目的:以老年人正常皮肤为研究对象,分析曝光部位及非曝光部位的表皮差异蛋白,筛选出表皮细胞中与皮肤光化相关的蛋白。方法:从分离所得的不同部位老年人表皮中提取蛋白质,并进行2-DE分离,PDQUEST软件分析凝胶上差异蛋白点,进一步采用MALDI-TOF质谱分析及数据库查询,鉴定差异表达蛋白;并在蛋白质水平进行Western-blotting验证差异候选蛋白。结果:通过分析比较两组表皮双向电泳图谱,确定了15个差异蛋白点,经MALDI-TOF分析及数据库查询,成功鉴定了其中5个差异表达蛋白,发现热休克蛋白B1(Heat shock protein B1,HSPB1)、膜联蛋白A2(Annexin A2,ANXA2)、角蛋白80(Keratin,typeⅡcytoskeletal80,K2C80)、丝裂原激活的蛋白激酶3(Mitogen-activated protein kinase3,MK03)在老年人曝光部位的表皮中高表达,而谷胱甘肽S转移酶A2(Glutathione S-transferase A2,GSTA2)在非曝光部位表皮中高表达。结论:老年人正常皮肤曝光部位和非曝光部位的表皮存在差异蛋白,经分析和鉴定的5种蛋白质与皮肤的光老化有密切的关系,为进一步研究表皮细胞在光老化过程中的作用及分子机制奠定基础。
