杨连赫
- 作品数：25 被引量：62H指数：5
- 供职机构：中国医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Axin基因异常高甲基化对肺癌细胞生物学行为的调节被引量：2
- 2013年
- 目的体轴抑制因子Axin是Wnt信号传导通路的关键抑制因子,本研究探讨部分肺癌细胞系中Axin表达下调的原因,及其表达下调对肺癌生物学行为的影响。方法应用甲基化特异性PCR(MSP)对BE1和SPC-A-1细胞系中Axin基因启动子区和第一内含子区的甲基化状态进行了检测,应用RT-PCR方法检测了两细胞系中AxinmRNA表达。利用野生型Axin质粒转染两种细胞,并且应用MTT和Transwell细胞侵袭实验观察两种细胞系在转染后细胞生物学行为的变化。结果 BE1细胞中Axin基因的启动子区和第一内含子区为高甲基化状态,而SPC细胞为非甲基化状态,BE1细胞中AxinmRNA的表达明显低于SPC细胞系(P<0.05),5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine)作用于BE1细胞可以使高甲基化的Axin基因去甲基化并上调Axin的转录。转染野生型Axin可以明显抑制BE1细胞和SPC-A-1细胞的增殖和侵袭(P<0.05),其中BE1细胞受到的抑制程度更为明显。结论 Axin基因高甲基化可能是其在肺癌中表达下调的重要原因,过表达Axin可以明显抑制Axin高甲基化肺癌细胞的增殖和侵袭能力。
- 杨连赫王健张清富徐洪涛李庆昌王恩华
- 关键词：甲基化肺癌
- Axin抑制A549细胞迁移能力及其机制的研究
- 2013年
- 目的:Wnt信号传导通路的异常激活在肿瘤发生和发展中起着重要的作用,而Axin可以通过参与形成降解复合体下调β-catenin负向调控Wnt通路,抑制肿瘤细胞的恶性生物学行为。本次实验的目的是研究Axin对肺癌细胞迁移能力的影响及可能的途径。方法:在已有野生型Axin质粒的基础上构建了突变型Axin质粒(Axin与β-catenin结合位点剪切突变,用AxinΔβ-ca表示),并向A549细胞中转染野生型Axin和突变型Axin。Western blot法检测转染后Axin和β-catenin的表达。用各转染组细胞进行划痕实验和Tr-answell细胞迁移实验。结果:转染野生型Axin可以明显的下调A549中β-catenin的表达(P<0.01),抑制A549细胞的迁移能力(P<0.01),而转染突变型Axin和空质粒后A549细胞中β-catenin没有明显的变化,细胞的迁移能力未受到明显的影响。结论:体轴抑制因子Axin可以明显的抑制肺癌细胞的迁移能力。而这种作用可能与其负向调控Wnt通路有关。Axin可能成为临床治疗肺癌的新靶点。
- 杨连赫马爽徐洪涛李庆昌王恩华
- 关键词：Β-连环蛋白迁移
- 中枢神经细胞瘤的病理研究被引量：4
- 2013年
- 目的对8例脑中枢神经细胞瘤病例进行研究,探讨其组织学、免疫组化和超微结构特点。方法对2000～2012年间8例脑室肿瘤进行组织学观察,用免疫组化检测几种重要的肿瘤标记物的表达,其中包括细胞角蛋白(广谱)CK、上皮膜抗原(EMA)、波形蛋白(Vimentin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经突触素(Syn)、S100和Ki67。结果对8例中枢神经细胞瘤进行组织学检查,结果显示该肿瘤具有一定的形态学特点,肿瘤细胞呈现片状排列或不规则的"菊形团"样排列,也可见肿瘤细胞围绕血管形成"假菊形团",肿瘤细胞形态单一,细胞多呈圆形,细胞核圆形或卵圆形,染色质细腻呈斑点状。免疫组化结果显示8例中枢神经细胞瘤CK、EMA和vimentin染色均为阴性,GFAP阳性者5例,Syn阳性者8例,S100阳性者4例,8例Ki67染色均为阳性,但比率较低,均为1%～3%。结论中枢神经细胞瘤具有较为典型的形态学特征和免疫组化染色特点,这些特点对中枢神经细胞瘤的诊断具有重要的提示作用。
- 马爽杨连赫王劲鸥郭阳
- 关键词：中枢神经系统肿瘤病理学免疫组织化学染色
- Axin过表达下调β-catenin和TCF-4表达并抑制肺癌BE1细胞的增殖和侵袭被引量：8
- 2009年
- 背景与目的Axin是Wnt通路的重要负性调节因子,其低表达和β-catenin、TCF-4的高表达与多种肿瘤有关。本研究旨在探讨axin在肺癌细胞中的表达与β-catenin和TCF-4的关系,及其对肺癌细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响。方法将axin基因转染入axin低表达的肺癌BE1细胞系,应用免疫荧光方法观察转染组和对照组细胞中axin的表达对β-catenin和TCF-4的影响;采用RT-PCR方法检测axin和β-catenin、TCF-4mRNA表达的变化;采用流式细胞术、MTT和Transwell检测肺癌细胞凋亡、增殖和侵袭能力的变化。结果肺癌BE1细胞转染axin基因后(BE1-axin),axin的mRNA和蛋白水平均明显增加,β-catenin蛋白表达明显减少,TCF-4的蛋白和mRNA表达均明显下降。同时,BE1-axin细胞的凋亡率增加,增殖和侵袭能力明显下降。结论Axin过表达能下调β-catenin的蛋白表达和TCF-4的转录,抑制肺癌细胞的增殖和侵袭能力,并诱导肺癌细胞凋亡。
- 刘树立徐洪涛杨连赫李庆昌韦强王恩华
- 关键词：AXINBETACATENIN
- 肺癌组织Axin与DNMT1表达及其生物学意义的探讨被引量：5
- 2011年
- 目的:分析Axin和DNA甲基转移酶1(DNMT1)在肺癌组织中的表达和相关性,及其与肺鳞癌和腺癌临床病理因素的关系。方法:采用免疫组化方法检测Axin和DNMT1在100例肺癌组织中的表达情况。结果:Axin在肺鳞癌和腺癌组织中表达明显减少,其细胞质表达与肺癌的分化程度相关(P=0.044),核表达与肺癌的组织学类型(P=0.001)和TNM分期(P=0.016)相关。DNMT1在肺癌组织中的表达明显增加,并与肺鳞癌和腺癌的组织学类型(P=0.005)、分化程度(P=0.038)、TNM分期(P=0.031)和淋巴结转移(P=0.032)显著相关。Axin在肺癌组织中的低表达与DNMT1高表达显著负相关(r=-0.222,P=0.027),而在肺腺癌组织中Axin的核表达也与DN-MT1的表达显著负相关,r=-0.308,P=0.026。结论:Axin在肺鳞癌和腺癌组织中的低表达与DNMT1的高表达显著相关。DNMT1的表达可以作为肺癌恶性程度和进展情况的指标之一。
- 刘树立徐洪涛李庆昌杨连赫王恩华
- 关键词：AXINDNA甲基化
- 5-氮杂-2'-脱氧胞苷对肺癌细胞系BE1和LTEP-α-2中Axin基因表达及细胞增殖的影响
- 2013年
- 目的本研究的目的是探讨5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza)对人肺癌细胞系BE1及LTEP-α-2的增殖和侵袭的调节及其可能的机制。方法两个细胞系均应用5-Aza进行处理,并应用MTT法检测两细胞系经5-Aza处理后细胞增殖能力的变化,Transwell法检测了两细胞系处理后侵袭能力的变化,Westernblot检测Axin、β-catenin、cyclin D1和MMP-7的表达。结果 5-Aza抑制BE1和LTEP-α-2细胞的增殖和侵袭能力(<0.05),与LTEP-α-2细胞系相比,BE1细胞系受抑制程度更为明显(<0.05)。5-Aza上调BE1细胞中Axin的表达,抑制β-catenin、cyclin D1和MMP-7的表达,但对LTEP-α-2细胞中Axin等的表达没有明显的影响。结论 5-Aza可以抑制肺癌细胞的增殖和侵袭,BE1细胞中的Axin基因可能存在异常高甲基化,高甲基化的Axin基因可能成为未来治疗肺癌的靶点。
- 杨连赫马爽张清富王健王恩华
- 关键词：肺癌增殖
- Rsf-1在星形细胞瘤中的表达及其与临床病理因素的关系
- 2018年
- 目的:星形细胞瘤是中枢神经系统最常见的神经上皮性肿瘤,高级别的星形细胞瘤呈浸润性生长并且预后不良,重塑因子-1(Rsf-1)是位于人类染色体11q13.5区域的RSF基因的表达产物,在多种恶性上皮性肿瘤中都有异常高表达的现象,并且与多种肿瘤的恶性进展及不良预后相关,本文旨在研究Rsf-1在星形细胞瘤中的表达及其与患者临床病理因素的关系。方法:选取2006年至2012年间星形细胞瘤术后石蜡标本130例,WHO组织学分级Ⅰ-Ⅳ级,通过免疫组织化学染色检测Rsf-1在星形细胞瘤中的表达水平。应用卡方检验统计Rsf-1的表达与患者临床病理因素的关系,Kaplan-Meier分析Rsf-1的表达与患者预后的关系。结果:Rsf-1在部分的星形细胞瘤中异常高表达(63/130),并且其高表达与肿瘤大小、WHO分级及Ki-67指数呈正相关(P<0.01),而与年龄、性别和肿瘤的发生部位没有明显关系(P>0.05),Kaplan-Meier曲线表明Rsf-1的高表达与星形细胞瘤患者不良预后呈正相关(P<0.001)。结论:Rsf-1的在星形细胞瘤中异常高表达,并且与肿瘤大小、WHO分级、Ki-67指数及不良预后等关系密切,Rsf-1可能在星形细胞瘤的发生发展中发挥作用。
- 马爽奚卓杨连赫郭阳
- 关键词：星形细胞瘤癌基因预后免疫组织化学染色增殖
- TCF-4在肺癌中高表达并与肺癌的进展有关被引量：16
- 2008年
- 背景与目的T细胞因子4(Tcellfactor4,TCF-4)是Wnt信号传导通路的重要分子,但其mRNA及蛋白在肺癌组织及细胞系中的表达情况和意义的相关研究较少。本研究的目的是检测TCF-4在肺癌组织和细胞系中的表达情况,并探讨其与肺癌的临床病理因素和生物学行为的关系。方法采用免疫组织化学(S-P法)检测120例肺鳞癌和肺腺癌患者及10例癌旁正常肺组织中TCF-4的表达;应用免疫荧光法检测肺癌细胞系及HBE(人正常支气管上皮)细胞系中TCF-4的表达水平及亚细胞定位;应用RT-PCR方法检测九种肺癌细胞系中TCF-4mRNA的表达水平。结果在120例肺鳞癌和肺腺癌组织标本中,96例为TCF-4高表达(80.0%),其中包括37例同时有细胞浆和核表达(30.8%)。TCF-4的高表达水平与患者的TNM分期正相关(P=0.022),10例癌旁正常肺组织无TCF-4表达。免疫荧光显示TCF-4蛋白在正常支气管上皮细胞系中表达极弱,而在肺癌细胞系中则出现明显的表达,主要定位于细胞核。TCF-4的mRNA在不同组织学类型的肺癌细胞系中的表达并不一致,巨细胞癌细胞系中相对较高,而腺癌细胞系中表达较低。结论TCF-4的高表达与肺癌的进展密切相关,有效抑制TCF-4在肺癌中的高表达可能成为肺癌治疗的新途径。
- 杨连赫徐洪涛王妍刘洋赵月戴顺东韦强苗原韩阳杨志强刘楠王恩华
- 关键词：T细胞因子4肺肿瘤肿瘤标志物免疫组织化学免疫荧光
- p53负向调控肺癌A549细胞Wnt通路活性并抑制其增殖和侵袭被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨野生型p53对Wnt通路的调节以及对肺癌细胞生物学行为的影响。方法:分别利用野生型p53质粒及siRNA,分别转染和干扰A549细胞中的野生型p53,而后用Western blot检测A549细胞中β-catenin和cyclin D1的表达,用荧光素酶报告基因法检测Wnt通路活性,用MTT和Transwell实验检测A549细胞的增殖和侵袭能力。结果:转染野生型p53后能够明显下调A549细胞中β-catenin和cyclin D1表达(P<0.01),抑制肺癌细胞的增殖和侵袭(P<0.05),而干扰p53可以明显地上调β-catenin和cyclin D1表达(P<0.01),增强肺癌细胞的增殖力和侵袭力(P<0.05)。结论:野生型p53负向调控A549细胞中的Wnt信号转导通路,抑制其增殖和侵袭能力。
- 杨连赫马爽王健张清富崔权哲唐仲萍徐中海王恩华
- 关键词：P53Β-连环蛋白肺癌
- Disabled-2基因去甲基化对肺癌细胞系Wnt通路及增殖能力的影响被引量：3
- 2016年
- 目的:探讨Dab2启动子区的甲基化状态及其对Dab2表达的影响,对Wnt通路和肺癌细胞增殖能力的影响。方法:BSP检测去甲基化试剂处理前后BE1细胞启动子区Dab2甲基化状态;Real-time PCR检测去甲基化试剂处理前后Dab2 mRNA水平;Western blot检测去甲基化试剂处理前后Dab2变化和Wnt通路的变化;MTT法检测BE1细胞经去甲基化试剂处理后增殖能力的变化。结果:BE1细胞Dab2基因启动子区处于高甲基化状态,经去甲基化试剂处理后Dab2启动子区发生明显去甲基化(37%vs 10.3%,P<0.01),Dab2mRNA在去甲基化试剂处理后明显上调,Western blot检测显示BE1细胞经去甲基化试剂处理后Dab2蛋白表达明显上调,而Wnt通路关键分子β-catenin及其下游Cyclin D1表达下调,BE1细胞经去甲基化试剂处理后增殖能力明显下调。结论:Dab2基因启动子区高甲基化抑制肺癌细胞中Dab2转录水平和表达,Dab2基因去甲基化抑制Wnt通路,进而抑制肺癌细胞的增殖能力。
- 杨连赫马爽张婉琳沈帅于承仟王雪
- 关键词：甲基化肺癌增殖
