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李辅军: 作品数：22 被引量：125H指数：7; 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>; 发文基金：国家杰出青年科学基金国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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两种引物PCR法检测宫颈刮片中HPV DNA的对比及意义被引量：1: 2004年; 目的　探讨聚合酶链式反应检测宫颈刮片中人乳头瘤病毒的意义及可行性。方法　共检测 131例宫颈刮片 ,分为门诊组和宫颈癌组。每例分别使用通用型引物和 16型E7引物进行PCR ,比较两组间及两对引物检测的阳性率。结果　普查组和宫颈癌组阳性率分别为 32 .99%和 73.5 3% ,两组阳性率比较 ,差异有极其显著性 (P <0 .0 0 1)。普查组中 ,通用引物和HPV16E7引物扩增阳性率分别为 2 7.84 %和 16 .4 9% ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。宫颈癌组中 ,通用引物和HPV16E7引物扩增阳性率分别为 38.2 4 %和 6 7.6 5 % ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　PCR法检测宫颈刮片中的人乳头瘤病毒为一种可行的方法。通用型引物在普通人群中检测的敏感性好 ,可以作为一种筛查的方法。; 邬素芳徐茜陈刚王薇辜海念卢运萍周利平杜娟李辅军廖国宁马丁; 关键词：人乳头瘤病毒聚合酶链反应子宫颈癌

上皮性卵巢癌组织中金属硫蛋白与肺耐药蛋白的表达及意义被引量：5: 2004年; 目的　探讨上皮性卵巢癌中金属硫蛋白 (MT)及肺耐药蛋白 (LRP)的表达及其临床意义。方法　采用免疫组化SP法及半定量分析方法 ,检测 1995～ 2 0 0 1年上皮性卵巢癌 6 4例 ,复发后二次手术癌组织 17例 ,卵巢良性上皮性肿瘤 16例及正常卵巢组织 14例中MT及LRP的表达 ,并进行相关临床病理因素分析。结果　MT在上皮性卵巢癌中的表达显著高于卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织 (P <0 0 1) ,MT表达与细胞分级和腹水相关 ;在上皮性卵巢癌中LRP的阳性率为 78 1% ,与卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织相比差异有显著性意义(P <0 0 1) ;化疗后癌组织中MT的阳性表达率和LRP的强阳性表达率与初治卵巢癌组织中相应的表达率差异有显著性意义 ;MT与LRP表达存在相关性 ,两者同时表达者术后生存时间短 ,易于复发。结论　MT、LRP在上皮性卵巢癌中较恒定表达 ,化疗可以增加癌组织中MT、LRP的表达。联合检测MT、LRP可预测卵巢癌的铂类联合化疗疗效。; 王薇高庆蕾邬素芳胡余昌李辅军廖国宁王世宣周剑峰卢运萍马丁; 关键词：上皮性卵巢癌癌组织金属硫蛋白肺耐药蛋白 LRP

CAR抑制卵巢癌细胞株SKOV3侵袭转移表型的研究被引量：3: 2005年; 背景与目的:柯萨奇-腺病毒受体(coxsackieandadenovirusreceptor,CAR)最早作为2,5型腺病毒的受体而被人们发现和认识,近年的研究发现它还是粘附分子家族的一员,并参与肿瘤恶性表型改变。本研究通过转染真核表达载体,探讨其对卵巢癌细胞株SKOV3侵袭转移表型的影响。方法:利用Westernblot和RT-PCR检测4株卵巢癌细胞CAR的表达;脂质体介导转染含有全长CAR基因的真核表达质粒至SKOV3细胞,经G418筛选出稳定表达的阳性细胞克隆;体外粘附实验及软琼脂克隆形成实验验证CAR对SKOV3侵袭转移表型的影响。结果:4株卵巢癌细胞中,CAR表达水平不同程度下调,其中SKOV3细胞CAR表达缺失。转染后,SKOV3细胞CARmRNA和蛋白质水平表达均明显增高;细胞间粘附力明显增强;软琼脂克隆实验显示转染细胞每孔克隆形成数(25.3±8.9)明显低于未转染组(88.8±14.0)和转染空质粒组(82.5±19.4)。结论:外源性CAR基因的导入可以增强卵巢癌细胞SKOV3间的粘附性,从而抑制肿瘤细胞的侵袭转移表型。; 王蓓蓓陈刚李辅军周剑锋卢运萍马丁; 关键词：SKOV3细胞株柯萨奇-腺病毒受体

降糖搽剂药效学研究与毒性作用测定被引量：1: 2002年; 目的 :通过降糖搽剂对皮肤用药的药效学研究以了解它是否优于口服用药以及了解它对局部用药的毒性强弱。方法 :按内分泌系统药物药效学指导原则中的胰岛类及降糖药试验方法和局部用药的毒性试验方法进行。结果 :降糖搽剂对大鼠和家兔皮肤给药降血糖试验表明 :以 3.2 mg/ kg、4.8mg/ kg、8mg/ kg(临床用量 7、10、16倍 )给药 ,对正常大鼠和家兔降血糖用量分别为 2 0 %、30 %、5 0 %及 10 %、2 0 %、30 %。另外 ,对大鼠和家兔糖耐量试验表明 :以 3.2 mg/ kg的对大鼠和家兔糖耐量都没有降低的作用 ;毒性作用测定结果表明 :本品对家兔皮肤急性毒性不引起动物死亡 ,对豚鼠不致敏 ,对家兔皮肤无刺激作用。结论; 周立国李辅军雷刚; 关键词：药效学毒性测定家兔

卵巢癌细胞PCDGF的表达与意义被引量：4: 2004年; 目的　研究人卵巢癌细胞PCDGF的表达 ,探讨其与卵巢癌恶性表型的关系。方法　应用半定量RT PCR和Westernblot分别检测 3株卵巢癌细胞中PCDGFmRNA和蛋白表达水平。单层细胞增殖实验测定 3株卵巢癌细胞的增殖能力 ;Boy den小室体外侵袭实验测定不同细胞株的侵袭能力。结果　 3株卵巢癌细胞PCDGF转录和翻译水平呈同步变化 (P <0 .0 5 ) ,均为SW 6 2 6最高 ,A2 780稍低 ,Skov 3最低。而其增殖、侵袭能力亦为SW 6 2 6最强 ,A2 780次之 ,Skov 3最弱。结论　 3株卵巢癌细胞PCDGFmRNA和蛋白表达水平与其增殖、侵袭能力呈正相关 (前者r1=0 .97,r2 =0 .89,后者r1=0 .85 ,r2 =0 .84 ) ,提示PCDGF在卵巢癌发生演进中可能作为独立因素起多种作用 ,有望成为治疗的新靶点。; 刘玉兰廖国宁韩志强吴明富李辅军卢运萍马丁; 关键词：卵巢肿瘤畸胎瘤细胞源性生长因子基因表达

环孢素A延长腺病毒基因治疗载体体内存在时间的研究被引量：1: 2006年; 目的研究重组腺病毒载体在免疫抑制疗法应用中的安全性并探讨环孢素A对该载体在体内清除的影响。方法采取腹膜后注射纯化重组腺病毒建立动物模型,连续给予环孢素A 14 d,取不同时间点大鼠样本,HE染色观察各主要脏器病理反应,免疫组化方法检测肝、脾、肺、肾、肌肉及淋巴结腺病毒的表达情况。结果①HE染色切片,各脏器呈现一过性可逆性轻微炎性反应。②免疫组化检测,对照组中重组腺病毒逐渐减弱至阴性,实验组中重组腺病毒存在时相性明显延长(P<0.05)。③腺病毒分布呈现肝脾肺高表达而其它组织表达相对较低。结论重组腺病毒作为基因治疗载体在免疫抑制疗法应用中具有一定的安全性,环孢素A能够部分抑制实验动物体内的免疫反应从而延长重组腺病毒在体内存在的时间。; 夏曦王蓓蓓陈刚吴鹏罗丹枫李辅军郉辉王金韬卢运萍周剑锋马丁; 关键词：环孢素A 腺病毒基因治疗载体免疫抑制疗法

拓扑替康诱导卵巢癌COC1/DDP细胞凋亡的分子机制初步探讨被引量：1: 2005年; 目的探讨拓扑替康(TPT)对人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP的杀伤和诱导凋亡活性及其作用机制。方法MTT比色法与软琼脂克隆形成测定TPT对人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP的杀伤效应;TUNEL法和流式细胞仪研究TPT对靶细胞的凋亡诱导作用;Westernblot检测TPT对COC1/DDP细胞内bcl-2、bax和caspase-3基因表达的影响以及caspase-3活性的改变。结果TPT对COC1/DDP细胞有明显细胞毒性作用,不仅有剂量依赖性,也存在明显的时间依赖性;COC1/DDP细胞在TPT作用后出现特征性凋亡形态特征,且凋亡率由8.54%上升为23.16%(P<0.05)。TPT不影响COC1/DDP细胞内bcl-2蛋白表达,却明显增加bax蛋白和caspase-3蛋白表达,并提高caspase-3活性。结论TPT对人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP有明显的杀伤和促凋亡作用,其机制可能依赖于细胞内bax蛋白表达增高和caspase-3的活化。; 田训王薇邢辉徐茜李辅军卢运萍王世宣马丁; 关键词：拓扑替康卵巢癌凋亡

HDAC抑制剂TSA增强卵巢癌细胞株A2780对腺病毒基因转染效率的体外研究被引量：9: 2005年; 背景与目的:腺病毒感染依赖于靶细胞表面柯萨奇-腺病毒受体(Coxsackie and adenovirus receptor,CAR)的表达,肿瘤细胞CAR表达的缺失和下调是造成腺病毒为载体基因治疗效果不佳的根本原因。本研究通过观察组氨酸去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)抑制剂TrichostatinA(TSA)对卵巢癌细胞株A2780CAR表达水平的影响,探讨HDAC抑制剂在腺病毒载体基因治疗中应用的可能性。方法:分别在TSA作用A2780细胞前后检测CARmRNA和蛋白水平的表达,同时采用流式细胞术测定病毒转染效率,MTT实验评价腺病毒携带的胸苷激酶(ADV/TK)的体外抗瘤效应。结果:TSA处理后,A2780细胞内CARmRNA和蛋白表达明显增高。通过流式细胞仪分析GFP/ADV转染后GFP的表达发现,未处理组细胞转染率为(1.24±0.14)%;5nmol/L和100nmol/LTSA处理48h后,细胞的转染效率分别为(7.58±0.32)%和(7.94±0.28)%。MTT结果表明,ADV/TK介导的体外杀伤作用在5nmol/L和100nmol/LTSA处理组较未处理组增强了4～10倍。结论:TSA可以增强针对卵巢癌细胞的腺病毒基因转染效率,为增强卵巢癌基因治疗效果提供可能的方法。; 陈刚王蓓蓓李辅军刘德艳周剑锋卢运萍马丁; 关键词：TRICHOSTATIN 体外实验

T淋巴瘤侵袭诱导基因在卵巢癌细胞株的表达及其意义被引量：8: 2003年; 目的研究T淋巴瘤侵袭诱导基因1(Tiam1)在卵巢癌侵袭转移方面的作用。方法RT-PCR检测Tiam1和Rac1mRNA的表达;Westernblot法检测Tiam1蛋白质的表达;Boyden小室体外侵袭实验测定癌细胞迁移能力。结果Tiam1mRNA和蛋白质及Rac1mRNA在4株卵巢癌细胞A2780、Caov3、Skov3及SW626中均呈中高度表达;癌细胞平均迁移百分数分别为(27.67±3.2)%、(10±1.0)%、(22.67±2.5)%及(47.67±1.52)%。Tiam1及Rac1表达水平与癌细胞迁移潜能间均呈显著性相关,r分别为0.874和0.814,P=0.003和0.042。结论Tiam1/Rac1信号转导通路在卵巢癌细胞的侵袭和转移过程中起重要作用,为卵巢癌的基因治疗提供了新的靶点。; 吴明富奚玲陈刚李静徐茜李辅军卢运萍王世宣廖国宁马丁; 关键词：RACL 卵巢癌细胞

RhoA、RhoC及其效应分子ROCK-1的表达与卵巢癌细胞系恶性行为相关性的体外研究被引量：27: 2004年; 目的　研究RhoA、RhoC及其效应分子ROCK 1在卵巢癌细胞中的表达水平 ,探讨其与卵巢癌转移的相关性。方法　逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测RhoA、RhoC及ROCK 1在SW6 2 6、Skov 3、A2 780和Caov 34种卵巢癌细胞中mRNA的表达水平 ;Westernblot法检测RhoA和ROCK 1蛋白质的表达情况 ;Boyden小室体外侵袭试验测定 4种卵巢癌细胞的体外迁移与侵袭能力。结果　RhoA、RhoC和ROCK 1在 4种卵巢癌细胞中呈不同程度表达 ,其中仅RhoC的表达水平与癌细胞侵袭力和迁移能力呈正相关 (r=0 .95 ,P <0 .0 1)。RhoA在转录水平和蛋白水平中呈不同步变化 ,且RhoA和RhoC的表达与ROCK 1的表达无相关性。 4种卵巢癌细胞的体外侵袭和迁移能力相一致 ,其中SW6 2 6最强 ,Caov 3最弱 ,Skov 3和A2 780居中。结论　RhoC的表达与卵巢癌细胞的体外侵袭和迁移能力相关 ,可能作为一个独立因素在卵巢癌的转移过程中起作用 ,有望成为阻断卵巢癌转移的新靶点。; 韩志强张阿丽吴明富刘玉兰陈刚李辅军高庆蕾廖国宁卢运萍王世宣马丁; 关键词：RHOA RHOC 效应分子卵巢癌癌细胞恶性行为

李辅军

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