蔡丽娟
- 作品数：10 被引量：21H指数：3
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- 延边奶山羊耳成纤维细胞体外培养的研究
- 2013年
- 为了给延边奶山羊转基因核移植及乳腺生物反应器研究提供足够且状态良好的细胞,采取延边奶山羊耳部组织块,利用组织块贴壁法进行原代培养和传代培养,对于纯化了的成纤维细胞观察其生长状态,并对4代以后的成纤维进行生长曲线、核型分析,并对细胞进行冷冻复苏试验,检测细胞活力。结果表明,4～13代体外培养成纤维细胞的细胞形态及核型基本正常,13代以后,细胞染色体变异比例增加,15代以后,细胞生长速度减慢;冷冻复苏后的细胞除生长速度减慢外,其它细胞生物学特征均正常,基本符合体细胞克隆、转基因等试验的基本要求,可以用于试验研究。
- 蔡丽娟庄利利胡德宝李钟淑方南洙
- 关键词：体外培养
- 输卵管上皮细胞共培养促进小鼠早期胚胎发育机理的探索被引量：1
- 2013年
- 为研究输卵管上皮细胞对小鼠早期胚胎发育质量及胚胎对共培养细胞活力和基因转录量的影响,探索输卵管上皮细胞共培养促进小鼠早期胚胎发育的机理,建立纯化的小鼠输卵管上皮细胞系并对合子进行共培养,用DCHFDA测定胚胎内部的H2O2含量,以MTT法测定输卵管上皮细胞活力,用RT-PCR检测CAT及GPX的转录状况。结果表明:1)共培养能够提高2-细胞早期、4-细胞期胚胎发育率(0.951 3%VS 0.903 3%,0.857 6%VS0.700 5%,P<0.05)和囊胚发育率(0.537 9%VS 0.573 3%,P>0.05);2)2-细胞早期胚胎内部的H2O2含量显著降低(0.047 9VS 0.068 2,P<0.05);3)Ⅰ和Ⅱ型阻滞胚胎的比例降低(0.158 3%VS 0.192 6%,0.213 3%VS0.433 9%,P>0.05),Ⅲ型阻滞胚胎的比例提高(0.621 6%VS 0.373 3%,P<0.05);4)共培养细胞活性上升(0.216 7VS 0.195 7,P>0.05);5)CAT及GPX的转录量增加(1.202 0VS 0.984 9,1.310 1VS 0.998 3,P>0.05)。结果显示输卵管上皮细胞共培养通过增强自身的抗氧化能力,利用细胞-细胞间的相互作用降低胚胎细胞内部的活性氧,提高胚胎质量,促进胚胎发育。
- 庄利利胡德宝蔡丽娟张也李钟淑方南洙
- 关键词：输卵管上皮细胞共培养早期胚胎活性氧
- 延边奶山羊耳成纤维细胞转染人血清白蛋白基因转染条件的优化
- 本研究利用含有HSA和Neo基因的乳腺特异性表达载体pBC1-HSA转染延边奶山羊耳成纤维细胞，经G418筛选后获得转基因细胞，继续培养、传代后进行PCR鉴定，检验目的基因是否成功整合。由于不同细胞的脂质体转染的最佳条件...
- 蔡丽娟
- 关键词：人血清白蛋白成纤维细胞
- 文献传递
- 输卵管上皮细胞共培养对小鼠早期胚胎发育阻滞的影响被引量：2
- 2013年
- 研究输卵管上皮细胞共培养对小鼠早期胚胎发育的影响,探索输卵管上皮细胞共培养克服胚胎发育阻滞的机理。建立纯化的小鼠输卵管上皮细胞系,并与合子进行共培养,用DCHFDA测定胚胎内部的H2O2含量,以MTT法测定输卵管上皮细胞活力,用RT-PCR检测CAT及GPX的转录状况。输卵管上皮细胞共培养能够显著提高2-细胞早期、4-细胞期胚胎发育率(P<0.05),囊胚率也有所提高(P>0.05)。输卵管上皮细胞共培养能够显著降低2-细胞早期胚胎内部的H2O2含量(P<0.05)。小鼠阻滞胚胎中有H2O2蓄积,输卵管上皮细胞共培养能够降低Ⅰ和Ⅱ型阻滞胚胎的比例(P>0.05),显著地提高Ⅲ型阻滞胚胎的比例(P<0.05)。当胚胎发育到2-细胞早期时共培养细胞活力上升(P>0.05),抗氧化基因CAT及GPX转录量增加(P>0.05)。以上结果表明,输卵管上皮细胞共培养通过细胞-细胞间的相互作用降低胚胎细胞内部的活性氧,克服胚胎发育阻滞,促进胚胎发育,提高胚胎质量。
- 庄利利吴俊波胡德宝蔡丽娟张也李钟淑方南洙
- 关键词：输卵管上皮细胞共培养早期胚胎
- 哺乳动物胚胎的活性氧来源及其抗氧化机制被引量：10
- 2013年
- 活性氧(reactive oxygen species,ROS)与胚胎发育缺陷密切相关,胚胎或其培养的环境都有可能产生ROS,一些外源因子能够使胚胎的ROS产量增加,引起胚胎发育阻滞,这严重地限制了与胚胎相关的研究。胚胎存在着多种抗氧化机制,在实际操作中应结合胚胎发育各时期内部ROS的来源及其抗氧化机制,提高细胞内部抗氧化效率;控制培养条件,完善培养体系,降低外在因素对ROS的诱发作用,更高效地生产体外发育胚胎。
- 庄利利胡德宝蔡丽娟张也李钟淑方南洙
- 关键词：胚胎活性氧抗氧化机制
- 中药对延边黄牛耳成纤维细胞氧化修复的作用
- 引言延边黄牛是我国的珍贵家畜品种,延边黄牛体细胞克隆是在延边地区一项切实可行的研究,在延边黄牛的体细胞克隆中,氧化损伤是不可忽略的因素。现用的核供体细胞主要是延边黄牛耳成纤维细胞,在操作中细胞会不可避免的暴露在比体内氧浓...
- 庄利利徐礼杰张也王楠楠孙武胜胡德宝蔡丽娟方南洙
- 文献传递
- 抗凋亡因子cFLIP在延边黄牛性周期黄体中表达的研究被引量：4
- 2011年
- 为了研究延边黄牛黄体中抗凋亡因子(Cellular FLICE-like inhibitory protein:cFLIP)的变化情况及其与细胞凋亡的关系,本实验采用免疫染色方法,观察cFLIP在延边黄牛周期黄体中的表达变化,并从组织化学角度分析了cFLIP作为抗凋亡因子参与延边黄牛的黄体退化。
- 尹多方南洙李钟淑蔡丽娟金花子
- 关键词：延边黄牛细胞凋亡染色
- TSA对延边奶山羊耳成纤维细胞活力、形态及凋亡的影响
- 本试验的目的是探讨乙酰化抑制剂-TSA对延边奶山羊耳成纤维细胞活力、形态及凋亡的影响.添加0.05、0.01、0.05和0.10 μmol/L TSA处理延边奶山羊耳成纤维细胞24、48、72和96h后,应用MTT法检测...
- 张也蔡丽娟庄利利胡德宝李钟淑方南洙
- 关键词：TSA凋亡
- 5-aza-dc对延边奶山羊耳成纤维细胞生物学特性的影响
- 2013年
- 通过DNA甲基转移酶抑制剂5-aza-dc对延边奶山羊耳成纤维细胞进行不同处理后,利用MTT比色法选定5-aza-dc的最适作用浓度和时间,用Hochest33342/PI双染和琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡情况,通过核型分析检测5-aza-dc对细胞染色体的影响。结果表明,低浓度的5-aza-dc(≤0.010μmol/L)作用72 h对细胞影响不大;随其浓度的增加,细胞形态、活率、凋亡及染色体都受到显著影响。5-aza-dc对细胞的最佳处理时间为72 h,此时低浓度的5-aza-dc并未引起细胞凋亡和核型改变。
- 蔡丽娟尹多庄利利方南洙李钟淑
- 关键词：5-AZA-DC细胞形态细胞凋亡
- 共培养对小鼠胚胎内部活性氧含量影响被引量：3
- 2013年
- 文章旨在研究输卵管上皮细胞共培养对小鼠胚胎内部活性氧含量影响,探索共培养克服胚胎发育阻滞机理。用小鼠输卵管上皮细胞对合子进行共培养,DCFDA测定胚胎内部H2O2含量,以外源性H2O2对输卵管上皮细胞和胚胎进行阴性对照,用Hochest 33342和PI染色检测细胞凋亡情况,以MTT法测定输卵管上皮细胞活力。结果表明,共培养能显著提高2-细胞发育率、降低胚胎内部H2O2含量(P<0.05),提高4-细胞率及降低胚胎内部H2O2含量(P>0.05)。外源性H2O2能够使合子凋亡甚至死亡,导致共培养细胞活力下降(P<0.05),未能显著地促进胚胎发育(P>0.05)。结果表明共培养能够降低胚胎细胞内部活性氧,克服胚胎发育阻滞,促进胚胎发育。
- 庄利利胡德宝蔡丽娟张也李钟淑许相勋方南洙
- 关键词：共培养胚胎活性氧发育阻滞
