王其同
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 供职机构：中国热带农业科学院橡胶研究所更多>>
- 发文基金：国家天然橡胶产业技术体系建设专项中国热带农业科学院橡胶研究所基本科研业务费专项项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 橡胶树转录因子HbERF1的克隆与功能分析被引量：2
- 2014年
- 【目的】克隆橡胶树转录因子HbERF1,分析其在橡胶树中响应非生物胁迫的表达模式,并通过在拟南芥中过表达鉴定其生物学功能,为橡胶树抗逆育种提供基因储备。【方法】利用RACE技术从巴西橡胶树中克隆到HbERF1全长序列,通过qRT-PCR技术分析其在非生物胁迫下的时空表达特性;通过农杆菌介导法转化拟南芥,利用Southern杂交和qRT-PCR技术对过表达植株进行鉴定,并分析过表达植株在干旱、高盐和PEG等胁迫条件下的表型及相关基因的表达特性,验证HbERF1的生物学功能。【结果】橡胶树转录因子HbERF1没有内含子,GenBank登录号为JQ914647,cDNA序列全长为1 178 bp,包括62 bp的5'非编码区、474 bp的3'非编码区和642 bp的开放阅读框。开放阅读框编码一条213个氨基酸组成的多肽,该蛋白具有一个保守的AP2结构域和一个EAR基序。系统进化分析表明,HbERF1属于AP2/ERF家族中ERF亚族的B-1类,与蓖麻RcERF、杨树PtERF46、拟南芥AtERF4的一致性最高,分别为72%、62%和61%。qRT-PCR分析表明,HbERF1在橡胶树叶片和树皮中均能响应高盐、干旱和PEG胁迫,基因的表达在叶片中受ABA、MeJA的抑制,而在树皮中则受ABA、MeJA和SA的抑制。在高盐和PEG胁迫下,叶片中的HbERF1在处理前期(≤8 h)表达水平都低于对照,而树皮中的HbERF1在胁迫4 h时就受到强烈诱导。在干旱胁迫下,随着干旱程度的增加,HbERF1在叶片和树皮中表达水平持续增加,且在树皮中的表达要高于叶片中的表达。HbERF1的过表达提高了拟南芥的抗旱性、耐盐性和耐PEG胁迫的能力,并抑制了乙烯受体基因AtETR1和AtERS1的表达。在过表达植株中,AtETR1和AtERS1的表达水平分别比野生型中的降低了19倍和9倍,差异极显著(P<0.01)。在高盐胁迫下,过表达植株中AtRD22和AtRD29A的表达水平持续上升,且上调幅度高于WT,分别为对照的115倍和100倍;在20%PEG胁迫下,AtRD22和AtRD29A的表达都受到诱
- 安泽伟谢黎黎王其同李雅超程汉胡彦师黄华孙
- 关键词：巴西橡胶树转录因子非生物胁迫ERF
- 不同提取方法在橡胶树总RNA提取中的应用研究被引量：4
- 2012年
- 总RNA的纯度和完整性对橡胶树分子生物学实验至关重要。为探索更适合橡胶树总RNA的提取方法,本文以巴西橡胶树无性系热研7-33-97叶片为试材,利用凝胶电泳、紫外吸光值测定、RT-PCR检测等方法对CTAB-LiCl法和CTAB-NaAc法提取的总RNA进行比较。结果显示:CTAB-LiCl法提取RNA不仅耗时产率低,且RNA溶液中的Li+和Cl-影响反转录效率。CTAB-NaAc法提取叶片的总RNA经DNaseⅠ处理后凝胶电泳条带完整,产率高,无DNA污染;A260/A280比值为2.03,A260/A230比值为1.96;反转录的cDNA经PCR检测质量较好。另用CTAB-NaAc法对橡胶树的花、树皮、胚、根进行总RNA的提取,均能得到较高质量的总RNA。
- 孙芳安泽伟王其同李玉婷华玉伟黄华孙
- 关键词：橡胶树RNA提取
- 橡胶树低温相关ERF转录因子的克隆及功能研究
- 橡胶树抗寒品种选育是我国橡胶树育种的重要方向,但橡胶树育种周期长,加上早期预测手段不足,因此借助分子生物技术来挖掘橡胶树潜在的抗寒能力,就成为加快抗寒育种进程的重要手段。利用本实验室成功构建的低温诱导橡胶树全长cDNA文...
- 王其同
- 关键词：橡胶树抗寒非生物胁迫
- 文献传递
- 橡胶树总RNA和基因组DNA的同步分离
- 植物分子生物学研究需要制备高质量的核酸，针对不同植物的特点研究人员开发了相应的核酸提取方法。本研究在橡胶树核酸提取过程中引入PEG8000，通过适宜的PEG浓度(3％-3．4％)，实现了在同一提取过程中分别获得高质量的总...
- 王其同曾霞安泽伟孙芳李玉婷黄华孙
- 关键词：橡胶树聚乙二醇核酸基因组DNA分子生物学
- 文献传递
- 橡胶树抗寒种质遗传多样性分析被引量：5
- 2012年
- 应用RAPD和ISSR技术对20份橡胶树抗寒种质进行遗传多样性分析。结果表明,16个RAPD引物和12个ISSR引物分别扩增出条带113和101条,多态性条带指数(PPB)分别为61.1%和63.4%。据Nei-Li相似系数,ISSR标记在相似系数约0.74处,可将20份材料分为野生种质和栽培种质两大类;RAPD标记在相似系数约0.70处,也可将供试材料分为野生种质和栽培种质两类,但只有XJ002420为野生种质。对2种标记的分析结果进行相关分析,结果表明,RAPD和ISSR所检测的遗传相似系数呈极显著正相关,相关系数为0.672。以上结论表明,RAPD和ISSR标记可用于橡胶树种质资源的遗传多样性研究,但鉴于ISSR较RAPD有更强的多态性检出能力,ISSR技术应作为遗传多样性研究的首选单引物标记。
- 王其同安泽伟胡彦师方家林黄华孙
- 关键词：橡胶树ISSRRAPD
