杨心洁
- 作品数：12 被引量：27H指数：3
- 供职机构：中南大学湘雅二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学政治法律更多>>
- SLE患者T淋巴细胞穿孔素mRNA及其蛋白的表达被引量：1
- 2007年
- 为了解系统性红斑狼疮（SEE）患者穿孔素mRNA及其蛋白表达水平。检测了活动期SLE患者的CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞穿孔素mRNA及其蛋白表达水平。
一、研究对象 活动期SLE患者组9例。均来自2004年10月至2005年6月在我院门诊和住院的患者。均为初诊而未治疗或因停药（2个月以上）等原因病情活动但尚未再治疗的活动期SLE患者。其中男2例，女7例，年龄17～43岁，平均年龄（27．4±8．3）岁。
- 李勇坚肖嵘李亚萍张桂英丁艳杨心洁张静苏玉文陆前进文海泉
- 关键词：淋巴细胞穿孔素蛋白表达水平SLE患者CD8^+T平均年龄CD4^+
- 高效转染体外转录合成的CTGF-siRNA至硬皮病皮肤成纤维细胞被引量：3
- 2005年
- 目的研究CTGF-siRNA的体外转录合成及使用专门转染试剂盒将其转染至硬皮病皮肤成纤维细胞的转染效率,为将RNA干扰技术深入应用到硬皮病治疗做铺垫。方法体外培养硬皮病皮肤成纤维细胞;设计CTGF的siRNA;通过体外转录获得siRNA;将siRNA以SilencerTMsiRNALabelingKit标记;用siPORTTMAmine转染至成纤维细胞;荧光显微镜观察转染情况。结果转染率可高达85.32%。结论该方法操作简便,且可达到理想的转染率。
- 肖嵘罗婧莹刘伏友杨心洁邱湘宁赵会平苏玉文文海泉
- 关键词：SIRNA硬皮病成纤维细胞转染
- 临床体外检测项目在民事举证责任倒置下的思考
- 2007年
- 在目前医疗机构举证责任倒置的法律前提下，针对临床实验室开展新的检测项目中存在无申报审核、无相应质控和质评，以及体外诊断试剂在使用、管理过程中存在供货商证照不全等可能引起医疗纠纷的现象进行了一些思考。提出加强对临床检测项目的质评和质控管理，以及建立体外诊断试剂的准入制度，是医疗机构自身发展的需要，也是法制的需要。
- 邓军卫佘鸥许毅杨心洁李敏能何庆南施小六
- 关键词：举证责任倒置实验室诊断试剂
- SLE患者T淋巴细胞穿孔素基因启动子区域甲某化状态的探索被引量：4
- 2007年
- 目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)T淋巴细胞穿孔素基因启动子区域DNA甲基化状态及其在发病机制中的作用。方法分离9例活动期SLE患者和7例正常人对照外周血CD4^+与CD8^+T细胞,并分别提取DNA。采用亚硫酸氢钠-测序法对CD4^+与CD8^+T细胞穿孔素基因启动子区域DNA甲基化水平进行检测。结果在穿孔素基因启动子区域,正常对照组CD4^+T细胞平均甲基化水平显著高于CD8^+T细胞(P<0.05)。活动期SLE患者CD4^+T细胞平均甲基化水平显著低于正常对照组(P<0.05),而CD8^+T细胞与正常对照组的差异则无统计学意义(P>0.05)。结论活动期SLE患者的CD4^+T淋巴细胞的穿孔素基因启动子区域处于低甲基化状态。
- 肖嵘李勇坚陆前进李亚萍丁艳杨心洁周英张静李干群梁云生文海泉
- 关键词：DNA甲基化穿孔素
- 综合医院组织细胞库信息系统的建立及意义被引量：5
- 2010年
- 目的通过对冻存标本管理系统的专业性、实用性和服务性等的概括,阐述了大型综合医院建立科研组织标本和细胞株信息资源系统的必要性。方法开发"细胞冻存标本管理系统V2.2.1"软件,以Win9x、WinME、Win2000、WinXP为操作平台,对冻存标本进行信息管理。结果该系统具有信息录入浏览、检索、以及数据维护、链接、管理等功能,具有效率高、操作方便等优点。结论系统可准确、动态地反映储存库中的标本信息,从而大大提高和保证了对库存标本的管理效率和质量。
- 邓军卫施小六许毅倪万茂杨心洁王桦
- 关键词：标本库组织细胞信息系统
- 穿孔素基因启动子的克隆及体外区域性高甲基化
- 2009年
- 目的克隆穿孔素基因启动子区域（PRF1），并对PRF1进行体外区域性高甲基化，为探讨穿孔素基因调控序列高甲基化能否引起穿孔素表达下调奠定基础。方法PCR扩增穿孔素基因启动子区域（PRFI）后，先将PRFI克隆到T载体，再定向亚克隆至报告基因载体；然后对PRF1片段进行体外区域性高甲基化。结果（1）克隆PRF1到报告基因载体pGL3-Basic后双酶切及测序鉴定结果正确。（2）对PRF1片段进行体外区域性高甲基化后鉴定显示PRF1片段区域性高甲基化完全。结论成功克隆PRF1至报告基因载体pGL3-Basic并对PRF1片段进行体外区域性高甲基化，为今后研究奠定了基础。
- 袁娟肖嵘陆前进李亚萍杨心洁汪峰湛意张桂英张静周英
- 关键词：DNA甲基化
- 综合医院科研公共平台的建设与发展思路的思考被引量：1
- 2007年
- 医院医学实验中心是全院的科研公用平台和教学基地之一。主要为研究生教学和全院科研人员提供生物技术培训、实验指导、仪器设备的使用和提供试剂以及实验消耗品等，并为全院的科研教学和研究生教育服务；以做到经济与效益并举、资源与利益共享的目的。结合实际工作对如何才能真正做到建设发展好和管理好做了一些思考。
- 邓军卫施小六佘鸥李敏能方建珍杨心洁海志杰王桦
- RNA干扰对系统性硬化病皮肤成纤维细胞结缔组织生长因子表达的影响被引量：2
- 2006年
- 目的研究RNA干扰对系统性硬化病(SS)皮肤成纤维细胞结缔组织生长因子(CTGF)mRNA和蛋白表达水平的影响。方法设计4个针对CTGF的特异性小干扰RNA(siRNA)及一个非特异性siRNA。体外转录获得siRNA,将siRNA用6-羧基荧光素(FAM)标记后瞬时转染至原代培养的SS患者皮肤成纤维细胞;转染48h后,以RT-PCR及蛋白印迹法分别检测CTGFmRNA及蛋白量的变化。结果转染了4个特异性siRNA的成纤维细胞中CTGFmRNA水平均有不同程度下调(P<0.001),抑制效果由强至弱为,siRNA742>siRNA828>siRNA578>siRNA948。蛋白印迹则显示有3个siRNA能使CTGF蛋白表达水平不同程度下调(P<0.001),其中siRNA742的抑制效应最强。结论RNA干扰能显著抑制SS成纤维细胞CTGF的表达。
- 肖嵘罗婧莹刘伏友周英李亚萍周怡新苏玉文文海泉杨心洁
- 关键词：小分子干扰成纤维细胞结缔组织生长因子
- 对临床实验室生物安全管理的建议
- 2008年
- 医学临床实验室生物安全是社会安全的一部分。本文简要介绍了医院临床实验室生物安全发展的现状，针对其特点阐述了常见的生物危害；结合国外相关的生物安全管理措施，就医院实验室的生物安全管理问题做了思考，并根据国家实验室安全管理的法律法规提出了加强临床实验室生物安全管理的一些建议。
- 邓军卫佘鸥施小六方建珍李敏能杨心洁海志杰王桦龙群
- 关键词：病原微生物生物安全管理
- 两种核酸染料的应用比较研究被引量：10
- 2004年
- 目的 研究GoldView核酸染料对于凝胶中DNA/RNA的染色效果及其取代EtBr用于常规电泳后凝胶中核酸染色的可能性。 方法 将电泳后的SSCP凝胶和琼脂糖凝胶放入两种核酸染液中轻摇浸染 3 0～ 45min ,并注意避光 ,3 0 0nm紫外灯下观察并照相记录。 结果 GoldView染色后 ,dsDNA呈绿色荧光 ,ssDNA呈红色荧光 ,可检测到少至 5ng的dsDNA ,灵敏度与EtBr大致相当。 结论 GoldView是一种安全、灵敏的EtBr替代品 ,可用于常规核酸染色。
- 海志杰沈宏伟邓军卫姚茂金李敏能杨心洁
- 关键词：溴化乙锭
