林海燕
- 作品数：10 被引量：7H指数：1
- 供职机构：北京师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 一种新的钙依赖性蛋白激酶(CDPK)的基因克隆和功能研究
- CDPK是植物所特有的一类受钙调节并具有激酶活性的蛋白质,其分子的C末端是钙离结合位点,与钙调素有很高的同源性,而N末端是蛋白激酶活性基团;目前的研究认为其功能与植物细胞有丝分裂过程密切相关。本文在研究植物看丝粒／动粒复...
- 罗松王世峰宋长城赵晖林海燕彭安王永潮
- 文献传递
- 利用正义和反义技术研究着丝粒/动粒复合体蛋白CENP-B在细胞周期调控中的作用被引量：1
- 2005年
- 为研究着丝粒/动粒复合体蛋白(centromere/kinetochore complexprotein-B,CENP-B)高表达和低表达在细胞周期调控中的作用,将全长CENP-BcDNA基因(cenpb)构建到pBI-EGFP真核表达载体上,获得正义和反义cenpb真核表达重组质粒,并转染HeLa-Tet-Off细胞.结果表明,正义质粒转染导致细胞产生巨型着丝粒/动粒复合体,细胞分裂几次后发生凋亡;转染反义质粒至HeLa-Tet-Off细胞,克隆筛选获得稳定表达反义cenpb的细胞株HACPB.HACPB细胞着丝粒/动粒复合体小、数量多,CENP-B表达量低;细胞周期延长,恶性表型降低,裸鼠致瘤能力降低,G2/M期向下一周期的G1期过渡发生延迟.细胞周期蛋白相关激酶(cyclin-dependentkinases,CDKs)、细胞周期蛋白、细胞周期蛋白相关激酶抑制剂(CDKinhibitors,CKIs)等的表达在某时相发生特异的变化.这些结果说明,CENP-B是维持着丝粒/动粒复合体正常结构和功能的必需组分,并参与细胞周期调控.
- 罗松林海燕齐建国王永潮
- 关键词：CENP-B细胞周期调控
- 着丝粒／动粒复合体蛋白CENP-B在细胞周期调控中的作用
- 着丝粒／动粒复合体是真核细胞染色体上的特殊结构,由DNA和蛋白质组成;承担着姐妹染色单体连接和分离,在细胞有丝分裂和减数分裂中连接纺锤丝并至少部分提供染色体运动的能量,以及参与细胞周期调节控制点等重要功能。其中CENP-...
- 罗松林海燕赵晖王世峰彭安张焕相王永潮
- 文献传递
- 着丝粒/动粒复合体蛋白CENP-B在细胞周期调控中的作用
- 人们利用正反义转染技术研究了CENP-B在细胞周期调控中的作用.获得正反义真核表达CENP-B重组载体,经过克隆和亚克隆筛选获得稳定表达反义CENP-B的细胞株HACPB.结果说明CENP-B在细胞周期调控、细胞恶性表型...
- 林海燕
- 关键词：CENP-B细胞周期调控
- 文献传递
- 反义CENP-B对HeLa(Tet-off)细胞增殖状况的影响被引量：1
- 2001年
- 为了检测反义转染引起的细胞着丝粒蛋白CENP-B表达的变化情况,用原核表达的融合蛋白GST-CENP-B免疫Balb/c 小鼠,制得抗CENP-B的鼠抗血清（MaCenpB）.转染了含有反义CENP-B表达载体pBI-EGFP-as-CenpB的HeLa-Tet-off细胞（HaCb）,用Northern blot和Western blot研究了转染后细胞内源CENP-B基因表达的抑制情况.生长曲线表明,反义CENP-B抑制HeLa（Tet-off）细胞增殖,使倍增时间延长了32.8h.流式细胞光度术分析表明,较之HeLa（Tet-off）细胞,HaCb的G1期比例增加（△G1=9％）,S期比例减少（△S=11％）.同时,有丝分裂指数（MI）大大降低;间接免疫荧光分析表明,HaCb的着丝粒组装受到抑制.这说明,CENP-B的正常表达对于细胞的增殖是必要的.
- 粱前进王谦林海燕罗松王春梅何大澄王永潮
- 关键词：着丝粒蛋白细胞分裂细胞增殖CENP-B细胞周期
- 一种新的钙依赖性的蛋白激酶基因CP4的克隆及其表达研究
- 2002年
- 在利用人ACA (Anti Centromere/KinetochoreAutoantibody)血清研究拟南芥ACA相关蛋白的过程中克隆了钙依赖性的蛋白激酶基因家族的一个不典型基因 ,称为CP4 ,GenBank注册号为AF130 2 5 2。Southern杂交结果表明 ,拟南芥基因组中至少存在两种以上等位形式的CP4。原位杂交结果表明 ,CP4mRNA在拟南芥的花和根中高表达 ,在果实和叶片中没有表达。此外还构建了CP4的高效表达载体 ,为进一步研究CP4的功能打下了基础。
- 王世峰罗松林海燕赵晖梁华齐建国王跃王永潮
- 关键词：拟南芥基因组蛋白激酶基因钙依赖性血清克隆
- 一种拟南芥膜相关蛋白的基因克隆及功能研究
- 利用由CREST综合症病人来源的ACA( Anti centroinere Autoantibody)血情筛选拟南芥cDNA文库,我们得到一阳性克隆CP5。序列分析结果表明该cDNA片段全长1263bp,编码一种含387...
- 罗松王世峰宋长城赵晖林海燕彭安王永潮
- 文献传递
- CENP-B过表达对着丝粒／动粒复合体结构及细胞增殖的影响
- 着丝粒／动力复合体是增核细胞染色体上的特殊结构,由DNA和蛋白质组成;承担着姐妹染色单体连接和分离,在细胞有丝分裂和减数分裂中连接纺锤丝并至少部分提供染色体运动的能量,以及参与细胞周期调节控制点等重要功能。其中CENP-...
- 罗松林海燕赵晖王世峰彭安张焕相王永潮
- 文献传递
- 拟南芥膜相关蛋白基因CP5的克隆及其表达研究被引量：4
- 2002年
- CP5是利用人ACA血清筛选拟南芥cDNA文库的过程中克隆的一个新基因 ,GenBank注册号为AF130 2 5 3。Blast软件比对表明它位于拟南芥的第一条染色体上 ,氨基酸序列与动物的磷脂酰胆碱转移蛋白的同源性为 2 5 %。软件预测它是一种膜蛋白。Southern杂交结果表明CP5在拟南芥基因组中为单拷贝。原位杂交结果表明CP5mR NA在根部主要在根的皮层 ,在叶片和叶柄组织中在维管组织附近的细胞 ,花序基部成熟小花中、内果皮和成熟的种子中高表达。兔抗CP5的多克隆抗体识别拟南芥愈伤组织中2 7 5KD抗原 ;游离原生质体的间接免疫荧光结果表明CP5主要定位在核膜、内质网和质膜等膜系统上。
- 罗松王世峰林海燕赵晖梁华齐建国王跃王永潮
- 关键词：膜蛋白拟南芥基因克隆基因表达PSS
- 中心体异常在咖啡因增强顺铂杀伤人肝癌细胞系中的作用被引量：1
- 2004年
- 为了探讨咖啡因是否影响细胞周期检验点而增强顺铂杀伤肿瘤细胞及其作用机制 ,选取同步化于S期的肝癌细胞系SMMC 772 1,用顺铂和咖啡因进行不同方式的处理 ,包括顺铂处理、咖啡因处理以及先经顺铂 ,再用咖啡因处理 .利用相关方法对不同处理的细胞进行了分析 ,包括细胞形态 ,细胞生长速率 ,多核细胞的形成与死亡 ,中心体的异常等 .结果显示 ,顺铂与咖啡因联合处理的细胞出现明显的多核化现象 ,多核细胞占总细胞的百分比可以达到 30 %以上 ,高于用顺铂或用咖啡因处理的细胞 .同时观察到多核细胞生存能力较差 ,它们会通过细胞凋亡的形式死亡 .抗中心体人自身免疫血清的免疫荧光结果显示 ,中心体异常与多核细胞的形成直接相关 .在部分多核细胞的核周围有多个不同强度的荧光点 ,在另部分多核细胞中 ,在其中央有一个大的荧光点 ,被多个细胞核围绕 ,荧光较强 .根据结果推测 ,由多个不完整的中心体导致的多极分裂形成多核细胞 ,随后多个中心体聚集到中央形成大的中心体 ,负责间期微管的组装 .结果表明 ,受到顺铂损伤的细胞由于检验点的作用而使细胞周期阻断 ,咖啡因可消除周期的阻断 ,使细胞在中心体未完成正常复制状态下进入有丝分裂 ,产生大量多核细胞 ,这些多核细胞最终发生凋亡 .
- 齐建国桑建利林海燕陈晓波王永潮
- 关键词：中心体顺铂咖啡因
