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草酸钙尿石症患者肾组织γ-谷氨酰基羧化酶基因启动子序列分析及其活性研究: 2009年; 目的分析草酸钙尿石症患者肾组织γ-谷氨酰基羧化酶（GGCX）基因启动子序列多态性，并探讨该序列变化对启动子活性的影响。方法分别以42例草酸钙尿石症患者肾组织（尿石组）与31例非结石肾组织（肾肿瘤癌旁正常组织，对照组）基因组DNA为模板，PCR扩增GGCX基因5’-侧翼启动子区1329bp片段（-1270-＋58bp），电泳鉴定后，分别对两组PCR产物测序。筛选差异启动子序列克隆至萤光素酶报告基因载体pGL3-basic，转染293细胞，双萤光素酶检测启动子活性。结果与Ensembl正常序列比较，尿石组启动子片段测序共发现4处变异位点，-804bp处TT缺失（refsnp ID：rs11433794），-704bp处A→G、-511bp处A→G、-115bp处T→C。其中尿石组rsll43794SNP发生明显高于对照组（P〈0．05）。构建含rs11433794SNP位点的萤光素酶重组子pGL3-GGCX Promoter（804TT），与正常序列的重组子pGL3-GGCX Promoter比较，pGL3-GGCX Prorooter（804TT）转录活性明显下降（P〈0．01）。结论GGCX启动子区rs11433794SNP位点可能与草酸钙尿石症发生存在一定关系，该SNP位点可导致启动子转录活性下调，导致GGCX基因表达下降。; 杨俊刘继红王涛郭小林王军凯陈美元王少刚叶章群; 关键词：启动子萤光素酶

心理性勃起功能障碍的下丘脑PET研究被引量：2: 2008年; 目的:研究心理性勃起功能障碍(ED)患者下丘脑代谢的改变,以期为心理性ED可能存在的潜在病因和病理生理机制的探讨提供线索。方法:运用正电子发射断层成像(PET)研究6例心理性ED患者和4例年龄匹配的健康志愿者双侧下丘脑的葡萄糖代谢特点,给予视听性刺激,测定脑组织中18F脱氧葡萄糖(18F-FDG)放射强度,计算单位像素内左(右)丘脑计数/全脑总计数。结果:接受视听性刺激后,健康志愿者双侧下丘脑的18F-FDG代谢明显增高(左:1.026±0.115vs2.400±0.210;右:1.003±0.187vs2.389±0.196;P<0.05),而心理性ED患者双侧下丘脑的18F-FDG代谢变化不明显(左:2.781±0.156vs2.769±0.223;右:2.809±0.129vs2.793±0.217,P>0.05)。结论:心理性ED可能不单纯是功能性疾病,下丘脑可能参与了心理性ED的病理生理过程。; 王涛刘波吴志坚杨波刘继红王军凯王少刚杨为民叶章群; 关键词：勃起功能障碍下丘脑葡萄糖代谢正电子发射断层成像

人肾组织γ-谷氨酰基羧化酶基因启动子区克隆与活性分析被引量：1: 2008年; 目的克隆人肾组织γ-谷氨酰基羧化酶（GGCX）基因5’侧翼启动子区，并对其转录活性进行分析。方法对GGCX基因5’侧翼区进行生物信息学分析，预测其转录调控区域；从人肾组织中提取基因组DNA，以其为模板扩增GGCX基因启动子区，通过酶切鉴定及测序分析无误后，将其构建至萤光报告基因载体pGL3-basic中，瞬时转染至Hela细胞，检测萤光素酶水平，从而分析扩增启动子区的转录活性。结果成功克隆长度为804bp（-891～-88）的GGCX基因启动子片段，并构建相应的萤光素酶重组子pGL3-GGCX Promoter，转染Hela细胞48h后检测萤光素酶活性显示，pGL3-GGCX Promoter与空质粒对照pGL3-basic相对萤光素酶值分别为16．924-4、01与0．02±0．01，pGL3-GGCX Promoter萤光素酶活性显著增强（P〈0．05）。Matlnspector等分析显示该片段具有多个转录因子结合位点。结论成功构建含有GGCX基因启动子序列的萤光素酶报告系统，为进一步研究GGCX基因功能及其转录调控奠定了基础。; 杨俊刘继红郭小林王涛王军凯陈美元王少刚叶章群; 关键词：启动子生物信息学萤光素酶

阴囊肿块的诊治体会(附43例报道)被引量：2: 2007年; 目的：探讨阴囊肿块的病因和临床特点，提高其诊治水平。方法：对2005年1月～2006年12月手术治疗的43例阴囊肿块的临床资料进行回顾性分析。结果：43例阴囊肿块行单纯性肿块切除或附睾睾丸切除，经B超和（或）穿刺细胞学检查，术前诊断准确率达95．3％，1例附睾腺癌、1例附睾横纹肌肉瘤通过术后病理诊断。结论：可通过对阴囊肿块的超声定位、定性判断其良恶性，超声检查可作为阴囊肿块的首选诊断方法，术前穿刺细胞学检查可进一步提高诊断的准确性，指导正确的手术治疗，减少无必要的睾丸切除，提高患者的生活质量。; 王涛刘继红樊龙昌刘波杨俊王军凯王少刚叶章群; 关键词：阴囊肿块超声检查穿刺细胞学病理检查

草酸钙尿石症患者肾组织VKDC基因表达及其意义被引量：4: 2007年; 目的:探讨草酸钙尿石症患者肾组织中维生素K依赖性羧化酶(VKDC)基因mRNA表达水平及其与草酸钙尿石形成的关系。方法:以TaqMan实时荧光定量PCR法检测19例草酸钙尿石症肾组织(尿石组)与21例非尿石肾组织(对照组)标本中VKDC基因mRNA的表达,采用2-△△Ct法比较两组标本中VKDC基因mR-NA表达的差异。结果:尿石组与对照组荧光定量检测△Ct值分别为8.996±1.667与6.023±1.234(P<0.05),尿石组VKDCmRNA表达明显降低。结论:草酸钙尿石症患者肾组织中VKDC基因表达明显下降,其表达水平的变化可能与草酸钙结石形成有关。; 杨俊刘继红郭小林王涛王军凯樊龙昌王少刚叶章群; 关键词：草酸钙结石尿石症

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王军凯