王治
- 作品数：6 被引量：9H指数：2
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组人促红细胞生成素对小鼠胚胎干细胞向心肌细胞分化的影响被引量：4
- 2008年
- 目的初步观察外源性细胞因子重组人促红细胞生成素(rhEPO)对小鼠胚胎干细胞(ESC)向心肌细胞分化的影响。方法将rhEPO加到细胞培养基中配成终浓度分别为0.5、1.0、5.0U/ml的诱导分化液,分别在分化第8、12天观察ESC自发及在rhEPO诱导情况下心肌细胞分化率;在分化第7天应用RT-PCR检测自发分化组及rhEPO诱导组心肌早期转录因子GATA-4、Nkx2.5mRNA的相对表达。结果在分化第8、12天rhEPO诱导(1.0U/ml)心肌细胞分化率分别显著高于对应分化天数的自发心肌细胞分化率(0.11±0.02对0.05±0.01,P<0.05;0.86±0.02对0.65±0.05,P<0.05);与自发分化组比较,rhEPO干预(1.0U/ml)上调GATA-4、Nkx2.5mRNA的相对表达。结论外源性rhEPO早期干预能够促进ESC向心肌细胞分化。
- 王治戴秋艳刘少稳徐国彤吴亚兰孙宝贵
- 关键词：重组人促红细胞生成素小鼠胚胎干细胞心肌细胞
- 胚胎干细胞向心肌细胞诱导分化的研究进展被引量：2
- 2008年
- 胚胎干细胞具有多向分化潜能,在器官移植及组织修复治疗方面具有广阔的应用前景。近来研究表明,胚胎干细胞在相关基因、转录因子调控以及体内外细胞因子、激素、微环境等作用下能够诱导分化为心肌细胞。但临床应用胚胎干细胞进行心脏修复治疗还有许多问题需要研究和解决。
- 王治戴秋艳
- 关键词：胚胎干细胞心肌细胞诱导分化
- p α-MHC/EGFP小鼠胚胎干细胞株的构建及其向心肌细胞分化的观察
- 2008年
- 目的构建含有心肌特异性基因肌球蛋白重链α（α-MHC）调控的增强型绿色荧光蛋白（EGFP）表达的载体并转染到小鼠胚胎干细胞（ESC）,建立p α-MHC/EGFP小鼠ESC株,利用该细胞株可识别和纯化分化形成的心肌细胞。方法应用电穿孔技术将pα-MHC/EGFP载体转染到ESC,G418筛选10-12d后收集G418抗性细胞克隆并采用悬滴法体外诱导向心肌分化。通过PCR扩增细胞克隆基因组EGFP片段,并在心肌分化过程中通过荧光显微镜观察EGFP的表达,鉴定pα-MHC/EGFP胚胎干细胞株的建立。细胞免疫组化法检测自发性搏动拟胚体（EB）中EGFP阳性区域心肌肌钙蛋白T的表达。结果G418抗性细胞克隆基因组中能够扩增EGFP片段;在心肌细胞分化过程中,荧光显微镜下能观察到EB局部出现自发性搏动的亮绿色细胞团;细胞免疫组化检测显示,EGFP阳性区域肌钙蛋白T表达阳性。结论成功构建了pα-MHC/EGFP胚胎干细胞株,该细胞株在分化为心肌细胞的同时表达EGFP,便于对心肌细胞进行识别和纯化。
- 王治戴秋艳吴亚兰徐国彤李令杰孙宝贵
- 关键词：胚胎干细胞绿色荧光蛋白分化
- ICAM-1在急性心肌梗死后干细胞上调过程中的作用被引量：1
- 2009年
- 目的观察细胞间黏附分子-1(ICAM-1)在大鼠急性心肌梗死后外周血成体干细胞上调过程中的作用。方法16只SD大鼠开胸结扎左前降支(LAD)近端,制作急性心肌梗死模型,分为对照组(n=8)和实验组(n=8)。另取2只大鼠的心脏做正常心肌组织切片对照。实验组从尾静脉注入大鼠ICAM-1单克隆抗体,对照组未注射任何试剂。两组大鼠分别在术后1、3、7和14 d抽取尾静脉血。采用ELISA法检测血清中ICAM-1浓度变化,流式细胞仪检测外周血中CD34细胞阳性率,比较两组各时间点ICAM-1浓度和CD34细胞阳性率的变化。结果实验组外周血中ICAM-1浓度较对照组明显下降,第7天达到最低值(59.01±2.22)pg/mL;其中第7、14天时与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。实验组外周血中CD34细胞阳性率较对照组明显上升,第7天时达到最高值(12±2.11)%;其中第3、7、14天时与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论初步显示ICAM-1在大鼠急性心肌梗死后抑制了外周血成体干细胞的上调。
- 储光严轶文张治王治戴秋艳
- 关键词：ICAM-1干细胞冠心病心肌梗死
- 神经调节蛋白-1诱导小鼠胚胎干细胞向心肌细胞分化被引量：1
- 2009年
- 目的观察神经调节蛋白-1(NRG-1)诱导小鼠胚胎干细胞(ESCs)向心肌细胞分化及扩增心肌细胞的作用。方法分别观察ESCs自发及NRG-1诱导情况下心肌细胞分化率;RT-PCR检测心肌早期转录因子GATA-4、Nkx2.5mRNA及心肌骨架蛋白α-MHC、β-MHCmRNA的表达;细胞免疫组化检测心肌α-actinin蛋白表达;血管活性药物刺激观察心肌细胞的功能反应。结果NRG-1诱导的心肌细胞分化率显著高于自发的心肌细胞分化率(P<0.05),且诱导生成的心肌细胞对肾上腺素能及胆碱能药物刺激呈现相应的频率反应,刺激前后搏动频率差异均有统计学意义(P<0.05);NRG-1呈剂量依赖性上调GATA-4、Nkx2.5mRNA的表达,在NRG-1为100ng/mL时表达水平最高,且两者的相对表达量明显高于自发分化组的相对表达量(P<0.05或P<0.01);NRG-1干预增加心肌细胞骨架蛋白α-MHC、β-MHCmRNA水平且增强α-actinin蛋白表达(P<0.05)。结论外源性NRG-1早期干预能够诱导ESCs向心肌细胞分化并扩增ESCs分化形成的心肌细胞。
- 王治戴秋艳徐国彤吴亚兰管园崔璐孙宝贵
- 关键词：神经调节蛋白-1胚胎干细胞心肌细胞
- 生物起搏研究进展被引量：1
- 2007年
- 随着分子生物学的发展,心脏生物起搏成为近来研究热点,目前研究主要基于细胞生物起搏;基因生物起搏;基因工程干细胞起搏。生物起搏展示了良好的发展前景,但其应用于临床实践中还有很多问题需要研究和解决。
- 王治戴秋艳孙宝贵
- 关键词：生物起搏器
