贝学军
- 作品数：10 被引量：34H指数：3
- 供职机构：西南大学园艺园林学院更多>>
- 发文基金：重庆市科技攻关计划国际科技合作与交流专项项目广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 应用抑制性差减杂交技术筛选锦橙CTV应答基因被引量：1
- 2013年
- 【目的】探讨易感柑橘衰退病病毒(Citrus tristeza virus,CTV)品种锦橙CTV应答分子机理,筛选和分析CTV应答基因。【方法】以嫁接CTV强毒株TRL514的锦橙阳性材料叶片为试验方(Tester),用嫁接无毒枝条的CTV阴性锦橙叶片为驱动方(Driver),构建CTV侵染的锦橙的正向差减文库。【结果】随机挑选850个阳性克隆测序,其中742条测序成功,去除载体片段和接头序列后得到有效EST 692条。将所有EST序列对应到柑橘的预测基因组转录物,共涉及137个柑橘基因。应用BLAST2GO对这些特异性表达的基因进行功能归类和KEGG分析。结果表明,受CTV侵染的影响,锦橙能量代谢相关基因上调明显,与光合器官碳固定、氮代谢、淀粉和蔗糖代谢等途径相关的EST出现频率较高。另外,与抗逆防御以及苯基丙氨酸合成、类苯基丙烷代谢、类胡萝卜素合成等与植物防御素类物质合成密切相关的代谢途径相关基因较多。【结论】由于CTV的侵染,CTV易感品种锦橙基础代谢改变明显,须通过增强能量代谢和提高自身防御能力来维持自身生长和发育。
- 程春振曾继吾贝学军吴波阳佳位张永艳姜波朱世平闫树堂钟云钟广炎
- 关键词：柑橘差异表达基因CTV
- 紫外线照射对梁平柚果皮基因表达的影响被引量：7
- 2011年
- 采用SSH技术以紫外照射的梁平柚[Citrus grandis(L.)Osbeck]果皮作为实验方(tester),以未被照射的正常果皮作为驱动方(driver),构建了一个梁平柚果皮紫外诱导基因的正向差减文库。经菌液PCR检测后随机挑取200个阳性克隆测序,获得168条表达序列标签(ESTs)。比对这168条ESTs,发现有分属于57个基因的114条ESTs与已知基因高度同源,54条ESTs同源性较低或没有同源性。功能分析发现,这些ESTs主要参与抗逆防御、生长发育、细胞凋亡、转录与翻译、细胞分化、信号传导、能量代谢、糖类及氨基酸代谢以及次生代谢等。
- 程春振朱世平吴波阳佳位贝学军马岩岩钟广炎
- 关键词：柑橘紫外辐射抑制性差减杂交
- 枳感染柑橘衰退病病毒后的应答基因分析被引量：3
- 2013年
- 枳(Poncirus trifoliata L.)高抗柑橘衰退病病毒(Citrus tristeza virus,CTV),但相关抗性机理仍不为人所知。以嫁接健康枝条的无毒枳作为对照,用Affymetrix柑橘基因芯片分析了感染CTV后枳叶片中基因的表达变化情况。结果共检测到表达量差异倍数≥2的基因295个,其中216个表达上调,79个表达下调。BLAST2GO分析发现,差异表达的基因中与抗逆反应相关的基因最多,乙烯、茉莉酸、赤霉素、脱落酸、生长素、水杨酸等植物激素代谢和调节相关基因为数不少,一些编码细胞壁形成或组分相关蛋白的基因差异表达明显。本研究可为揭示枳抗CTV的机理提供了转录组学线索。
- 程春振钟云吴波阳佳位贝学军姜波朱世平闫树堂张永艳曾继吾钟广炎
- qRealTime-PCR检测CsWIP1在柑橘不同组织中的表达被引量：1
- 2011年
- 通过实时荧光定量PCR(qRealTime-PCR)检测柑橘伤害诱导基因(CsWIP1)在乙烯胁迫和机械伤害过程中的表达情况.结果显示:CsWIP1仅在外源乙烯处理的叶片和果实离层(AZ-C)中表达,而在伤害、1-MCP+乙烯、1-MCP+伤害处理的叶片中均不表达,由此可见CsWIP1仅受到乙烯信号传导途径调控.
- 杨雪莲闫树堂贝学军刘斌魏召新
- 浅谈柑橘基因组芯片分析方法
- 2012年
- 指出了cDNA芯片和寡核苷酸芯片是目前用于柑橘基因表达谱分析的方法,基因组芯片数据分析主要包括数据预处理,筛选差异基因,差异基因再进一步分析。通过数据分析及整合样点的生物学信息,研究了植物生理变化。
- 杨雪莲贝学军朱友娟
- 关键词：基因表达聚类分析
- 柑桔钙离子结合蛋白基因克隆及植物表达载体构建
- 2012年
- 以伏令夏橙叶片中分离的总RNA为模板,经RT-PCR扩增到一条约600bp、含钙离子结合蛋白基因(CsCaBP)的片段,将此片段克隆到pMD-19T中,经测序分析该片段与甜橙基因组中的对应序列完全吻合。设计2对带有限制性内切酶位点的特异性引物,以cDNA为模板扩增到2个CsCaBP片段,并连接到TA克隆载体pMD-19T上;经双酶切消化后,分别以正反2个方向插入到植物表达载体pFGC5941的查耳酮合成酶(CHSA)内含子两侧,构建成功CsCaBP的RNA干扰载体,但未获得转基因植株。将CsCaBP的正向片段定向克隆到具有CaMV35S启动子的pF-GC5941表达质粒上,构建成功CsCaBP过量表达载体。将构建好的表达载体导入根癌农杆菌LBA4404菌株,转化酸橙下胚轴,经PCR检测,获得9株过量表达转基因植株,荧光定量PCR验证发现目的基因在转基因植株中有不同程度的表达。
- 贝学军钟广炎
- 关键词：柑桔基因克隆
- 植物激素在植物抗病过程中的作用研究进展被引量：17
- 2011年
- 植物激素调控多种植物生理代谢过程,在植物生命活动中不可或缺。综述了植物激素在植物抗病中的作用最新研究进展。
- 王志卫贝学军朱世平马岩岩杨润婷
- 关键词：植物激素植物抗病
- 柑橘CsERF1基因RNAi载体的构建及转化被引量：1
- 2011年
- 用RT–PCR克隆柑橘的CsERF1基因cDNA序列,并连接到TA克隆载体pMD–19T上;经限制性内切酶2次双酶切,CsERF1基因的正、反向片段被分别插入到双元质粒pFGC5941查耳酮合成酶A(CHSA)内含子的两端,构成反向重复序列;经菌液PCR和测序验证,成功构建了CsERF1基因的RNA干涉载体;通过农杆菌介导法转化柑橘,已获得部分抗性芽。
- 张凌云贝学军钟广炎
- 关键词：柑橘RNAI载体
- 应用SSH技术鉴定枳抗CTV相关基因被引量：1
- 2013年
- 应用SSH技术构建了CTV诱导的枳的正向和反向cDNA文库,经菌液PCR检测,从两个文库中分别随机挑选了100个阳性克隆测序,共获得169条表达序列标签(ESTs).用每条EST序列对应的克里曼丁基因组预测转录序列进行GO功能注释,去除在两个文库中均有出现的ESTs后,共得到与已知基因具有较高相似度,涉及39个特异性表达基因的EST 83条,并对4个特异性表达基因进行了实时定量PCR验证.结果表明:CTV侵染之后,枳启动了相关抗逆防御机制来减少伤害,木质素代谢、RNA干扰、赤霉素、生长素以及光敏色素调控可能在抗CTV中发挥了一定作用.
- 程春振贝学军阳佳位吴波朱世平张永艳钟云曾继吾
- 关键词：柑桔衰退病表达序列标签
- 乙烯诱导下柑橘果实离层SSH文库的构建及分析被引量：3
- 2011年
- 为发掘柑橘果实脱落过程中的关键基因,构建了受乙烯诱导的柑橘果实离层SSH文库,经蓝、白斑筛选,菌液PCR检测和测序验证,共获得385条有效EST.经聚类拼接得到单基因簇30个,其中片段重叠群28个、单一EST序列2个.经BLASTX比对NCBI的非冗余蛋白数据库,在这些ESTs中,28个找到同源序列,2个无匹配;BLAST2GO功能注释表明:这些单一基因主要涉及衰老、抗逆防御、细胞壁水解、信号转导等功能.
- 张凌云程春掁贝学军
- 关键词：乙烯柑橘抑制性差减杂交
