王昊
- 作品数：4 被引量：53H指数：4
- 供职机构：复旦大学生命科学学院生物多样性科学研究所更多>>
- 发文基金：上海市教育发展基金国家高技术研究发展计划上海市教育发展基金会“曙光计划”项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 基于5’锚定PCR法和磁珠富集法的西藏沙棘多态性SSR引物开发被引量：5
- 2014年
- 简单序列重复（SSR）是共显性遗传标记,可有效地反映个体遗传信息和亲缘关系,在杂交检测、物种鉴定及种群遗传学研究等方面应用广泛.作为重要的经济植物,西藏沙棘是青藏高原植物生态适应与进化研究的极佳材料,但目前还缺乏对其种质资源和遗传结构的了解.利用5’锚定PCR方法和磁珠富集法开发西藏沙棘的SSR引物.共得到13个种内多态性的SSR位点,分别有2~4个等位基因,观测杂合度（HO）从0.00到0.74不等,预期杂合度（HE）从0.04到0.54不等.两种方法所得到的引物可用于西藏沙棘的种质资源鉴定、遗传结构研究等多个方面.
- 许汀许璐王昊拉琼孙坤张文驹
- 关键词：西藏沙棘简单重复序列磁珠富集法
- 盐藻启动子活性片段的克隆及序列分析被引量：14
- 2002年
- 报道了以启动子探测质粒 pECE7为载体克隆盐藻 (Dunaliellasalina)中具有启动子活性DNA片段的研究 .经限制性内切酶EcoRⅠ分别消化盐藻基因组DNA和质粒pECE7,并进行体外重组及转化筛选 ,得到一具有启动子活性的DNA片段Ped .经进一步氯霉素抗性筛选 ,证明此启动子具有较高的活性 .测序结果显示Ped长 2 4 3bp .对其序列分析表明它具有启动子初级结构的基本特征 .Southern杂交显示此启动子片段确实来自于盐藻基因组 ,且其广泛存在于整个基因组中启动盐藻基因的表达 .经推测 ,Ped中含有多种转录因子结合位点的同源序列 。
- 张晓宁王昊陈火英沈大棱
- 关键词：克隆盐藻启动子
- NaCl诱导表达的盐藻果糖-1,6-二磷酸醛缩酶基因克隆及原核表达被引量：12
- 2002年
- 通过RACE技术克隆到盐藻(DunaliellasalinaTeod.)果糖 1,6 二磷酸醛缩酶(DsALDP)的全长cDNA.对其序列分析及在GeneBank中进行同源搜索,发现DsALDP基因属于果糖 1,6 二磷酸醛缩酶基因家族,其与植物叶绿体果糖 1,6 二磷酸醛缩酶(AldP)基因的一致性为73%～66%.Northern杂交结果及醛缩酶活性分析均表明它确为在盐诱导下特异表达.将DsALDPcDNA构建到pET32a载体上,转入E.coliBL21进行表达分析.IPTG诱导后可以检测到一62ku基因产物大量表达.经不同浓度NaCl处理,表达DsALDP基因产物的细菌耐盐性明显高于对照组.
- 张晓宁王昊曲志才陈火英叶鸣明沈大棱
- 关键词：NACL盐藻盐胁迫果糖-1,6-二磷酸醛缩酶耐盐机制
- 受NaCl诱导的盐藻果糖-1,6-二磷酸醛缩酶cDNA的克隆及其在烟草中的表达被引量：25
- 2002年
- 采用快速扩增 cDNA末端（RACE）技术,获得了盐藻（Dunaliella salina）受诱导表达的果糖-1,6-二磷酸醛缩酶全长CDNA（DsALDP）.蛋白质序列分析发现,DSALDP与许多植物叶绿体的果糖-1,6-二磷酸醛缩酶（AldP）具有较高的同源性（66％～73％）.系统进化分析进一步证明DsALDP与藻类的AldP亲缘关系最近.就表达谱而言,DsALDP是NaCl诱导下新表达的转录本,其表达水平随诱导时间的不同而呈显著变化.筛选的DsALDP cDNA构建到双元载体pBI121并导入农杆菌用以转化烟草,对4个T1代转基因植株进行Southern检测,证明DsALDP已整合入转基因植株的基因组.RT-PCR分析显示DsALDP在这些植株中均得到有效表达.生物测试表明,T1-1,T1-2和T1-3植株在100～200 mmol/L NaCl下仍保持醛缩酶活性,且其脯氨酸含量均有不同程度的升高.
- 张晓宁林长发王昊曲志才张宏伟姚剑虹沈大棱陈火英
- 关键词：盐藻土壤盐渍化绿藻门
