范锲
- 作品数：7 被引量：40H指数：2
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- 钒酸盐对地塞米松诱导大鼠骨髓间充质干细胞凋亡的抑制作用的研究
- 第一部分：大鼠骨髓间充质干细胞的培养和鉴定 目的:通过全骨髓贴壁法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)，为下一步实验提供稳定的、高纯度的干细胞。 方法:选取4-6周龄健康雄性SD大鼠，无菌条件下取出胫骨、股...
- 范锲
- 关键词：钒酸盐地塞米松骨髓间充质干细胞
- 文献传递
- 早期激素性股骨头缺血性坏死的蛋白质组学动态分析
- 赵劲民胡峰李晓峰梁博伟盘荣贵潘新元刘伟范锲
- 研究早期激素性股骨头缺血性坏死（SANFH）的蛋白质表达情况，并对关键差异蛋白进行功能验证，探讨早期激素性股骨头坏死的发病机制。方法:反复注射大剂量激素建立早期SANFH动物模型；应用双向凝胶电泳-飞行时间质谱技术创建S...
- 关键词：
- 关键词：股骨头缺血性坏死蛋白质组学骨髓间充质干细胞细胞增殖
- 大鼠成骨细胞的原代培养和鉴定被引量：27
- 2011年
- 背景:组织工程需要大量的种子细胞,成骨细胞已成为骨组织工程构建的重要种子细胞之一。但成骨细胞取材困难,获得的成骨细胞的纯度不一。目的:建立大鼠新生乳鼠颅骨来源成骨细胞的分离培养纯化方法,观察颅骨来源成骨细胞生物学特点。方法:采用二次酶消化法对SD大鼠乳鼠成骨细胞进行原代培养,扩增。通过差速贴壁法进行成骨细胞纯化。通过形态学、细胞碱性磷酸酶检测、茜素红染色、钙结节Vonkossa法染色、超微结构以及细胞增殖曲线,确定其增殖与成骨活性。结果与结论:二次酶消化法培养颅骨来源成骨细胞可获得原代细胞增殖,传代扩增细胞具有典型成骨细胞形态学和生物学活性。碱性磷酸酶、茜素红染色、钙结节Vonkossa法染色均呈阳性结果。超微结构显示为高分化功能活跃成骨细胞,细胞增殖曲线显示细胞生长活跃。提示,新生SD大鼠颅骨来源成骨细胞具有良好的增殖与成骨活性,能连续传代增殖,纯度高,细胞生物学特征稳定,适用于做体外实验研究。
- 李晓峰赵劲民苏伟范锲罗世兴马爱国
- 关键词：成骨细胞原代培养形态学
- 同种异基因成骨细胞对混合淋巴细胞反应体系中T细胞的免疫抑制被引量：2
- 2011年
- 背景:由同种异基因骨髓间充质干细胞诱导的成骨细胞移植免疫反应各家报道不一致,差别明显。目的:体外观察由骨髓间充质干细胞诱导而成的成骨细胞对T细胞的免疫调节作用及特点。方法:用Ficoll-Hypaque梯度密度离心法分离出兔骨髓单个核细胞,体外扩增,获取第3代细胞,经典化学方法诱导为成骨细胞,将其按照不同的比例加入到T细胞形成双向混合淋巴细胞培养体系中,在第3,5,7天,用MTT比色法检测各组混合淋巴细胞培养体系中的T细胞增殖情况,24h后用流式细胞仪分析各组T细胞亚群凋亡情况。结果与结论:诱导后成骨细胞混合淋巴细胞培养体系中,成骨细胞对T细胞的增殖有抑制作用,在一定范围内,抑制作用具有量效关系。诱导后成骨细胞剂量大,时间延长,抑制程度增强;3次平均抑制率相比:1:20组低于1:80组(P<0.01);1:40组低于1:80组(P<0.05);诱导后成骨细胞能引起T细胞亚群凋亡,其中CD4+(凋亡率8.57%)亚群不如CD8+(凋亡率15.31%)细胞亚群凋亡显著(P<0.01)。结果显示诱导的成骨细胞在体外能够通过细胞凋亡途径抑制T细胞的增殖,特别是CD8+。但这种抑制不是特别强,表明诱导的成骨细胞虽有一定的免疫性,但其免疫性较低。
- 盘荣贵范锲邓耀良赵劲民
- 关键词：混合淋巴细胞成骨细胞骨髓间充质干细胞
- 乙醇诱导大鼠骨髓间充质干细胞的凋亡机制被引量：1
- 2011年
- 背景:有研究表明乙醇可诱导骨髓间充质干细胞凋亡并引起成骨细胞和破骨细胞数量减少,但乙醇对骨髓间充质干细胞凋亡的影响以及作用机制目前尚不十分清楚。目的:观察乙醇对大鼠骨髓间充质干细胞凋亡、线粒体功能的影响及bcl-2、Caspase-3表达的变化。方法:应用全骨髓培养法分离培养SD大鼠骨髓间质干细胞,置于0,100,200,300,400,500,600,700,800,900mmol/L乙醇中作用24h,MTT法进行细胞毒性药物实验;置于0,100,200,300,400,500mmol/L乙醇中作用6,12,24h,AnnexinV/PI双标记法流式细胞仪检测细胞凋亡和线粒体膜电位变化情况;置于0,427mmol/L乙醇中作用24h,RT-PCR法检测与凋亡有关的基因bcl-2和Caspase-3mRNA表达水平。结果与结论:MTT检测结果显示427mmol/L是乙醇对大鼠骨髓间充质干细胞生长的半数抑制浓度;AnnexinV/PI检测结果表明,与0mmol/L组比较,随作用时间的延长与乙醇浓度的增加,骨髓间充质干细胞凋亡率及线粒体跨膜电位的破坏水平明显升高(P<0.05)。与0mmol/L组比较,乙醇作用24h后427mmol/L组bcl-2mRNA表达水平下降,Caspase-3mRNA表达水平增加(P<0.05)。说明乙醇能诱导大鼠骨髓间充质干细胞凋亡,凋亡的发生可能与线粒体膜电位破坏、线粒体功能障碍、bcl-2和Caspase-3激活有关。
- 马爱国赵劲民苏伟李晓峰范锲崔向荣
- 关键词：乙醇骨髓间充质干细胞凋亡线粒体膜电位RT-PCRCASPASE-3
- 地塞米松对大鼠骨髓间充质干细胞凋亡的影响被引量：9
- 2011年
- 背景：研究发现地塞米松能有选择性地促进骨髓间充质干细胞凋亡。目的：了解地塞米松对骨髓间充质干细胞凋亡的影响以及作用机制。方法：体外培养 SD 大鼠骨髓间充质干细胞,传至第 2 代后分两组培养,对照组不加地塞米松,实验组分别加入 10-9,10-8,10-7 mol/L 地塞米松,作用 3,6,12,24 h 后通过流式细胞仪检测凋亡率。MTT 法检测地塞米松对骨髓间充质干细胞增殖率的影响。取 10-7 mol/L 地塞米松作用骨髓间充质干细胞 24 h,反转录后检测 Caspase-3 和 bcl-2 的表达。结果与结论：与对照组比较,10-8,10-7 mol/L 地塞米松作用 12~24 h 对骨髓间充质干细胞的凋亡有明显促进作用,且与作用浓度和时间存在相关性,随着作用浓度的增大和时间的延长骨髓间充质干细胞的凋亡率有增高的趋势。MTT 结果表明10-8,10-7 mol/L 地塞米松作用 24 h 对骨髓间充质干细胞增殖率影响显著,这与上述流式细胞仪的检测结果相符。RT-PCR提示地塞米松作用组 Caspase-3 显著增高,bcl-2 降低。结果证实地塞米松可能是通过细胞外通路和（或）线粒体通路促进骨髓间充质干细胞凋亡。
- 范锲赵劲民苏伟李晓峰
- 关键词：地塞米松骨髓间充质干细胞凋亡CASPASE-3BCL-2
- 异硫氰酸盐促进阿霉素诱导人骨肉瘤细胞凋亡的实验研究
- 目的:本文旨在探讨异硫氰酸盐与阿霉素在体外联合作用人骨肉瘤细胞(U2-OS)后对细胞凋亡的影响，证明异硫氰酸盐能促进阿霉素诱导U2-OS细胞凋亡，并讨论其可能的作用机制，为骨肉瘤的临床治疗提供一定的参考。 方法:将冻存...
- 范锲
- 关键词：骨肉瘤异硫氰酸盐阿霉素细胞凋亡
