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梁丽: 作品数：33 被引量：84H指数：5; 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>; 发文基金：国家科技基础条件平台建设计划国家科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学理学轻工技术与工程更多>>

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速率比浊法测定13价肺炎球菌结合疫苗中的各型多糖含量被引量：5: 2014年; 目的：建立速率比浊法检测13价肺炎球菌结合疫苗各型多糖含量。方法：采用免疫化学系统（IMMAGE 800）,选择非竞争性浊度模式,样品或标准品20μL,血清20μL,反应缓冲液200μL,增益系数为4,反应时间为2.5 min;用氢氧化钠解吸附法处理样品和标准品。结果：在本文条件下,1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F、23F型肺炎球菌荚膜多糖浓度在1～6μg·mL^-1检测范围内,线性良好（r〉0.99）;重复性RSD均低于7%;各型多糖含量回收率在70%～130%;专属性考察结果显示,除9N型多糖的存在会干扰9V型多糖含量检测外,13价肺炎球菌结合疫苗中不包含的多糖（2、8、10A、11A、12F、15B、17F、20、22F、33F型）对此方法没有影响;耐用性研究结果显示,氢氧化钠解吸附法处理样品和标准品时,控制在10 s左右即中和解吸附过程中加入的氢氧化钠;用所建立速率比浊法检测13价肺炎球菌结合疫苗中的1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F、23F型肺炎球菌荚膜多糖含量,结果显示4批成品检测值在理论值的70%～130%之间。结论：所建立的检测方法准确,重复性好,可作为13价肺炎球菌结合疫苗的质控标准。; 陈琼王珊珊梁丽王春娥李茂光石继春叶强

2～59岁健康人群接种ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗的免疫原性观察被引量：13: 2012年; 目的评价ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗在2～59岁健康人群中的免疫原性。方法 2～59岁健康人群接种者随机抽样(n=60),接种一剂四价脑膜炎球菌多糖疫苗。采集接种前和接种后1个月血清,采用体外杀菌试验(Serum bactericidal assay,SBA)检测血清中抗A、C、Y、W135群脑膜炎球菌的血清杀菌滴度。结果免疫前、后血清抗A群脑膜炎球菌的血清杀菌滴度GMTs(95%CI)分别为1241(736,2091)和7559(5520,10351)(P<0.05);抗C群脑膜炎球菌的血清杀菌滴度GMTs(95%CI)分别为4(9,21)和4787(2947,7775)(P<0.05);抗W135群脑膜炎球菌的血清杀菌滴度GMTs(95%CI)分别为16(9,28)和368(162,883)(P<0.05);抗Y群脑膜炎球菌的血清杀菌滴度GMTs(95%CI)分别为120(58,246)和1373(687,2745)(P<0.05)。免疫前和免疫后血清抗A群脑膜炎球菌的杀菌滴度≥128的比例分别为87(77.4,95.1)%和100(83.2,100)%;抗C群脑膜炎球菌的比例分别为17(8.3,28.5)%和97(88.5,99.6)%;抗W135群脑膜炎球菌的比例分别为13(5.9,24.6)%和68(55.0,79.7)%;抗Y群脑膜炎球菌的比例分别为57(43.2,69.4)%和85(73.4,92.9)%。免疫后较免疫前抗A群、C群、W135群和Y群脑膜炎球菌杀菌抗体滴度≥4倍升高的比例分别为50(27.2,72.8)%、97(88.5,99.6)%、62(43.2,73.9)%和55(41.6,67.9)%。结论虽然免疫前人群由于地方和国家免疫计划的实施已具有较高水平的抗A群脑膜炎球菌的血清杀菌滴度,但接种ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗后可以使其保护水平进一步提高,并使人群对C群、W135群和Y群脑膜炎球菌的低水平杀菌抗体滴度均显著升高达到保护水平,证明ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗在2～59岁健康人群中具有比较好的免疫原性。; 李亚南乔瑞洁梁丽赵志强唐静王浩史晓玲李凤祥谢贵林叶强

A群流行性脑膜炎球菌多糖含量检测免疫速率比浊方法的建立及验证被引量：5: 2015年; 目的应用免疫速率比浊方法测定A群流行性脑膜炎球菌多糖含量,并进行验证。方法采用免疫速率比浊方法测定A群脑膜炎球菌多糖标准品多糖含量,绘制标准曲线,对该方法的精密性、准确性、灵敏性进行验证,并进行干扰试验。结果多糖抗原浓度在0～10μg/ml之间,与相应的浊度值呈良好的线性关系,R2=0.984 3;该方法检测结果的日内和日间CV值均小于5%,不同浓度A-DT结合物样品的回收率在99.67%～102.00%之间,最低检出限为0.159μg/ml;加入C群流行性脑膜炎球菌多糖后的A群脑膜炎球菌多糖含量与未添加相比,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论免疫速率比浊方法测定A群脑膜炎球菌多糖含量具有较高的准确度、精确度及灵敏度,并具有较强的特异性。; 王珊珊杨越王婷婷梁丽唐静赵丹李亚南; 关键词：比浊法流行性脑脊髓膜炎多糖

金黄色葡萄球菌核酸检测试剂盒用国家参考品的研制被引量：2: 2021年; 目的研制金黄色葡萄球菌核酸检测试剂盒用国家参考品。方法将10株金黄色葡萄球菌和10株阴性对照代表性菌株分别在适宜条件下复苏培养,制备合适浓度的菌悬液,并加热灭活和分装。随机抽样不同候选参考品样品10支进行均匀性分析,并将样品分别置于2~8、25、37℃条件下保藏以及反复冻融,评价标准物质的稳定性。同时对候选参考品的准确性、特异性、重复性、最低检出限进行分析,并组织8家实验室进行协作标定。结果制备了由阳性、阴性、重复性和最低检出限样品组成的金黄色葡萄球菌核酸检测试剂盒用候选参考品。不同候选参考品不同样品间的Ct值的变异系数在1.23%~3.86%之间,表明制备候选参考品均匀性良好。同时证实P1~10阳性和最低检出限候选参考品样品在反复冻融及加速破坏条件下稳定性良好。应用3个不同厂家生产试剂盒进行重复性验证实验显示,样本的Ct值均小于5.0%,表明候选参考品的重复性良好。除P6阳性候选参考品样品不能被部分试剂盒检出,其余阳性参考品样品均能成功检测、最低检出限为1.0×10^(3)个/m L。协作标定结果进一步表明阳性、阴性、重复性和最低检出限候选参考品均符合国家参考品的各项要求。结论研制的金黄色葡萄球菌核酸检测试剂盒用国家参考品已获得批准,可用于金黄色葡萄球菌核酸检测试剂盒的质量控制和评价。; 陈驰梁丽王春娥石继春龙新星刘茹凤黄洋李康徐潇李江姣徐颖华叶强; 关键词：金黄色葡萄球菌核酸国家参考品均匀性稳定性

应用分子生物学方法鉴定6群肺炎链球菌血清型被引量：7: 2016年; 目的利用分子生物学方法,鉴定26株6群肺炎链球菌的血清型。方法利用6群肺炎链球菌荚膜多糖相关基因设计合成6对特异性引物,PCR扩增26株肺炎链球菌,并对PCR产物进行基因序列的测定及分析。结果26株肺炎链球菌cpsD蛋白229个氨基酸中有7个突变点,第220~222位均没有缺失;其中,19株肺炎链球菌具有与wci Nα蛋白氨基酸序列完全一致的氨基酸组成,第150位均为Ala,第38位均为Asp,其余7株与wciN_α蛋白氨基酸序列没有相似性,但与wciN_β蛋白氨基酸序列相似性超过99%;15株wciP蛋白第195位为Ser,11株wci P蛋白第195位为Asn。综合分析比对后,26株6群肺炎链球菌中,11株属于6A型肺炎链球菌,8株属于6B型肺炎链球菌,4株属于6C型肺炎链球菌,3株属于6D型肺炎链球菌。结论分子生物学方法可用于6群肺炎链球菌血清型的鉴定,为完善6群肺炎链球菌的菌种档案提供了实验依据。; 陈琼李康梁丽龙新星黄洋石继春叶强; 关键词：肺炎链球菌血清型

一株气管炎疫苗生产菌株的鉴定更名被引量：1: 2016年; 目的：对中国医学细菌保藏管理中心库藏气管炎疫苗生产菌株重新鉴定并更名。方法同时培养库藏待检菌株CMCC（B）29108和对照用模式株DSM30007T,比较二者的形态、生理生化、脂肪酸成分等特性,对16S rRNA和rpoB基因进行系统进化分析以及DNA-DNA同源性测定。结果16S rRNA基因序列比对结果显示CMCC（B）29108与不动杆菌属（Acinetobacter）相近,与模式株鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii）DSM30007T 相似性最高,形态学特性、生理生化特性以及脂肪酸成分构成均与DSM30007T 十分相似,仅存在个别差异。基于Acinetobacter属所有成员的16S rRNA和rpoB基因的系统进化分析均显示CMCC（B）29108与DSM30007T 稳定聚类成一个独立分支,且二者的DNA-DNA同源性为100%。结论基于表型、系统进化学以及化学成分的鉴定研究结果,CMCC （B）29108为鲍曼不动杆菌种内区别于模式株的一株菌,可用于气管炎疫苗生产,建议更名为鲍曼不动杆菌（ Acinetobacter baumannii）。; 石继春杜慧竟梁丽李康徐潇邢玉华陈翠萍叶强; 关键词：气管炎疫苗菌种鉴定鲍曼不动杆菌

A、C群脑膜炎球菌-b型流感嗜血杆菌多糖结合疫苗免疫学效果观察被引量：22: 2012年; 目的观察A、C群脑膜炎球菌-b型流感嗜血杆菌(Meningococcal group A&C/Haemophilus influenzae type b,ACHib)多糖结合疫苗的免疫原性。方法采用开放、完全随机、盲态观察的方法,将1 800名观察对象分为临床试验组和对照组,每组各900名,两组又按3个年龄段分为3～5、6～11和12～71月龄组。试验组仅经上臂三角肌肌内注射试验疫苗(ACHib多糖结合疫苗),对照组分别经左右上臂同时注射两种对照疫苗(A、C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗和Hib结合疫苗)。3～5月龄组免疫3针,每针间隔1个月;6～11月龄组免疫2针,每针间隔1个月;12～71月龄组免疫1针。分别于免疫前、全程免疫后30～35 d采集静脉血,分离血清,采用功能性抗体杀菌力法检测A、C群脑膜炎球菌血清杀菌抗体滴度,间接ELISA法检测Hib抗体水平,并计算抗体阳转率及抗体增长倍数。结果免疫后,3个年龄段的试验组与对照组血清A、C群脑膜炎球抗体和Hib抗体阳转率差异均无统计学意义(P>0.05)。3个年龄段试验组与对照组易感和非易感人群A、C群脑膜炎球菌抗体滴度差异均无统计学意义(P均>0.05),而试验组Hib抗体水平低于对照组,且差异有统计学意义(P<0.001)。结论 ACHib多糖结合疫苗具有良好的免疫原性,可作为上述3种病原菌的预防制剂推广使用。; 李亚南梁丽李艳萍叶强; 关键词：脑膜炎球菌多糖疫苗 B型流感嗜血杆菌结合疫苗免疫原性

A群C群脑膜炎球菌结合疫苗上市后免疫学效果观察: 目的：考核和评价A群C群脑膜炎球菌结合疫苗大规模使用的免疫原性.方法：将6月龄～3 周岁的婴幼儿分成6～23月龄、24～35月龄两组,两组分别接种两针和1针,于接种前、接种后1月和1年采血,测定血清中A群、C群流脑抗体...; 李亚南莫少军梁丽周富昌农艺唐静杜宗利叶强; 关键词：流脑结合疫苗免疫原性

食品检验用标准菌株分子水平质控方法的建立与应用被引量：4: 2018年; 目的建立食品检验用标准菌株分子水平质控方法,并进行应用。方法使用16S rRNA基因序列分析、脉冲场凝胶电泳(PFGE)、多位点序列分型等分子生物学技术手段,对食品安全国家标准中使用的标准菌株进行分子确认,并对不同的批号进行验证。结果 16S rRNA基因序列比对结果符合该菌株所在的菌属,并获得标准菌株16S rRNA基因标准序列,不同批号的标准菌株16S rRNA基因序列完全一致;确定了每株标准菌株的ST型和基因型,并对不同批号的菌株进行了基因型比较,未发现型别改变;对无PulseNet标准操作方法的菌株,开展方法学研究,获得了最适用的限制性内切酶和电泳参数,建立了标准菌株分子指纹图谱,比较不同批号菌株的PFGE图谱,相似性均为100%。结论本研究首次将分子生物学技术应用到标准菌株的质量控制,突破了使用传统质控方法的瓶颈,从分子水平实现对标准菌株稳定性的评价,保证了标准菌株在食品检验过程中的稳定性和一致性。; 徐潇石继春王春娥梁丽李康孙文媛陈翠萍叶强; 关键词：标准菌株脉冲场凝胶电泳多位点序列分型食品检验

A群C群脑膜炎球菌结合疫苗的免疫效果被引量：10: 2014年; 目的观察A群C群脑膜炎球菌结合疫苗对6～23月龄、24～35月龄婴幼儿的免疫原性和免疫持久性。方法选择广西壮族自治区崇左市400名婴幼儿,其中6～23月龄和24～35月龄两个年龄段各200名,分别接种A群C群脑膜炎球菌结合疫苗2剂和1剂。分别于免疫前、全程免疫后1个月、1年采血,血清体外杀菌试验（serum bactericidal assay,SBA）检测血清抗体水平,评价其免疫原性和免疫持久性。结果免后1个月和1年,两个年龄组婴幼儿A群、C群抗体阳性率和GMT均较免疫前显著提高（P均＆lt;0.001）;免后1年,两个年龄组婴幼儿A群、C群抗体GMT低于免后1个月,但仍高于免前;免后1个月和1年,24～35月龄组婴幼儿A群、C群抗体GMT和增长倍数均但,仍高于免前高于6～23月龄组;两个年龄组龄婴幼儿易感者和非易感者A群、C群抗体阳性率和GMT均显著提高。结论A群C群脑膜炎球菌结合疫苗对6～35月龄婴幼儿具有良好的免疫原性和免疫持久性。; 李亚南莫少军周富昌梁丽农艺唐静杜宗利叶强; 关键词：脑膜炎球菌结合疫苗免疫原性

梁丽

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