申志发
- 作品数:6 被引量:8H指数:2
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- 生产用Sf9细胞致裸鼠肿瘤性实验报告
- 2004年
- 许迪孔利佳熊美云申志发叶明霞朱大和
- 关键词:SF9细胞裸鼠肿瘤病理学
- 鸡贫血病毒VP3基因的克隆及在H22细胞中的凋亡诱导状况被引量:2
- 2003年
- 目的 :观察CAV、VP3基因在H2 2细胞中的凋亡诱导情况。方法 :用PCR方法扩增了鸡贫血病毒标准株的VP3基因 ,并将其克隆于真核表达载体pcDNA3上 ,构建含VP3基因的重组体 ;在体外 ,利用LipofectAMINETM 介导的基因转染法 ,将pcDNA VP3、pcDNA3分别转入小鼠腹水型肝癌细胞系H2 2中 ,RT PCR法检测VP3基因在细胞中的表达状况。同时利用流式细胞检测术验证VP3基因诱导死亡的方式。结果 :酶切鉴定及测序分析表明 ,插入片段和预期相符 ,阳性重组体被命名为pcDNA VP3;RT PCR结果表明 ,转染后 ,VP3基因在细胞中得到了表达 ;同时DNA直方图也证实鸡贫血病毒的VP3基因确以凋亡的方式诱导细胞死亡。
- 申志发王宇哲孙军宗义强屈伸
- 关键词:贫血病毒VP3基因基因克隆H22细胞肝癌
- 鸡贫血病毒vp3基因的克隆及其体外凋亡诱导效应的研究被引量:6
- 2001年
- 用 PCR方法扩增了鸡贫血病毒标准株的 vp3基因 ,并将其克隆于真核表达载体 pc DNA3上 ,构建了重组体pc DNA- vp3。经酶切鉴定及测序分析表明 ,该片段和预期相符。在体外利用 L ipofect AMINETM介导的基因转染 ,将 pc D-NA- vp3、 pc DNA3分别转入肝癌细胞系 Hep G2和二倍体肝细胞系 L- 0 2中 ,转染后的 RT- PCR结果证实 vp3基因在细胞中得到了表达。同时利用筛选稳定表达细胞株的技术和原位细胞凋亡检测法 ,证明了鸡贫血病毒是以凋亡的方式诱导细胞死亡 ,并且只诱导癌细胞的凋亡 ,而不诱导正常或二倍体细胞死亡。表明鸡贫血病毒
- 王宇哲申志发田俊宗义强屈伸
- 关键词:基因克隆细胞凋亡VP3基因体外凋亡
- Asor受体介导的鸡贫血病毒VP3基因靶向治疗肝癌的研究
- 申志发王宇哲高观月管斌钟德桥纪芳蒋琳李正陈海平
- 该研究首先构建了含CAV的功能性基因VP3及其部分调控序列的真核表达载体pcDNA-vp3。在此基础上,通过阳离子脂质转染试剂LipofectAMINETM介导的基因转移,在体外将pcDNA-vp3导入多种人源性或鼠源性...
- 关键词:
- 关键词:肝癌基因靶向治疗鸡贫血病毒
- 肝细胞靶向性Asor-PLL-DNA复合物的构建
- 2003年
- 目的:构建肝细胞靶向性Asor-PLL-DNA复合物。方法:将携带外源基因的质粒与脱唾液酸糖蛋白结合在一起,形成一种可溶性的蛋白-核酸复合物。结果:该复合物能通过脱唾液酸糖蛋白受体介导的内吞作用,以非病毒感染的方式,将外源基因导入肝细胞并得以表达。结论:和传统的重组病毒介导的基因转移方式相比,该复合物具有更高的靶向性、安全性,该系统的建立为以肝细胞为靶组织的外源基因介导的肝脏相关疾病的基因治疗提供实验基础。
- 申志发王宇哲宗义强屈伸
- 关键词:基因转移肝脏疾病基因治疗
- 一种独特的凋亡诱导因子—凋亡素被引量:1
- 2002年
- 凋亡素是鸡贫血病毒 (chickenanemiavirus,CAV)的一个功能性蛋白。近几年来 ,由于其独特的凋亡诱导效应而倍受人们重视。凋亡素是以P5 3非依赖性途径诱导凋亡的 ,并且不受凋亡抑制蛋白Bcl- 2的抑制 ,相反Bcl- 2的过表达对其凋亡效应还有促进作用 ;它能选择性地诱导肿瘤细胞或转化表型细胞的凋亡 ,而对正常的二倍体细胞无影响。
- 申志发屈伸
- 关键词:鸡贫血病毒凋亡素凋亡诱导因子凋亡效应基因治疗肿瘤治疗