李毅斌
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：首都医科大学眼科研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 对传染性非典型肺炎患者进行眼底检查的初步结果分析被引量：4
- 2003年
- 李毅斌徐亮
- 关键词：传染性非典型肺炎眼底检查视网膜
- 体外培养虹膜色素上皮细胞移植对RCS鼠视网膜变性的治疗作用及其机制的实验研究
- 全文共四章.第一章,牛眼IPE细胞的培养;目的:培养获得纯化的IPE细胞,对其培养条件进行优化,并对体外培养中IPE细胞的形态学特点进行观察.结论:酶辅助的显微分离法是一种高效的细胞分离方法,可获得IPE细胞的纯化培养....
- 李毅斌
- 关键词：细胞移植视网膜变性虹膜色素上皮细胞视网膜色素上皮细胞
- 文献传递
- 体外培养牛眼虹膜色素上皮细胞维生素A代谢相关蛋白mRNA的表达被引量：2
- 2002年
- 目的 评价体外培养牛眼虹膜色素上皮 (irispigmentepithelial,IPE)细胞的维生素A代谢功能。方法 采用酶辅助的显微分离法和培养新生牛眼IPE细胞 ,Trizol一步法提取总RNA。根据Genbank中维生素A结合蛋白 (retinol bindingprotein ,RBP)和细胞内视醛结合蛋白 (cellularretinldehyde bindingprotein ,CRALBP)的相关系列设计特异引物 ,对其mRNA的表达进行逆转录聚合酶链反应(reversetranscriptionpolymerase chainreaction ,RT PCR)检测。结果 传 2代牛眼IPE细胞中提取的总RNA完整、无降解。RT PCR检测结果 :RBP及CRALBP的mRNA在培养的牛眼IPE细胞中均有表达。结论 牛眼IPE细胞具有与视网膜色素上皮细胞相似的维生素A转运和代谢功能。
- 李毅斌孙葆忱
- 关键词：虹膜眼色素上皮逆转录聚合酶链反应视网膜变性
- 腺相关病毒介导胶质细胞源性神经营养因子转染牛眼虹膜色素上皮细胞
- 2004年
- 目的 探讨以腺相关病毒 (AAV)为载体对体外培养牛眼虹膜色素上皮细胞 (IPECs)进行胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)转染 ,获得高效表达GDNF转基因细胞的可行性。方法 采用狭隙杂交测定AAV GDNF的滴度 ,按感染复数 (MOI)为 50对传二代IPECs进行AAV GDNF转染 ,于含3 %胎牛血清DMEM培养基中连续不换液培养 4周 ,酶联免疫吸附测定 (ELISA)细胞培养上清液中GDNF的量。同样方法对传二代IPECs进行AAV介导的绿色荧光蛋白 (GFP)基因转染 ,于含 2 0 %胎牛血清DMEM培养基中进行常规细胞培养。荧光显微镜下每 2d计数 1次培养IPECs的GFP表达阳性率。结果 (1)AAV GFP转染后 ,IPECs生长正常 ,于转染后 4d部分IPECs开始出现GFP表达。GFP的表达在荧光显微镜 490nm波长激发光下呈黄绿色 ,弥漫于整个胞质。转染 8～ 10d后 ,IPECs中GFP的表达至高峰。 (2 )根据ELISA检测结果、经过计算 ,AAV GDNF转染IPECs的培养上清液中GDNF的含量为 (17.14± 1.10 ) μg/L。 结论 AAV GDNF能有效地转染体外培养的IPECs和表达GDNF。 (中华眼科杂志 ,2 0 0 4,40 :45 48)
- 李毅斌孙葆忱
- 关键词：腺相关病毒胶质细胞源性神经营养因子基因转染虹膜色素上皮细胞视网膜变性
