王一帆 作品数:11 被引量:24 H指数:3 供职机构: 河南师范大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家大学生创新性实验计划 国家大学生创新性实验计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 轻工技术与工程 化学工程 生物学 更多>>
萝卜过氧化物酶对小鼠机体抗氧化作用的研究 2010年 目的探索新的抗氧化剂。方法研究萝卜过氧化物酶(POD)对小鼠肝、脾和肾脏超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)的影响。结果用不同剂量的POD处理后,可以提高肝、脾和肾的SOD、GSH-Px的活性,减低丙二醛的含量。结论萝卜过氧化物酶可以提高机体的抗氧化能力。 王歌 刘伟 王一帆 王丽 王林嵩关键词:过氧化物酶 超氧化物歧化酶 谷胱甘肽过氧化物酶 丙二醛 转萝卜过氧化物酶基因毕赤酵母株系培养条件的优化 被引量:1 2010年 为了提高转萝卜过氧化物酶基因RsPrx1毕赤酵母株系的表达产量,对培养条件进行优化。试验结果表明,26℃,pH7.4,甲醇浓度0.5%,通气面积1.5cm2,225r/min条件下,萝卜过氧化物酶RsPrx1表达量达50.95U/mL。在优化条件下,对培养基补充方式和菌株的遗传稳定性研究表明,彻底更换培养基较补充培养基提高3倍得率,转基因菌株遗传稳定性较高。 王一帆 李芳军 杨静 王丽 王林嵩关键词:毕赤酵母 转基因 萝卜过氧化物酶基因片段的cDNA克隆及花期表达谱分析 被引量:6 2009年 通过研究过氧化物酶(POD)活性在心里美萝卜花期的变化以及萝卜POD基因的结构,探讨POD的基因结构和功能之间的关系。测定了萝卜花期不同时间各个部位中POD活性,用改进的半定量RT-PCR分析了过氧化物酶基因(Rsprx)的表达谱,并通过RT-PCR克隆过氧化物酶基因的cDNA片段。结果表明,心里美萝卜花期不同器官中的POD活性具有明显的变化,地上部分和地下部分POD活性差异显著,在结荚期的木质部Ⅱ中达到峰值(17.53±0.35)×103U·g-1(FW)。不同器官中Rsprx的表达差异明显,花蕾和荚中表达最强。从花蕾和荚中得到4个长度为400bp左右的cDNA克隆片段,序列比对结果显示,与棉花的花器官过氧化物酶基因Ghpod具有较高的同源性和结构相似性。因此认为POD与萝卜花期生长发育有一定的关系,且有多种过氧化物酶基因在该过程中表达。 王林嵩 李小娟 李芳军 孙向东 王丽 宗秀征 杨少华 王一帆关键词:过氧化物酶 RT-PCR CDNA克隆 晚播对萝卜子一代苗期生理生化指标的影响 2009年 以"心里美"萝卜为材料,研究了晚播导致亲代营养生长期经低温短光照胁迫对子代种子萌发以及苗期抗氧化酶活性等的影响。结果表明,处理组萝卜种子发芽指数以及幼苗活力指数、鲜重和根长与同期对照组(CK2)相比没有显著性差异,处理组苗高显著高于亲代对照组(CK1和CK2);处理组子叶的POD活性和根部可溶性蛋白含量显著高于CK2;根和下胚轴的α-淀粉酶活性显著高于CK2;POD和α-淀粉酶同工酶谱带在处理组、CK1和CK2同一器官间差异不明显。由此推论,亲代营养生长期经低温短光照胁迫对萝卜子代种子活力以及苗期生长没有显著的远期影响。 杨少华 刘清兰 王丽 杨静 李芳军 宗秀征 孙向东 王一帆 王林嵩关键词:心里美萝卜 可溶性蛋白 远期影响 萝卜过氧化物酶基因RsPrx1在毕赤酵母中的表达及其抗性 被引量:3 2010年 从成熟心里美萝卜肉质根的皮中提取总RNA,采用RT-PCR方法获得过氧化物酶基因RsPrx1的cDNA,将其克隆到pGEM-T载体中,并构建毕赤酵母重组表达载体pPIC9KH-RsPrx1。用L iC l法转化野生型毕赤酵母GS115获得重组转化子。用不同浓度的NaC l和H2O2处理重组毕赤酵母转化子,结果表明该转化子具有一定的抗盐和抗氧化能力。建立了RsPrx1重组毕赤酵母表达体系,能够有效表达具有生物活性的外源过氧化物酶。 李芳军 王丽 王一帆 孙向东 杨静 何慧慧 程远 王林嵩关键词:萝卜 毕赤酵母 抗性 心里美萝卜营养生长期肉质根过氧化物酶同工酶谱及组化分析 被引量:6 2009年 过氧化物酶[peroxidase,POD,EC 1.11.1.7(X)]为一类多基因家族的同工酶,其聚合形式对其功能具有重要影响.心里美萝卜(Raphanus sativus var.L)肉质根富含花青素和POD等.本文采用不同的电泳技术、组化定位和活性测定研究了心里美萝卜营养生长期肉质根中POD在不同时期和不同组织中的表达、分布特点及同工酶的组成和性质.结果显示,心里美萝卜营养生长期肉质根的皮和肉中POD活性均先升高后降低,分别在播种后第40d和60 d出现峰值,30 d时皮中POD活性高于肉,之后则相反,酶活性最高时同工酶数目也最多,不同时期,皮和肉中同工酶种类不同;皮中POD同工酶由5个单体和4个二聚体组成,而肉中由5个二聚体或2个单体、2个二聚体和1个四聚体组成,均以酸性同工酶为主;组化定位显示POD主要分布在肉质根的周皮、形成层、木射线、木质部导管和肉的初生木质部等的细胞壁附近.从上述结果得出结论:酸性POD同工酶在植物体中以多种形式存在. 王丽 王林嵩 孙向东 李芳军 杜晶晶 王一帆关键词:心里美萝卜 过氧化物酶 同工酶 转萝卜过氧化物酶RsPrx1基因保护拟南芥氧化损伤 被引量:3 2010年 为了研究萝卜过氧化物酶RsPrx1的功能,本实验构建了RsPrx1的cDNA克隆和表达载体pBI121-RsPrx1.通过农杆菌用浸花法转染拟南芥,获得转基因植株.对转基因植株的研究表明,萝卜过氧化物酶RsPrx1可以抑制植物根和株高的生长,但不影响植物的成熟.当植物受到氧化应激时,RsPrx1可以保护植物免受氧化损伤.因此,萝卜过氧化物酶RsPrx1参与植物的生长发育但不起主要作用,并具有抗氧化作用. 王一帆 王丽 彭高松 杨少华 范莉 杨静 王林嵩关键词:萝卜 过氧化物酶 抗氧化性 拟南芥 转基因植株 玉米秸秆预处理优化实验条件研究 被引量:3 2010年 目的:探索一种高效预处理玉米秸秆的方法.方法:低浓度的湿热酸或碱在高压蒸汽(121℃,0.1 Pa)条件下,对玉米秸秆进行预处理.结果:从还原糖产量方面考虑,以1%硫酸按固液比1∶5处理玉米秸秆40 min为最宜.从木质素降解方面考虑,相同条件下氢氧化钠预处理,还原糖产量极低,但木质素含量降低明显,有利于进一步酶解作用. 王歌 王丽 王一帆 王林嵩关键词:玉米秸秆 预处理 尼克酸对酿酒酵母发酵生产燃料乙醇的影响 被引量:1 2010年 [目的]进一步优化燃料乙醇的生产条件。[方法]以玉米秸秆为原料,研究尼克酸对酿酒酵母发酵生产燃料乙醇工艺的影响。[结果]对于酿酒酵母发酵生产酒精,在发酵12h内,尼克酸对高压蒸汽下酸预处理后秸秆发酵产酒精量、还原糖的利用量有促进作用。[结论]尼克酸在一定条件下有利于燃料乙醇的生产。 王歌 王岚 王一帆 王丽 王林嵩关键词:玉米秸秆 尼克酸 萝卜过氧化物酶RNA干扰载体的构建及鉴定 被引量:6 2010年 萝卜过氧化物酶在植物的生长、发育和防御等多种生理生化过程中发挥着重要作用。利用RNA干扰技术(RNA interference RNAi)来研究酶功能已日渐成熟。本文根据植物hpRNA(hairpin RNA)的原理,以萝卜过氧化物酶基因rsprx1序列为靶目标,选择rsprx1的保守区作为构建RNAi序列,借助中间克隆载体,经过3次亚克隆,最后形成含rsprx1-RNAi表达盒的双元表达载体pART27-Y2,并转入农杆菌EHA105。 杨少华 王丽 王一帆 王林嵩关键词:萝卜 过氧化物酶