郑继军 作品数:23 被引量:64 H指数:5 供职机构: 第三军医大学大坪医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 自动化与计算机技术 更多>>
Tec在Integrinβ1介导的原发性肝癌细胞粘附信号转导过程中作用的初步研究 背景和目的:原发性肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,发病隐匿,早期发生浸润和转移,手术切除率低,手术切除后复发率高,放疗和化疗敏感性低,肝移植、免疫和介入治疗效果均不理想。分子靶向治疗是目前原发性肝癌治疗研究的热点和希望之... 郑继军关键词:原发性肝癌 整合素Β1 TEC 粘附 文献传递 RAI16基因真核表达载体的构建及在HepG2中的表达 被引量:2 2009年 目的构建人视黄酸诱导蛋白16(retinoic acid induced 16,RAI16)与增强型绿色荧光蛋白(enhanced greenfluorescent protein,EGFP)的融合基因真核表达载体pEGFP-C1-RAI16,使RAI16-EGFP融合蛋白在人肝癌细胞株HepG2中得到表达。方法采用PCR技术,从含有目的基因的质粒克隆模板中钓取并扩增出RAI16全长编码基因,构建RAI16与EGFP的融合基因真核表达载体pEGFP-C1-RAI16,用脂质体转染技术将pEGFP-C1-RAI16导入HepG2,激光共聚焦分析RAI16亚细胞定位及Western blot检测RAI16-EGFP融合蛋白的表达。结果经转化细菌、抽提质粒、酶切鉴定和DNA序列分析证实,RAI16基因已正确插入pEGFP-C1中EGFP基因的下游,获得融合基因表达载体pEGFP-C1-RAI16。将pEGFP-C1-RAI16导入HepG2细胞24 h后,激光共聚焦分析显示RAI16-EGFP融合蛋白主要表达于细胞质内。Western blot结果显示,转染pEGFP-C1-RAI16 24、48 h和72 h后,RAI16基因在蛋白水平的表达逐渐增高,而AFP的表达逐渐下调。结论成功构建了真核表达载体pEGFP-C1-RAI16,并在HepG2细胞中进行了表达。 雒喜忠 王阁 郑继军 陈川 张志敏 李琼 许文 胡庆 王东 李增鹏关键词:融合蛋白 增强型绿色荧光蛋白 HEPG2细胞 视黄酸诱导蛋白16蛋白质结构功能分析 被引量:7 2007年 目的:分析Tec激酶区作用蛋白视黄酸诱导蛋白16(RAI16)的蛋白质结构和功能信息.方法:利用相应的计算机软件及数据库,对RAI16 cDNA序列进行分析和比较,并对编码的蛋白质氨基酸序列及其二级结构进行分析和预测.结果:RAI16 cDNA序列由2863个核苷酸组成,编码759氨基酸蛋白质,RAI16蛋白包括一段由31个氨基酸组成的信号肽,没有跨膜区,亚细胞定位于内质网上,有多种二级结构形式,为一紧密包裹的球状蛋白质,是一种分泌蛋白,有多个磷酸化和蛋白酶切位点.RAI16蛋白为不稳定蛋白,不稳定系数为53.11.疏水性GRAVY(grand average of hydropathicity)值为-0.136.结论:RAI16蛋白作为一种新的胞内信号蛋白,很可能在肝癌细胞的诱导分化信号转导转录中与Tec协同发挥重要作用. 王阁 邓婧 杨进 郑继军 王红中 胡庆 张志敏 陈川 王东 李增鹏关键词:核苷酸 蛋白质结构 原发性肝癌不同病理组织类型中肝干细胞的起源分析 被引量:18 2006年 目的观察原发性肝癌不同病理组织类型中肝干细胞的活化、分布、来源和免疫表达特征。方法应用HE染色、免疫组化S-P方法观察94例肝细胞癌(HCC)和12例肝内胆管细胞癌(ICC)和10例混合型肝癌的肝干细胞情况,用5例肝硬化和4例正常肝组织为对照。结果在原发性肝癌不同病理组织类型中干细胞免疫标志均有不同程度的表达,均可观察到肝干细胞向肝癌细胞的转化,以混合型肝细胞癌中肝干细胞免疫表型表达率最高(P<0·05)。结论不同病理组织类型的肝癌组织中均存在不同分化状态和不同来源的肝干细胞,可能由于肝干细胞(hepaticstemcell,HSC)分化不全或分化异常所致。 王阁 索金友 邓婧 杨进 郑继军 王红中 胡庆 李增鹏 肖华亮 王东关键词:原发性肝癌 肝干细胞 癌发生 免疫组织化学 miRNA-122a靶基因预测及生物信息学分析 被引量:6 2011年 目的:利用基因芯片技术分析肝癌HepG2细胞和正常肝上皮LO2细胞中miRNA的表达,并对HepG2细胞中低表达的miRNA-122a进行靶基因预测及相关生物信息学分析,为以miRNA-122a为靶点的基因治疗提供理论和实验基础。方法:利用基因芯片技术检测HepG2细胞和LO2细胞中miRNA-122a表达水平,通过生物信息学预测miRNA-122a的靶基因,并对其靶基因进行功能富集分析(GO-analysis)、信号转导通路富集分析(Pathway-analysis)和蛋白质相互作用网络分析。结果:与LO2细胞比较,miRNA-122a在HepG2细胞中呈低表达。miRNA-122a预测靶基因有1104个,其靶基因集合功能分别富集于碳水化合物生物合成、核苷酸代谢、细胞因子受体结合、细胞周期等生物学过程(P<0.001);信号转导通路显著富集于JAK-STAT信号通路、Wnt信号通路、MAPK信号通路、ErbB信号通路、细胞周期等信号转导通路(P<0.001)。结论:miRNA-122a在HepG2细胞中呈现低表达,miRNA-122a预测靶基因集合显著富集在与肿瘤发生相关的信号通路中。 蒋永容 陈川 张志敏 郑继军 许文 罗美林 戴楠 李梦侠 杨宇馨 李增鹏 王东 王阁关键词:基因芯片 靶基因 生物信息学 血红蛋白浓度对Ⅱ期鼻咽癌女性患者调强放疗疗效分析 目的:探讨血红蛋白浓度(HBC)对Ⅱ期鼻咽癌(NPC)女性患者调强放射治疗3年总生存率(Os)的影响。方法:回顾性分析我院放疗中心2005年2月至2007年1月经病理确诊的147例Ⅱ期鼻咽癌女性患者接受根治性调强(IMR... 李显敏 郑继军 胡庆 金小莉 左莉 王阁单纯调强放疗对比调强放疗同步EGFR单抗治疗老年鼻咽癌的疗效观察 任育江 何轩 马俊刚 宋扬 刘云 郑继军 杨镇洲 王阁右心房滑膜肉瘤1例 被引量:1 2011年 1临床资料
患者男性,41岁,活动后胸闷、气促1月余入院。缘于2009年11月底无明显诱因出现胸闷气紧伴进食梗阻,以进食固体食物明显,不伴畏寒发热、头晕头痛、咳嗽咯痰、腹痛、腹泻、黑便等不适,未引起重视。此后上述症状逐渐加重,遂于2009年12月24日我院胸外科就诊,查心脏彩超示:右心房侧壁巨大占位,右房明显受压。 任育江 王阁 郑继军 杨镇洲关键词:右心房 滑膜肉瘤 Tec激酶区作用蛋白RAI16的原核表达和纯化 2008年 目的:利用原核表达系统构建Tec激酶区作用蛋白RAI16的融合蛋白表达载体,并进行表达条件的优化和初步纯化.方法:设计基因拼接引物,合成RAI16cDNA序列,将其连接于克隆载体pMD18-T中;将酶切、纯化的RAI16基因与pGEX4T-2载体相连接、转化、筛选.将鉴定阳性的重组子质粒转人大肠杆菌BL-21表达菌中,采用SDS-PAGE电泳分析不同浓度诱导剂异丙基硫代-D-半乳糖苷(IPTG)、不同诱导温度、不同诱导时间下目的蛋白的表达.结果:成功构建RAI16蛋白原核表达载体.采用0.4mmol/LIPTG、30℃诱导4h,获得较高表达目的蛋白.融合蛋白主要以包涵体形式表达,将包涵体进行尿素法变性复性和亲和层析柱处理后,获得可溶的高纯度GST-多肽融合蛋白.结论:Tec激酶区作用蛋白RAI16融合蛋白表达的载体和纯化,是制备RAI16多抗以及进一步验证与Tec体外结合作用实验的基础. 许文 王阁 邓婧 杨进 郑继军 王红中 胡庆 王东 李增鹏 杨志祥关键词:核苷酸 蛋白质结构 整合素β1亚家族与肝癌粘附转移的相关研究进展 被引量:7 2005年 整合素家族是一类由一个α亚单位和一个β亚单位通过非共价键连接而成的异二聚体跨膜糖蛋白。整合素β1亚家族是整合素家族中最重要的一类。在正常肝脏中某些不表达或低表达的整合素β1亚家族,在肝癌中高表达,从而介导细胞与细胞外基质(ECM)的粘附,接受并传导级联信号以调节肝癌细胞存活、凋亡、粘附运动等,在肝癌的粘附、转移中起着重要作用。 郑继军 王阁关键词:肝癌