解伟
- 作品数：6 被引量：7H指数：2
- 供职机构：中国药科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金江苏省“青蓝工程”基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组人Dll4真核载体的构建及其在CHO细胞中的表达被引量：2
- 2015年
- PCR法扩增rh Dll4基因片段,用EcoR I和Not I双酶切后克隆到真核载体p CA中,并对其进行双酶切和测序鉴定;用电转法将真核载体导入CHO细胞中,并利用Western blot法检测rh Dll4在CHO细胞中的表达水平。经双酶切和测序验证,成功构建p CA-rh Dll4真核表达载体。Western bolt验证表明,rh Dll4基因在CHO细胞中正常表达。经镍柱亲和层析纯化后,rh Dll4蛋白纯度达95%以上。MTT法检测,rh Dll4可以有效地抑制HUVEC增殖;同时可以促进Notch1受体的切割,表明所表达的rh Dll4蛋白具有生物学功能,为本实验下一步抗rh Dll4单克隆抗体的筛选奠定了基础。
- 王泽根解伟许卓斌涂孝洁金海珍厉道娟吴旻张娟王旻
- 关键词：真核表达
- 抗VEGFR-2全人源IgG1样全长抗体的构建及表达
- 解伟张娟王旻
- 一种靶向VEGFR2的抗体融合蛋白的制备及其用途
- 本发明属基因工程抗体技术领域，具体涉及肿瘤血管内皮生长因子受体2(VEGFR2/KDR3)抗体和MICA的融合蛋白的制备方法及用途。本发明利用基因工程技术将VEGFR2的全长抗体与NK细胞的活化型受体(NKG2D)的配体...
- 张娟王旻王佑富解伟柳芳任学艳
- 文献传递
- 抗VEGFR-2全人源IgG1抗体的构建及其在CHO-k细胞中的表达被引量：1
- 2013年
- 本文在实验室构建的单链抗体-Fc融合抗体[scFv(AK404R)-Fc]的基础上构建抗VEGFR-2全人源IgG1样全长抗体(Mab-04)。利用重叠PCR,获得Mab-04的轻链和重链的核酸序列后分别克隆到真核表达载体pcDNA3.1,获得重组质粒。脂质体法将重组质粒转染至CHO-k细胞,经Protein A柱纯化细胞培养上清液获得目的蛋白,利用Western blotting检测目的蛋白,ELISA检测Mab-04与抗原亲和力。测序表明重组质粒构建成功,Western blotting检测显示目的蛋白成功表达(1μg·mL-1),ELISA检测阐明该抗体能与抗原结合并呈浓度依赖性(IC50为50 nmol·L-1),表明Mab-04成功表达并正确装配,为进一步大量制备该抗体及其活性研究打下基础。
- 李致科何远张娟解伟曹婉璐王泽根王旻
- 关键词：VEGFR-2抗肿瘤血管生成
- 重组人TNF-α在大肠杆菌中的表达、纯化及生物学活性研究被引量：4
- 2013年
- 构建有利于人肿瘤坏死因子α(TNF-α)大量表达及有效纯化的原核表达载体,并在大肠杆菌中诱导表达。通过密码子优化构建表达质粒pET28-TNF,并将其转化入大肠杆菌,对表达条件进行优化后进行大量表达并通过两轮镍柱亲和纯化获得高纯度重组人TNF-α(rhTNF-α)蛋白。应用Western blot和细胞测活分别检测重组人TNF-α蛋白的抗原性和细胞毒活性。成功构建了重组人TNF-α原核表达载体,并通过表达纯化获得了纯度>95%,具有生物活性(LD50<10 ng/mL)的rhTNF-α蛋白。
- 缪小牛陈卫张娟解伟王旻
- 关键词：人肿瘤坏死因子Α原核表达
- 一种靶向VEGFR2的抗体融合蛋白的制备及其用途
- 本发明属基因工程抗体技术领域，具体涉及肿瘤血管内皮生长因子受体2(VEGFR2/KDR3)抗体和MICA的融合蛋白的制备方法及用途。本发明利用基因工程技术将VEGFR2的全长抗体与NK细胞的活化型受体(NKG2D)的配体...
- 张娟王旻王佑富解伟柳芳任学艳
- 文献传递
