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生物法合成肠炎沙门菌糖蛋白被引量：2: 2022年; 肠炎沙门菌(Salmonella enteritidis)是一种重要的人兽共患病原菌,在对该菌感染的预防与控制上一直存在困难,而糖蛋白疫苗的出现为其预防提供了新的思路。对于糖蛋白的合成,一般采用传统的化学交联方法,该法制备流程烦琐、生产成本高。因此,探索经济且稳定的生物合成方法非常必要。为了实现生物法合成肠炎沙门菌糖蛋白,本研究利用CRISPR/Cas9方法构建肠炎沙门菌waa L基因缺失株SEΔwaa L,使用银染的方法检测细菌外膜脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)的合成情况。使用环形PCR方法构建了表达寡糖转移酶PglL、重组铜绿假单胞菌的外毒素(recombinant Pseudomonas aeruginosa exotoxin A,r EPA)和霍乱毒素B亚单位(cholera toxin B subunit,CTB)的表达质粒,并分别在rEPA的N端和CTB的C端加入了PilE;糖基化位点序列。将重组质粒转化到SE ΔwaaL中,诱导表达后通过Western blotting方法对糖蛋白的合成进行验证,并通过镍柱(Ni-NTA)对糖蛋白进行纯化。结果表明,waaL基因的缺失阻断了肠炎沙门菌LPS正常合成,在该缺失株中rEPA和CTB蛋白均可成功表达。此外,在表达寡糖转移酶PglL的情况下,rEPA和CTB发生了明显的糖基化,其糖基化部分为肠炎沙门菌O抗原多糖。本研究结果证明肠炎沙门菌缺失waaL基因后,在寡糖转移酶PglL的作用下可以将自身O抗原多糖链共价连接到载体蛋白rEPA和CTB上,形成糖蛋白,为生物法合成肠炎沙门菌糖蛋白的研究奠定了基础。; 李梦如刘恩张文芋罗洪艳李沛; 关键词：生物法糖蛋白肠炎沙门菌

游戏中教师对不同性别幼儿的教育行为研究: 在现代社会中许多冲突都来自两性之间的沟通不良,不少问题都来自两性性别角色的认知差异,由于多项研究表明儿童阶段是性别角色发展的一个关键时期,因此幼儿性别教育一直受到众多研究者的关注。教师的教育行为影响到了幼儿性别角色观念的...; 李沛; 关键词：游戏教育行为性别意识

PBL教学法在《兽医免疫学》课程思政教学中的应用: 2024年; 为了提高《兽医免疫学》课程的思政教学质量和教学效果,以西南大学动物医学院2021级动物医学专业学生为研究对象,在《兽医免疫学》课程思政教学中引入基于项目式学习(Project-based Learning,PBL)的教学法,探索课程思政教学改革路径。调查结果显示,接受PBL教学法的大多数学生认为该教学法不仅在知识理解、记忆与融会贯通方面效果显著,而且在端正学风、激发学习兴趣与热情、提高逻辑思维能力、培养辩证思维方式、提高创新意识、培养树立正确的三观等方面效果显著。研究表明,在《兽医免疫学》课程教学中应用PBL教学法有助于提高学生的综合素质,达成课程教学三维目标。; 黄兰香李沛; 关键词：PBL教学法教学改革

生物法合成肠炎沙门氏菌O抗原多糖蛋白的研究: 引言沙门氏菌病是一种食源性人兽共患传染病,主要引发胃肠炎,同时可能伴有恶心、呕吐、腹部痉挛和带血腹泻等症状[1]。目前为止,已鉴定出超过2500种不同的沙门氏菌血清型[2],其中肠炎沙门氏菌(Salmonella ent...; 李梦如刘恩罗洪艳李沛

股权结构、薪酬差距与公司绩效: 国有上市公司作为国民经济的土体、资本市场的主干,是国有企业股份制改革的“领头羊”,其绩效状况产生的影响已经扩大到了整个国民经济体系,引发全社会的广泛关注。因为其反应公司治理状况的同时,也对国民经济发展和国民收入分配带来了...; 李沛; 关键词：股权结构薪酬差距公司绩效; 文献传递

细菌基因组大尺度DNA片段遗传操作的方法: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及细菌基因组大尺度DNA片段遗传操作的方法。本发明要解决的技术问题是为大尺度DNA片段的遗传操作提供一种新选择。本发明的技术方案是一种适用于细菌基因组大尺度DNA片段遗传操作的载体，以自...; 李沛罗洪艳李彩霞焦紫妍廖永洪付利芝杨柳

肠杆菌共同抗原的研究进展: 2021年; 肠杆菌共同抗原(Enterobacterial common antigen,ECA)是由多糖重复单元组成的多聚糖,几乎表达于所有肠杆菌细菌外膜,具有生物学功能。ECA由多基因协同作用而合成,这些基因在肠杆菌细菌基因组上成簇存在,形成ECA抗原基因簇。ECA是重要的毒力因子,在肠杆菌细菌入侵宿主、体内存活等过程中有一定作用。同时,ECA在维持细菌外膜渗透屏障、鞭毛表达、群集运动及抗胆酸胆盐等方面也有重要作用。此外,锚定在细菌脂多糖核心区的ECALPS还是细菌重要的表面抗原,能激发宿主产生高水平抗体,可以作为疫苗研究的靶点。结合笔者的研究,文中对ECA纯化、基因结构和合成、免疫特性、生物学功能及应用等方面进行了综述。; 沈雪刚杨玉莹李沛罗洪艳孔庆科; 关键词：肠杆菌生物合成免疫特性毒力

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李沛

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