白耀富
- 作品数：6 被引量：5H指数：1
- 供职机构：西北农林科技大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 猪卵巢源雌性生殖干细胞的分离培养及鉴定
- 在成年哺乳动物体内干细胞分布广泛，目前已经在多种组织器官中发现干细胞的身影。然而就雌性哺乳动物的卵巢而言，2004年以前，生物学的传统观点认为卵巢中不存在干细胞并且也不会发生卵泡库更新。但2004年后，Johnson经过...
- 白耀富
- 关键词：成体干细胞卵巢
- 文献传递
- 小鼠Dazl基因融合蛋白表达载体的构建及转染被引量：1
- 2013年
- 根据NCBI数据库上公布的小鼠Dazl基因的mRNA序列设计引物,以小鼠睾丸组织RNA为模板,RT-PCR扩增小鼠Dazl基因编码区片段,并将其克隆到增强型绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C1中,构建重组融合蛋白表达载体pEGFP-C1-Dazl,单双酶切和测序验证正确。将pEGFP-C1-Dazl质粒转染293和NIH-3T3细胞,荧光显微镜下观察到融合表达的绿色荧光蛋白,且呈胞质表达;对照组转染pEGFP-C1,绿色荧光遍布整个细胞。Dazl蛋白的免疫荧光试验也证明重组载体转染后,Dazl基因和GFP共同定位于胞质部分。pEGFP-C1-Dazl融合蛋白表达载体的成功构建为进一步研究生殖特异性基因Dazl在小鼠和大型动物的表达特性奠定了一定的基础。
- 王龙周莹胡玥于萌白耀富华进联
- 关键词：小鼠生殖细胞绿色荧光蛋白
- 一种雌性生殖干细胞的体外分离及培养方法
- 本发明公开了一种雌性生殖干细胞的体外分离及培养方法，从雌性哺乳动物的卵巢的生殖上皮得到细胞，雌性生殖干细胞的分离纯化方法采用0.2％明胶和Matrigel差速贴壁结合克隆法，将未贴壁的雌性生殖干细胞与贴壁培养的其他细胞区...
- 华进联胡玥白耀富
- 一种雌性生殖干细胞的体外分离及培养方法
- 本发明公开了一种雌性生殖干细胞的体外分离及培养方法，从雌性哺乳动物的卵巢的生殖上皮得到细胞，雌性生殖干细胞的分离纯化方法采用0.2％明胶和Matrigel差速贴壁结合克隆法，将未贴壁的雌性生殖干细胞与贴壁培养的其他细胞区...
- 华进联胡玥白耀富
- 文献传递
- Stella基因真核表达载体的构建及其对小鼠胚胎干细胞多能性的影响
- 2014年
- 构建Stella基因真核表达质粒,转染小鼠胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESC)并初步探讨Stella对减数分裂起始相关基因(Stra8)及胚胎干细胞多能性的影响。通过RT-PCR扩增目的基因,并连接至真核表达载体pEGFP-C1,利用重组质粒转染小鼠胚胎干细胞。对转染细胞进行荧光检测,确认Stella的表达,并利用免疫荧光及PCR检测转染细胞基因表达情况。酶切鉴定及测序分析表明成功构建含Stella基因的重组真核表达质粒,过表达Stella对ES细胞的增殖和形态学特征、进入减数分裂阶段的相关基因及其多能性基因的表达影响并不显著。故此得出结论:Stella在小鼠胚胎干细胞中能够正确表达,但对ES细胞的分化、Stra8基因的表达及其多能性基因的表达并无显著影响。
- 白耀富刘维帅华进联
- 关键词：胚胎干细胞减数分裂多能性
- Figla基因过表达促进小鼠胚胎干细胞向雌性生殖细胞分化被引量：3
- 2012年
- 生殖系a因子(Figla)是最早表达的生殖细胞特异性转录因子之一,对卵泡的发育、Zp基因的表达和透明带的形成具有调节作用.Figla基因异常会引起卵巢早衰的发生.本研究通过PCR自小鼠基因组中扩增出Figla基因,将其克隆到真核报告载体pDsRed1-N1,构建了携带609 bp的Figla重组载体pDsRed1-N1-Figla.用该载体转染小鼠胚胎干细胞(mESCs)系J1、小鼠成纤维细胞系NIH-3T3、小鼠畸胎瘤细胞P19和小鼠精原细胞系GC1,在荧光显微镜下观察红色荧光蛋白(RFP)在细胞中的表达,同时检测转染细胞中Figla基因及其它生殖细胞特异性基因的表达.结果显示,转染2 d,mESCs内Figla总表达量明显增加,且内源性表达量亦有所提高,即转入的外源性Figla基因可以促进内源性Figla的启动和表达.免疫荧光染色显示,表达RFP的细胞同时表达生殖特异性基因Vasa,减数分裂特异性基因Stra8、Scp3及卵母细胞标志基因Zp3.通过QRT-PCR检测发现,在转染3 d的细胞中,Vasa、Scp3和Zp1的表达较对照组均有明显上调,而Oct4和Stra8的表达量下降.研究表明,Figla基因对生殖特异性基因的表达具有调控作用,可以激活雌性生殖基因表达,为更清楚地了解Figla基因在生殖细胞生长发育过程中的调控机制,以及发现该基因在生殖细胞中的新功能奠定了基础.
- 胡玥褚志礼白耀富王龙王一然彭莎华进联
- 关键词：胚胎干细胞
