王艳林
- 作品数：4 被引量：21H指数：2
- 供职机构：中国协和医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部科技专项基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 热休克蛋白90β参与热休克基因的表达调控被引量：2
- 1996年
- 热休克蛋白(heat shock protein,HSP)是一类进化上保守的蛋白质,它们以分子伴侣的形式在细胞内发挥其正常生理功能,并参与细胞应激保护和应答过程。人淋巴细胞中最主要的HSP是表观分子量70ku和90ku的HSP70和HSP90两组,其中HSP90又分为α和β两个拷贝。热休克蛋白基因(heat shock protein gene,hsp)的反式调节因子即热休克因子(heat shock factor,HSF)通过多聚化、磷酸化等活化过程参与HSP基因表达。与主要在应激诱导中大量表达的HSP70不同,HSP90是一类特异性分子伴侣,在生理条件下能与多种细胞内受体和信号传递途径中有关成分结合并调节它们的活性,因而其细胞内精密调节的机制具有重要的生理意义;但是,作为分子伴侣的HSP90是否参与其自身或对其他热休克基因的反馈调节迄今未见报道,本文对此进行了探讨。
- 王艳林沈珝琲沈珝琲梅树恩刘巨洪莫显明
- 关键词：热休克蛋白基因表达热休克基因蛋白质
- 淋巴细胞中热休克蛋白90基因表达双重调控机制的研究被引量：2
- 1995年
- 体外正常生长的Ｊｕｒｋａｔ细胞中有高ｈｓｐ９０α，ｈｓｐ９０β和低ｈｓｐ７０基础性表达。ＰＨＡ和ＴＰＡ刺激对ｈｓｐ９０α和ｈｓｐ９０β呈迟缓型表达诱导，对ｈｓｐ７０无此种影响。４２℃热休克４０ｍｉｎ对三种ｈｓｐ表现为快速转录活化，但ｈｓｐ７０表达水平的增加明显高于两种ｈｓｐ９０。以富含ＨＳＥ核心序列的ＤＮＡ为探针研究细胞内ＨＳＦ与顺式作用元件的结合活性，发现正常培养或ＰＨＡ、ＴＰＡ刺激的Ｊｕｒｋａｔ细胞中的ＨＳＦ无ＨＳＥ结合活性，与之相反，热休克时ＨＳＦ与ＨＳＥ结合活性明显增加。以上研究结果提示，Ｔ淋巴细胞内ｈｓｐ９０表达存在双重调控机制。
- 王艳林沈玙琲吴宁华
- 关键词：淋巴细胞热休克蛋白基因表达应激
- 人热休克因子原核表达及表达产物的研究
- 1996年
- 利用ＤＮＡ重组技术构建了人ｈｓｐ反式作用因子ＨＳＦ１和ＨＳＦ２的原核表达质粒ｐＥＴ－１１Ｂ／ＨＳＦ１和ｐＥＴ－１１Ｂ／ＨＳＦ２。经ＩＰＴＧ诱导，二者在ＢＬ２１（ＤＥ３）ｐＬｙｓＳ菌株中得到有效表达。利用ｈｓｐ９０β第一内含子ＨＳＥ和合成ＨＳＥ作为探针，对比分析两种表达产物与其特异性顺式作用元件间的结合能力，结果显示，原核表达的ＨＳＦ具有ＨＳＥ结合活性，ＨＳＦ１对ＨＳＥ的亲和力及结合在ＨＳＥ上的分子数明显高于ＨＳＦ２，这种差异可能是两种ＨＳＦ具有不同转录活化功能的分子基础。
- 王艳林刘巨洪莽锐程小款吴宁华
- 关键词：热休克因子基因表达
- 热休克基因mRNA定量RT-PCR检测方法的建立及其应用被引量：17
- 1999年
- 广泛存在于生物细胞中的热休克蛋白 (heatshockproteins,HSP)不仅在机体的应激保护、生长发育中起重要作用 ,而且与疾病的发生密切相关 .因此 ,建立准确检测细胞中HSP基因表达水平的RT PCR方法对基础及临床研究均具有重要意义 .首先应用DNA重组技术及体外转录体系制备了一种能用作测定hsp70 ,hsp90α及hsp90 βmRNA的复合内参照RNA ;然后 ,通过对反应条件的优化、选择 ,建立了一种特异检测 3种主要的人HSP基因mRNA水平的定量RT PCR体系 .应用此体系测定了hsp70 ,hsp90α及hsp90 β在Jurkat细胞中的组成性及热诱导表达规律 .
- 王艳林沈珝琲
- 关键词：热休克基因MRNA定量RT-PCR检测
