郑东
- 作品数：13 被引量：167H指数：3
- 供职机构：江苏大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目江苏省卫生厅面上基金更多>>
- 相关领域：医药卫生政治法律更多>>
- 类风湿关节炎患者外周血高迁移率族蛋白1RORγ／t和白细胞介素-17表达水平的检测及临床意义被引量：3
- 2010年
- 目的检测类风湿关节炎（RA）患者外周血高迁移率族蛋白1（HMGB1）及Th17细胞特异性转录因子、相关细胞因子的表达水平，同时分析其与C反应蛋白（CRP）、红细胞沉降率（ESR）和类风湿因子（RF）的关系，初步探讨RA患者HMGB1的表达水平及其与Th17的关系。方法收集80例RA患者外周血标本，其中静止期32例、活动期48例，健康志愿者50名。采用实时荧光定量聚合酶链反应（QRT—PCR）检测外周血单个核细胞（PBMC）中HMGB1、RORγt和白细胞介素（IL）-17的mRNA水平；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血浆HMGB1、IL-17、IL-23的蛋白浓度，采用单因素方差分析和Spearillan相关分析进行统计学处理。结果RA患者PBMC中HMGB1、RORγt和IL一17mRNA的表达水平均高于健康对照组（P〈0．05），且活动期[HMGB1（0．424±0．262）pg／ml，RORγt（0．34±0．25）pg／ml，IL-17（1．42±0．38）pg／ml]明显高于静止期（R0．01）。血浆HMGB1、IL-23和IL-17蛋白水平也显示类似的结果，RA组明显高于健康对照组（P〈0．05），且与CRP、ESR、RF呈正相关（P〈0．05）。结论检测RA患者外周血HMGB1和Th17细胞特异性转录因子及相关细胞因子水平，有助于探讨HMGB1和IL-17在RA发病过程中的病理生理作用，也为寻找RA的治疗靶点提供了新的思路。
- 石燕王胜军陈建国薛渊何志强周成林郑东杨恒李雅贞仝佳苏兆亮邵启祥许化溪
- 关键词：白细胞介素17
- 科技成果转化中高校的权利义务探析——以中美相关法律比较为视角被引量：1
- 2021年
- 第四次《专利法》第6条通过设置专利权利再分配的条款完善了我国科技成果权属制度。虽然我国高校对科技成果享有所有权、自主转化权和收益权,但是基于中美相关法律的比较后发现我国高校的义务规定仍不甚明确,不能体现权利义务一致性的要求。高校科技成果转化中权利义务规范的完善可从以下两方面着手。第一,增设意思自治的权益再分配程序可以更好地契合第四次《专利法》第6条和第15条规定的职务发明制度;第二,完善义务规范,包括明确科技成果转化的义务主体,充实报告义务的内容以及增设未履行收益分配义务的责任。
- 郑东宋东林
- 关键词：科技成果转化权利义务高校
- Toll样受体8在人宫颈癌细胞株HeLa中的表达及其激动剂对HeLa细胞增殖和凋亡的影响被引量：3
- 2011年
- 目的观察Toll样受体8（TLR8）在人宫颈癌细胞株HeLa中的表达，探讨TLR8激动剂CL075对HeLa细胞增殖和凋亡的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）法，检测13种肿瘤细胞系中TLR8mRNA和经CL075作用后HeLa细胞中环氧化酶2（COX-2）、Bcl-2和血管内皮生长因子（VEGF）mRNA的表达水平；采用免疫荧光技术对HeLa细胞中TLR8蛋白的表达进行定位观察；采用流式细胞术检测不同浓度CL075作用下HeLa细胞的细胞周期和凋亡的变化；采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测HeLa细胞的增殖状态。结果与其他肿瘤细胞株相比，HeLa细胞中TLR8mRNA的表达水平最高，达703．7±20．6。TLR8蛋白主要定位于HeLa细胞的胞浆中。0．1、0．5和1．0μg／ml的CL075分别作用于HeLa细胞48h后，G2／M＋s期细胞所占的比例逐渐增高，其中1．0μg／mlCL075作用组G2／M＋S期细胞所占的比例最高，达（57．67±1．73）％，明显高于空白对照组[（39．02±2．33）％，P〈0．01]。经不同浓度的CL075处理后，HeLa细胞的凋亡水平与空白对照组相比，无明显改变（P〉0．05）；但经顺铂处理后，凋亡细胞明显增多（P〈0．01）。MTT法检测结果显示，与空白对照组比较，CL075作用于HeLa细胞48和72h后，HeLa细胞的增殖能力明显增强（P〈0．01）。CIA）75作用于宫颈癌HeLa细胞24和48h后，COX-2、Bcl-2和VEGF mRNA的表达水平明显升高（P〈0．05）。结论宫颈癌HeLa细胞中TLR8的表达水平及其与配体相互作用的信号，可能是肿瘤发生和发展的重要因素之一。TLR8可能是宫颈癌治疗的一个潜在靶点。
- 杨恒何志强赵银霞王楷文郑东苏兆亮仝佳马洁王胜军许化溪
- 关键词：宫颈肿瘤HELA细胞细胞增殖细胞凋亡
- 小鼠GITR真核表达载体的构建及表达
- 2011年
- 目的:构建小鼠GITR(mGITR)的真核表达载体,转染COS-7细胞表达小鼠GITR蛋白。方法:用TRIzol试剂抽提小鼠脾细胞总RNA,经RT-PCR扩增出GITR全长基因,构建真核重组载体pIRES2-EGFP-mGITR,经鉴定后采用脂质体介导DNA法转染COS-7细胞。结果:从小鼠脾细胞中成功扩增得到GITR全长基因。重组载体pIRES2-EGFP-mGITR转染COS-7细胞后,经荧光显微镜观察可见绿色荧光,提取蛋白后经蛋白质印迹鉴定有目的蛋白mGITR。结论:成功构建了小鼠GITR基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-mGITR,转染COS-7细胞后mGITR蛋白获得成功表达。
- 沈培郑东刘艳田洁赵银霞刘青玲朱晨露马洁苏兆亮马斌许化溪王胜军
- 关键词：真核表达转染COS-7细胞
- 肠道病毒71型多表位-mGITRL真核表达质粒的构建、表达及其免疫原性研究被引量：1
- 2012年
- 目的:构建肠道病毒71型(EV71)多表位-mGITRL真核表达质粒并对其免疫原性进行研究。方法:串联已证实的VP1表位并合成(VP1’);PCR扩增获得mGITRL,克隆至真核共表达载体pIRES中。对重组质粒进行测序鉴定后,以脂质体介导法转染至COS7细胞,通过Western blot方法检测其在COS7细胞中的表达。将构建好的重组质粒免疫小鼠,应用ELISA法检测小鼠血清中抗VP1的抗体滴度。结果:PCR扩增出目的基因,测序证实真核共表达载体pIRES-VP1’-mGITRL构建成功,Western blot结果显示目的基因在COS7细胞和肌细胞中过表达。小鼠血清中检测出高滴度的抗VP1抗体。结论:成功扩增出目的基因并构建VP1表位的重组真核共表达载体pIRES-VP1’-mGITRL,在COS7细胞和肌细胞中过表达,并获得高滴度的抗VP1抗体。
- 毛镇伟刘海冰郑东彭辉勇王瑞苏兆亮陈建国
- 关键词：EV71VP1表位
- 多药耐药肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶基因及膜孔蛋白基因研究被引量：33
- 2010年
- 目的探讨多耐药肺炎克雷伯菌(MDR-KPN)β-内酰胺酶基因存在状况及其膜孔蛋白编码基因ompK36在其耐药中的作用。方法应用PCR检测20种β-内酰胺酶基因及膜孔蛋白编码基因ompK36,并用MEGA4.1对ompK36进行分子进化分析。结果 15株MDR-KPN共检出TEM、SHV、CTX-M-1群、LAP、KPC、DHA等6种β-内酰胺酶基因,阳性率分别为66.7%、60.0%、6.7%、13.3%、13.3%、20.0%;而膜孔蛋白编码基因ompK36均检测到,经测序比对均存在突变。结论 15株MDR-KPN耐β-内酰胺类药物至少与产β-内酰胺酶和同时伴有膜孔蛋白ompK36突变相关。
- 苏兆亮糜祖煌孙光明陈建国郑东刘嫣方Sandoghchian Siamak许化溪
- 关键词：多药耐药肺炎克雷伯菌Β-内酰胺酶
- 多药耐药鲍氏不动杆菌耐药性与转座子及插入序列遗传标记研究被引量：113
- 2010年
- 目的探讨多耐药鲍氏不动杆菌耐药性与转座子、插入序列等遗传原件之间的关系。方法 K-B法进行药物敏感试验,PCR进行转座子、插入序列遗传标记检测,并测序。结果临床分离的鲍氏不动杆菌对12种常见抗菌药物耐药率分别为头孢噻肟78.9%、头孢他啶63.1%、头孢吡肟78.9%、头孢西丁100.0%、亚胺培南73.7%、美罗培南73.7%、氨苄西林/舒巴坦78.9%、阿莫西林/克拉维酸78.9%、阿米卡星52.6%、庆大霉素57.8%、环丙沙星78.9%、四环素78.9%;转座子tnp513和插入序列遗传标记ISaba1、IS26检出率分别为47.4%、78.9%、47.4%。结论多药耐药鲍氏不动杆菌的耐药性与转座子和插入序列遗传标记有一定的关系。
- 苏兆亮糜祖煌孙光明陈建国郑东刘嫣方Sandoghchian Siamak许化溪
- 关键词：转座子
- T-bet对肺癌细胞系(Lewis细胞)致瘤作用的体内干预研究
- 2011年
- 目的:探讨T-bet质粒局部应用对小鼠肺癌细胞皮下移植瘤的干预作用。方法:将传代培养的Lewis肺癌细胞接种于小鼠右肩部皮下,制备荷瘤小鼠模型;瘤内分别注射PIRES-eGFP/mT-bet(m指小鼠)、PIRES-eGFP质粒和PBS,观察各组小鼠存活时间,肿瘤体积的变化;HE染色观察肿瘤组织的病理变化;Western blot检测肿瘤组织T-bet的表达,QRT-PCR检测肿瘤组织T-bet和IFN-γ的mRNA水平。结果:瘤内注射T-bet质粒载体后Western blot检测发现,肿瘤组织T-bet蛋白表达显著高于对照组;QRT-PCR结果显示,肿瘤组织T-bet和IFN-γ的mRNA水平呈上升趋势,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。T-bet质粒干预组小鼠肿瘤生长明显缓慢,存活期延长。HE染色组织病理观察可见mT-bet干预组小鼠局部组织淋巴细胞大量浸润。结论:T-bet基因局部注射可延缓小鼠肺癌Lewis皮下移植瘤的生长,提高机体的抗肿瘤免疫应答能力,增强对已发肿瘤的生长限制作用,为T-bet应用于肿瘤治疗积累试验数据。
- 赵银霞王楷文杨恒郑东苏兆亮仝佳王胜军许化溪
- 关键词：肺癌细胞系质粒小鼠
- Ⅱ型胶原诱导的小鼠关节炎模型IL-25表达水平的变化及意义被引量：9
- 2010年
- 目的以Ⅱ型胶原诱导的DBA/1小鼠关节炎模型为研究对象,动态观察其IL-25的表达水平,探讨IL-25与关节炎发生发展的关系及其可能的机制,为寻找新的类风湿性关节炎免疫干预新途径积累实验数据。方法采用RT-PCR法扩增目的基因,构建mIL-25标准质粒,QRT-PCR检测模型鼠脾脏及其关节病变局部IL-25的表达水平;应用ELISA技术检测模型鼠血清和脾细胞培养上清IL-25蛋白的含量。结果在Ⅱ型胶原诱导的小鼠关节炎的发病过程中,模型鼠脾细胞和关节滑膜组织IL-25的mRNA表达水平、均呈持续上升趋势,与对照小鼠相比差异显著(P<0.05)。这种IL-25蛋白和转录水平的表达,随着关节炎症程度的增加而升高。此外,模型鼠脾细胞对ConA的刺激表现出强IL-25表达性应答。结论 IL-25的表达水平与Ⅱ型胶原诱导的关节炎的发生发展密切相关。
- 王楷文周成林王胜军赵银霞杨恒郑东薛渊Sandoghchian Siamak仝佳苏兆亮邵启祥许化溪
- 关键词：IL-25自身免疫性疾病
- EV71多表位-mGITRL真核表达质粒的构建、表达及其免疫原性研究
- 目的:构建肠道病毒EV71多表位-m GIT RL真核表达质粒并对其免疫原性进行研究。方法:串联已证实的VP1表位并合成(VP1’);PCR扩增获得m GIT RL,克隆至真核共表达载体p I RES中。对重组质粒进行测...
- 刘海冰毛镇伟郑东彭辉勇王瑞苏兆亮陈建国
- 关键词：EV71VP1表位
