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王有利
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1
被引量:1
H指数:1
供职机构:
北京大学人民医院
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相关领域:
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合作作者
马军丽
首都医科大学公共卫生与家庭医学...
刘芬
首都医科大学公共卫生与家庭医学...
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首都医科大学公共卫生与家庭医学...
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首都医科大学公共卫生与家庭医学...
庄国庆
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马军丽
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中国生物工程...
年份
1篇
2008
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人SNAP25基因重组腺病毒的构建与表达
被引量:1
2008年
利用RT-PCR法,从人胰腺组织扩增出SNAP25基因,定向克隆至pENTR-TOPO载体获得重组质粒pENTR/D-TOPO-SNAP25。经PCR及测序验证其阅读框正确。再与腺病毒载体pAD/CMV/V5-DEST发生LR重组反应,SNAP25取代pAD/CMV/V5-DESTTM中的ccdB-CmR基因,获得重组腺病毒载体pAD/CMV/V5-DEST-SNAP25(pAD-SNAP25)。重组腺病毒载体经PacI酶切,脂质体法转染HEK-293A细胞.以鼠抗人SNAP25单克隆抗体为一抗,做荧光及Westernblot检测,结果表明重组腺病毒pAD-SNAP25在HEK-293A细胞中包装成功。重组腺病毒pAD-SNAP25感染大鼠胰岛,结果表明在高糖浓度下,外源性SNAP25蛋白的表达促进了大鼠胰岛素分泌。
庄国庆
王有利
马军丽
刘芬
王嵬
何燕
关键词:
腺病毒
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