汪源
- 作品数：8 被引量：10H指数：2
- 供职机构：暨南大学医学院生理学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广州市科技计划项目教育部基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 乙醇激活的鼻咽癌细胞氯电流的分子机制被引量：2
- 2014年
- 目的：研究乙醇对低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞氯通道的影响并探讨其分子机制。方法：MTT检测乙醇对细胞生长的影响；全细胞膜片钳技术记录乙醇对氯电流的影响；应用氯通道阻断剂分析该电流的特性；siR-NA干扰技术分析乙醇敏感氯通道的分子本质。结果：在等渗灌流液中记录到微弱的背景氯电流，随灌流液中乙醇浓度（0．17～170 mmol/L）的升高，所激活的氯电流呈倒U型曲线状，17 mmol/L的乙醇激活电流达到峰值，电流呈较明显的外向优势，能被高渗液及氯通道阻断剂5-nitro-2-（3-phenylpropylamino）benzoic acid（NPPB）所阻断；干扰ClC-3氯通道基因表达后乙醇激活的氯电流明显减小。结论：乙醇可能通过激活CNE-2Z细胞的ClC-3氯通道，诱导氯电流的产生。
- 林娜左婉红赖周毅伍嘉宝陈美苑汪源陈丽新王立伟
- 关键词：鼻咽肿瘤氯通道膜片钳术
- 敲低IK1钾通道抑制ClC-3氯通道的表达和功能被引量：2
- 2015年
- 目的:探讨Cl C-3氯通道是否为IK1钾通道的调节靶点,重点研究鼻咽癌细胞IK1钾通道对Cl C-3氯通道功能及蛋白表达的影响。方法:采用siRNA转染技术抑制低分化鼻咽癌上皮细胞(CNE-2Z)IK1基因的表达;real-time PCR技术检测Cl C-3 mRNA的表达;Western blot检测Cl C-3的蛋白表达;细胞免疫荧光结合激光共聚焦显微镜技术检测Cl C-3和IK1蛋白在细胞内分布;全细胞膜片钳记录细胞氯电流。结果:IK1 siRNA可以成功转染CNE-2Z细胞,有效抑制鼻咽癌细胞IK1钾离子通道的表达;用IK1 siRNA抑制鼻咽癌细胞IK1钾离子通道的表达后,Cl C-3的mRNA表达上调而Cl C-3蛋白却表达减少:在低分化鼻咽癌上皮细胞,低渗刺激可激活氯通道,产生一个较大的氯电流,在成功转染IK1 siRNA的细胞,此氯电流明显减弱。结论:敲低IK1钾离子通道可抑制Cl C-3氯离子通道的表达和功能。
- 邹丽莉叶东吕瑞玲汪源孙晓雪朱林燕陈丽新王立伟
- 关键词：CL鼻咽癌膜片钳技术
- 冰片对鼻咽癌细胞容积敏感性氯通道的激活作用被引量：3
- 2014年
- 目的探讨冰片对低分化鼻咽癌(CNE-2Z)细胞氯通道的激活作用及对细胞容积的影响。方法采用全细胞膜片钳技术记录冰片激活CNE-2Z细胞膜电流,分析其电流特性;用活细胞图像法观察并测量冰片对细胞体积的影响。结果细胞外灌流冰片(20μmol·L-1)诱导CNE-2Z细胞膜氯通道开放,产生氯电流,该电流有明显外向优势,无电压及时间依赖性失活,其翻转电位接近氯离子平衡电位,该电流可被氯通道阻断剂tamoxifen抑制,细胞外灌流47%高渗溶液完全抑制该电流。细胞外灌流冰片30 min,细胞体积缩小约9.4%,该作用可被tamoxifen完全抑制。结论冰片可以激活低分化鼻咽癌细胞容积敏感性氯通道,导致细胞体积缩小,氯通道在冰片引起细胞体积缩小中起着重要作用。
- 孟龙王海波邓志钦汪源伍嘉宝赖周毅吕瑞玲孙晓雪朱林燕陈丽新王立伟
- 关键词：冰片氯通道氯通道阻断剂癌细胞膜片钳技术细胞体积
- ClC-3基因过表达对小鼠骨量和骨结构的影响被引量：2
- 2016年
- 目的:研究过表达电压门控氯通道家族蛋白成员3(voltage-gated chloride channel family protein 3,ClC-3)基因对小鼠骨骼的影响。方法:3月龄雄性FVB小鼠用鼠尾基因检测法确定基因型后分为2组:野生型(WT)组和ClC-3过表达(ClC-3 transgene)组,每组各8只。分别测量2组小鼠体重,右侧胫骨长度和重量。取胫骨上段和中段进行脱钙,石蜡包埋,切片,HE染色后,采用骨形态计量学分析胫骨上段松质骨的骨小梁面积百分数(percent trabecular area,%Tb.Ar)、骨小梁数量(trabecular number,Tb.N)、骨小梁宽度(trabecular width,Tb.Wi)、骨小梁分离度(trabecular separation,Tb.Sp)和胫骨中段皮质骨的骨组织总面积(total tissue area,T.Ar)、皮质骨面积(cortical area,Ct.Ar)、皮质骨面积百分数(percent cortical area,%Ct.Ar)、骨髓腔面积(marrow area,Ma.Ar)、骨髓腔面积百分数(percent marrow area,%Ma.Ar)。结果:小鼠经鼠尾基因检测后确认为野生型或ClC-3过表达型。与WT组相比,ClC-3 transgene组小鼠体重及胫骨长度重量均减小(P<0.05);松质骨的%Tb.Ar和Tb.Wi均减小(P<0.05),Tb.Sp增大(P<0.05),Tb.N的变化无统计学意义;皮质骨的T.Ar、Ct.Ar和%Ct.Ar均减小(P<0.05),%Ma.Ar增大(P<0.05),Ma.Ar的变化无统计学意义。结论:ClC-3过表达导致小鼠的皮质骨和松质骨骨量减少,骨结构变差,提示ClC-3可能参与了骨形成和/或骨吸收。
- 汪源邓志钦吕瑞玲王海波高宏梁协稠谭秋婵朱林燕李青南王立伟陈丽新
- 关键词：骨形态计量学皮质骨
- 氯通道在雌激素调节成骨前体细胞MC3T3-E1中的作用
- 引言或概述雌激素调节成骨细胞和破骨细胞的活动,在调节骨代谢中起重要作用,是治疗绝经后骨质疏松的常用药物,但其作用机制尚未明确。成骨细胞和破骨细胞都表达氯通道,氯通道与破骨细胞的盐酸分泌和骨吸收功能密切相关,但是,目前对氯...
- 邓志钦李媛赖周毅汪源管玉涛罗海陈丽新王立伟
- 顺铂激活的低分化鼻咽癌细胞氯电流为非钙激活氯电流
- 2014年
- 目的:探讨顺铂激活的低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)氯通道电流是否为钙激活的氯电流。方法:采用膜片钳全细胞记录技术记录细胞内/外无Ca2+及钙通道阻断剂对顺铂激活氯电流的影响,并用高渗灌流液观察顺铂激活氯电流的容积敏感性。结果:去除细胞外液的Ca2+后,5μmol/L顺铂能诱发氯电流,且电流大小与细胞外有Ca2+时无明显差异,但潜伏期与达峰时间延长。细胞内外均无Ca2+对顺铂激活氯电流未产生影响。钙通道阻断剂nifedipine未能抑制顺铂诱发的氯电流。但细胞外灌流高渗液几乎可完全抑制顺铂激活的氯电流。结论:顺铂激活的氯通道开放不依赖于细胞内/外的Ca2+,该通道不是钙激活氯通道而很可能是容积敏感性氯通道。
- 阳小雅刘梅伍嘉宝赖周易汪源范爱辉朱林燕毛建文王立伟陈丽新
- 关键词：顺铂鼻咽肿瘤氯通道
- 乙酰胆碱在钩吻素己致小鼠中毒死亡中的作用
- 2016年
- 本文旨在探讨全血乙酰胆碱浓度与钩吻素己致昆明小鼠中毒死亡的关系。给昆明小鼠腹腔注射生理盐水、钩吻素己或不同剂量的氯化乙酰胆碱溶液,并对注射钩吻素己和中剂量氯化乙酰胆碱的小鼠给予阿托品解救。中毒死亡小鼠死后即时取血;存活小鼠在注射药液后20 min处死取血。用试剂盒测定小鼠全血乙酰胆碱浓度与乙酰胆碱酯酶活性,计算各组死亡率并分析其死亡情况。结果显示,相对于生理盐水对照组,腹腔注射半数致死量(0.15 mg/kg)的钩吻素己后,小鼠全血乙酰胆碱酯酶活力降低,全血乙酰胆碱水平升高,但其中死亡小鼠的全血乙酰胆碱浓度显著低于中剂量氯化乙酰胆碱组死亡小鼠的水平,而与中剂量乙酰胆碱组存活小鼠的水平无差异。阿托品可有效解救氯化乙酰胆碱中毒小鼠,但对钩吻素己中毒小鼠的抢救效果不明显。以上结果提示,钩吻素己可引起小鼠全血胆碱酯酶活力下降,乙酰胆碱浓度升高,但体内乙酰胆碱堆积可能并不是钩吻素己致小鼠中毒死亡的主要或唯一原因。
- 赖周毅王海波吕瑞玲谭秋婵邓志钦汪源孙晓雪伍嘉宝朱林燕王磊陈丽新叶文才王立伟
- 关键词：昆明小鼠乙酰胆碱乙酰胆碱酯酶
- 酒精对胰腺腺泡细胞氯电流的作用被引量：1
- 2014年
- 目的探讨酒精对胰腺腺泡细胞氯电流的作用及该电流的电生理学及药理学特性。方法采用膜片钳技术记录酒精诱导的胰腺腺泡细胞全细胞氯电流,细胞外灌流高渗灌流液和氯通道阻断剂观察该电流的特性。结果细胞在等渗条件下可记录到较小且稳定的背景氯电流,细胞外灌流500μmol/L酒精可以诱导出较大的全细胞氯电流。该电流具有明显的外向优势,但没有明显的电压和时间依赖性失活的特性。此外,该电流可以被高渗性细胞外灌流液及氯通道阻断剂NPPB所抑制。结论酒精可以激活胰腺腺泡细胞膜上氯通道,这可能是急性酒精性胰腺炎的发生机制之一。
- 黄维渊孟龙邹丽莉李梦佳伍嘉宝赖周毅汪源陈丽新王立伟
- 关键词：胰腺腺泡细胞氯通道膜片钳技术
