柴新君
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：南开大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- ProNGF在大肠杆菌中的表达、纯化和复性被引量：4
- 2008年
- 将含有前导肽的人神经生长因子基因(proNGF)克隆在原核表达载体pET15b中,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,经IPTG诱导实现了目标融合蛋白的高效表达。SDS-PAGE分析表明表达蛋白占全菌总蛋白的20%左右,表达蛋白主要以包涵体的形式存在。用6mol/L的盐酸胍溶解包涵体后,通过Ni2+-NTA柱纯化,获得纯化的目标融合蛋白,电泳谱带扫描分析表明蛋白纯度可达90%以上。Western blotting检测显示,表达产物有较强的免疫学活性。经肠激酶作用后得到proNGF非融合蛋白,分子量为27kD,100mL表达菌液可获得13.1mg proNGF蛋白。用透析复性的方法将目的蛋白重折叠,复性率为18%,在重折叠过程中前导肽发挥了一定的积极作用。用PC12细胞进行生物活性鉴定,结果显示复性后的proNGF蛋白具有良好的生物活性。
- 江汉民柴新君何冰赵娟俞新大
- 关键词：神经生长因子前导肽蛋白复性生物活性
- ProNGF在大肠杆菌中的表达优化及其性质研究
- 神经生长因子(Nerve growth factor, NGF)是神经系统最重要的生物活性分子之一,其生理作用十分广泛：它是神经细胞生长和修复所必需的活性物质;它在神经系统、免疫系统和内分泌系统的相互作用中有着重要调节功...
- 柴新君
- 关键词：神经生长因子大肠杆菌分子克隆PCR扩增
- 文献传递
