王启明
- 作品数:7 被引量:16H指数:2
- 供职机构:华中科技大学同济医学院附属协和医院更多>>
- 发文基金:湖北省科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 核因子-κB反义核苷酸对大鼠移植角膜存活时间的影响被引量:2
- 2005年
- 目的研究核因子κB(NFκB)反义寡核苷酸对大鼠角膜移植排斥反应的影响。方法使用大鼠穿透角膜移植排斥反应动物模型,观察脂质体包裹的NFκB反义寡核苷酸对排斥反应指数(RI)及植片存活时间的影响,并测定受体鼠脾细胞混合淋巴细胞培养(MLC)和细胞毒T细胞(CTL)活性。结果反义寡核苷酸组角膜植片存活时间较对照组明显延长(P<0.01);MLC显示该组大鼠脾细胞对供体抗原刺激的增殖反应受到抑制(P<0.05),CTL活性明显减弱(P<0.05)。结论脂质体包裹的NFκB反义寡核苷酸能有效抑制受体鼠对移植物的排斥反应,使角膜植片存活时间延长。
- 赵巍胡燕华王启明徐惠民
- 关键词:核因子-ΚB寡核苷酸角膜移植免疫抑制
- 角膜移植后局部淋巴结内树突状细胞数量及趋化因子CCL19含量的变化被引量:1
- 2005年
- 目的研究角膜移植后局部淋巴结内树突状细胞数量及趋化因子CCL19含量的变化。方法应用免疫组织化学技术测定大鼠角膜移植后局部淋巴结内趋化因子CCL19含量及树突状细胞数量。结果自体移植组术后局部淋巴结内CCL19含量升高,持续至术后第3天(P<0.05),以后恢复至正常水平(P>0.05)。同种异体移植组,局部淋巴结内CCL19含量在术后1~3d与自体移植组差异无显著性(P>0.05),以后持续上升,至后期显著高于正常组及自体移植组,于第7天达高峰(P<0.05)。树突状细胞数量与CCL19变化趋势一致。结论角膜移植后局部淋巴结内CCL19表达增高,促进树突状细胞的迁移,这可能是同种异体移植排斥反应启动与进展的重要因素。
- 王启明胡燕华徐惠民赵巍
- 核因子-κB在大鼠角膜移植排斥反应中的表达被引量:1
- 2005年
- 目的了解核因子-κB(NF-κB)在大鼠同种异体角膜移植排斥反应中的表达,探讨其在角膜移植免疫排斥反应中的作用。方法在异体大鼠间建立角膜移植动物模型。免疫组化法检测移植后不同时间段NF-κB在角膜不同组织层次的表达;免疫印迹法检测移植后NF-κB蛋白在角膜中的表达。结果免疫组化显示:正常大鼠仅角膜上皮及内皮层表达NF-κB:异体移植组术后3d角膜上皮及基质层NF-κB表达增高,5~7d呈强阳性,后逐渐减弱。免疫印迹提示:正常大鼠角膜未见明显NF-κB蛋白表达;异体移植组术后1d即可检测出NF-κB表达,随时间推移其蛋白量逐渐增加,5~7d达高峰,10d后下降,14d接近正常水平。自体移植组7d所检测到NF-κB的表达较异体移植组明显减弱。结论NF-κB在角膜移植中的表达,可能与角膜移植免疫排斥反应有关。
- 赵巍胡燕华徐惠民王启明
- 关键词:角膜移植核因子-ΚB免疫排斥
- 大鼠穿透性角膜移植模型建立过程中的技术特征(英文)被引量:2
- 2005年
- 背景:大鼠角膜的主要组织相容性抗原的表达与人类角膜相似。早期实验证实大鼠作为穿透性角膜移植具有较好的重复性和可靠性,且移植手术难度比小鼠低。目的:建立大鼠穿透性角膜移植模型,分析模型制作中并发症出现的原因及相应对策,探讨提高大鼠角膜移植模型成功率的方法。设计:随机对照实验。单位:华中科技大学同济医学院协和医院眼科。材料:实验于2004-03/05在华中科技大学同济医学院协和医院眼科完成。选取远交系两月龄Wistar雌性大鼠76只,随机分为实验组和对照组,38只/组,无眼部疾病,清洁级,体质量180~200g,右眼作为受体;SD雌性大鼠38只,双眼作为供体。全部动物均由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供。方法:采用中心穿透性原位角膜移植术,均选择Wistar大鼠右眼建立模型。术前10min用美多丽滴眼两次,将右眼瞳孔充分扩大,达到4.0mm。按体质量3.0mL/kg水合氯醛腹腔注射全麻,体积分数0.1地卡因滴眼液术前5min点眼两次。大鼠头部常规消毒,保持鼠眼处于水平位置,保持大鼠呼吸道通畅。用有齿眼科镊夹持大鼠术眼后部,固定术眼使其处于半脱位状态。以3.5mm直径环钻钻取SD大鼠双眼角膜作为植片,内皮面向上放入培养皿中,用质量浓度20g/L甲基纤维素覆盖备用。以3.0mm直径环钻钻取Wistar大鼠右眼角膜作为植孔,立即将植片用10-0尼龙线间断缝合于Wistar大鼠右眼植孔,实验组角膜移植缝合8针,对照组角膜移植缝合6针。术后滴氧氟沙星眼药水,胶带粘贴术眼。观察角膜排斥反应,以混浊、水肿及新生血管3项指标进行评分,3项评分之和为当日排斥反应指数。当日排斥反应指数≥5或角膜浑浊达到3级时,视为排斥反应发生。运用χ2和Fisher确切概率法进行统计学检验。主要观察指标:①两组大鼠角膜移植后并发症发生比较。②角膜植片存活时间及角膜�
- 徐惠民胡燕华赵巍王启明
- 关键词:穿透性角膜移植SD雌性大鼠随机对照实验主要组织相容性抗原
- 高危角膜移植大鼠排斥反应及VEGF-C/D表达的研究被引量:8
- 2016年
- 目的:探讨鼠角膜碱烧伤后VEGF-C/D的表达和意义,以及新生淋巴管在高危角膜移植后排斥反应中的作用。方法:制作角膜碱烧伤模型,取不同时间段角膜进行电镜观察,观察角膜血管化情况;采用免疫组织化学方法检测l、3、5、7、14、28d角膜组织VEGF-C/D及VEGFR-3的表达;并在角膜中仅有血管(A组),同时存在新生血管及新生淋巴管(B组),新生淋巴管消退期(C组),角膜新生血管消退期(D组)以及正常组(N组)进行穿透性角膜移植,比较不同角膜植片的排斥反应指数(rejection index,RI)值及存活时间。结果:电镜观察发现,在碱烧伤后第7d时鼠角膜出现新生血管,未出现新生淋巴管,在碱烧伤2wk时出现新生血管的同时出现淋巴管,5wk时无明显的新生淋巴管,8wk时新生血管逐渐消退;大鼠角膜组织中VEGF-C/D及VEGFR-3的表达从第3d开始明显上升,并于第5d达到最高峰。角膜移植后N、A、B、C、D组的植片平均存活时间分别为14.25±0.62、9.35±1.02、5.06±1.13、8.71±0.83、9.44±1.05d。组间比较发现,B组植片平均存活时间显著性缩短(P<0.05),A、C、D的存活时间均显著性延长(P<0.05)。结论:角膜碱烧伤后存在VEGF-C/D及VEGFR-3的高表达,而且新生淋巴管能加速高危角膜移植后的免疫排斥反应。
- 王启明赵心悦王智
- 关键词:角膜移植淋巴管碱烧伤免疫排斥
- 未成熟树突状细胞诱导辅助型T细胞偏移抑制大鼠高危角膜移植排斥反应的研究被引量:1
- 2016年
- 目的探讨未成熟树突状细胞(immatuere dendritic cell,im DC)诱导辅助型T细胞偏移在大鼠高危角膜移植排斥反应的的抑制作用及其机制。方法本研究im DC来源于小骨骨髓,受体选择SD大鼠48只,供体选择Wistar大鼠30只,采取碱烧伤的方式建立同种异体高危角膜移植模型。随机将受体SD大鼠分为成熟树突状细胞(matuere dendritic cell,m DC)组、im DC组及对照组,每组均为16只。m DC组和im DC组:术前7 d将体外培养的供体骨髓来源的m DC或im DC经尾静脉注射,且细胞悬浮于0.1 m L的体外培养液中;对照组:术前7 d将0.1 m L体外培养液经尾静脉注射。术后每天对大鼠角膜植皮进行裂隙灯检查,对各组大鼠角膜植皮存活情况进行准确评估;分别于术后3 d、7 d、14 d每组各将入组的4只大鼠处死并取角膜植皮组织进行HE染色,对各组大鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞表面的Scurfin蛋白表达进行Western blot检测分析。结果 im DC组角膜植片存活时间为(18.67±2.46)d,均较m DC组(6.78±0.56)d、对照组(9.28±1.24)d明显延长,差异均有统计学意义(均为P<0.05);im DC组角膜新生血管评分为(4.54±1.02)分,低于m DC组(8.67±2.11)分、对照组(14.87±3.24)分,差异均有统计学意义(均为P<0.05);im DC组术后3 d、7 d、14 d Scurfin蛋白表达水平分别为2.16±0.74、2.35±0.83、2.28±0.76,均高于m DC组(1.42±0.17、1.56±0.42、1.48±0.12)及对照组(1.39±0.21、1.42±0.26、1.69±0.28),差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 im DC可抑制角膜移植免疫排斥反应发生,而诱导CD4+CD25+调节性T细胞的产生,进而促进免疫耐受的形成。
- 王启明赵心悦王智宋蔚
- 关键词:未成熟树突状细胞角膜移植
- CCL19在大鼠角膜移植中的作用研究被引量:1
- 2006年
- 目的研究角膜移植后局部淋巴结内趋化因子CCL19mRNA表达的变化及其对树突状细胞的趋化作用,探讨CCL19在角膜移植中的作用。方法建立大鼠正位值穿透角膜移植模型,RT-PCR法测定正常角膜0d及角膜移植后1d,3d,5d,7d,10d,14d的局部淋巴结内趋化因子CCLI9 mRNA的表达变化,应用Boyden小室进行不同时相淋巴结组织液对体外培养树突状细胞的趋化实验。结果一体移植组术后局部淋巴结内CCL19 mRNA的表达升高,持续至术后3d(P〈0.05),以后恢复至正常水平(P〉0.05)。同种异体移植组,局部淋巴结内CCL19 mRNA的表达术后1~3d与自休移植组差异无统计学意义(P〉0.05),以后持续上升至后期显著高于正常组及自体移植组,于7d达高峰(P〈0.01)。其对体外培养树突状细胞的趋化作用增强(P〈0.05),这种趋化作用可被CCLI9抗体所阻断(P〈0.01)。结论大鼠角膜移植后局部淋巴结内CCL19 mRNA表达增高,促进树突状细胞的迁移可能是同种异体移植排斥反应启动与进展的重要因素。
- 王启明胡燕华徐惠民赵巍
- 关键词:趋化因子树突状细胞自体移植同种异体移植