ALV)的情况,从黑龙江、吉林和辽宁三省采集了300份野生鸟类样品,经PCR检测,4份野生鸟类样品为ALV-B阳性,并扩增了这4份样品的env基因,对其序列进行了遗传进化分析。结果显示,4份ALV-B阳性样品的env基因与原型毒株RAV-2的同源性为99.1%～99.4%,与美国的另外2株代表毒株Schmidt-Ruppin B和Prague subgroup B的同源性为93.3%～98.4%,而与2株中国蛋鸡分离株SDAU09C2和SDAU09E3的同源性为90.2%～90.6%。以上结果表明,目前我国野生鸟类已经存在禽白血病。env基因序列分析结果表明,这4份阳性样品的env基因部分位点发生了变异,并且在多处位点存在突变。
- 李德龙刘婉思杨波高奇曾祥伟秦立廷高宏雷刘思当高玉龙王笑梅
- 关键词：野生鸟类流行病学调查
- 野生鸟类及山鸡禽白血病流行病学调查
- 禽白血病是由反转录病毒科禽白血病病毒引起的禽类多种肿瘤性疾病的总称。本病在世界各地均有发生，是危害养禽业的主要疾病之一。根据传播方式禽白血病分为内源性禽白血病(ALV-E)和外源性禽白血病。鸡外源性禽白血病病毒根据病毒感...
- 李德龙
- 关键词：野生鸟类山鸡禽白血病流行病学调查全基因组
- 文献传递
- 我国东北地区野生鸟类A亚群禽白血病病毒分子流行病学调查及env基因序列分析被引量：9
- 2013年
- 为了解野生鸟类禽白血病病毒(ALV)的感染情况,本研究采集了300份野生鸟类样品,将样品处理后接种DF-1细胞,利用p27抗原ELISA、IFA、PCR等方法检测,其中两份样品为ALV阳性并对其env基因扩增。结果表明,其中gp85编码序列与已发表的A亚群ALV(ALV-A)的同源性最高,为91.1%～100%,而与已发表的鸡的B、C、D、E、J亚群ALV的gp85编码序列的同源性仅在28.0%～80.3%之间。遗传进化树分析也表明这两份ALV阳性样品的gp85编码序列属于ALV-A。本实验在我国野生鸟类群体中首次分离和鉴定出ALV-A,表明目前我国野生鸟类已经存在A亚群ALV的感染。
- 杨波高玉龙高宏雷秦立廷刘婉思李德龙高奇曾祥伟王笑梅
- 关键词：野生鸟类
- 禽白血病病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立被引量：5
- 2012年
- 为建立一种快速有效的检测禽白血病病毒(ALV)的方法,以原核表达的HB09JY03(ALV-J)p27蛋白制备的单克隆抗体作为包被抗体,p27蛋白制备的多克隆抗体作为检测抗体建立了检测ALV的双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)方法。该方法对p27的最小检出量为1.25ng/mL,且与禽类常见的病毒鸡传染性支气管炎病毒、马立克病病毒、鸡传染性喉气管炎病毒等无交叉反应。动物感染试验结果表明,用该方法可在感染动物12d后有效检测泄殖腔分泌物中的禽白血病病毒。利用该方法检测了491份蛋清样品和180份肛拭子样品,与PCR方法的符合率分别为96.5%和93.8%。证实,该方法具有方便、快速、敏感等优点,该方法的建立为ALV的早期诊断及种鸡场的净化提供了有效工具。
- 贠炳岭刘文李德龙秦立廷刘在斯吴关祁小乐王永强高宏雷王笑梅高玉龙
- 关键词：禽白血病病毒单克隆抗体多克隆抗体双抗体夹心ELISA
