郝丽
- 作品数：21 被引量：71H指数：3
- 供职机构：东北林业大学更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金黑龙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学更多>>
- 梅花鹿鹿茸尖端组织Tβ-4基因全长cDNA的分离与生物信息学分析
- 2017年
- 胸腺素β4(Thymosinβ4,Tβ-4)是真核生物细胞中的一种具有多重生物学功能的肌动蛋白螯合分子。本研究首次从梅花鹿鹿茸尖端组织全长cDNA文库中成功克隆了Tβ-4基因的全长cDNA序列,并结合生物信息学方法对该基因的氨基酸序列进行了分析。结果表明,梅花鹿Tβ-4基因cDNA全长为770 bp,编码44个氨基酸,相对分子质量为5 052.65 u,理论等电点为5.02,其一级结构中赖氨酸和谷氨酸残基所占比例最高,二级结构元件主要以α-螺旋和无规则卷曲为主。结构分析发现,Tβ-4蛋白氨基酸序列含有"Thymosin family"结构域,没有N端信号肽,没有跨膜区。同源序列分析表明,梅花鹿与白颊长臂猿、人、牛的亲缘关系较近,氨基酸同源性高于85%。Tβ-4在鹿茸尖端组织全长cDNA文库中高丰度表达,提示它可能在鹿茸生长发育中起到重要调节作用。
- 黄皓郝丽肖向红刘畅李和平柴龙会张晶钰
- 关键词：鹿茸胸腺素Β4CDNA文库
- 东北梅花鹿鹿茸尖端组织全长cDNA文库的构建
- 为克隆出与鹿茸生长发育相关基因的全长序列,采用SMART技术构建了东北梅花鹿鹿茸尖端组织的全长cDNA文库.用SV Total RNA Isolation System试剂盒提取总RNA,以逆转录酶PowerScript...
- 郝丽李和平严历
- 关键词：东北梅花鹿鹿茸全长CDNA文库SMART技术
- miR-155与CEBPB的靶向验证及繁殖性能相关基因的检测
- 2023年
- CEBPB具有调节黄体生成促进排卵的作用,对动物繁殖性能极为重要,试验旨在通过构建CEBPB的3′端非翻译区(3′UTR)双荧光素酶报告基因载体,验证MicroRNA-155(miR-155)调控CEBPB的分子机制。应用在线生物信息学软件预测miR-155与CEBPB基因3′UTR的靶向结合区,PCR扩增获取民猪组织基因组的CEBPB的3′UTR,将其插入psi-Check-2载体,构建野生型(wt-3′UTR)和突变型重组表达载体(mut-3′UTR),鉴定正确后,分别与miR-155模拟物(mimics)/抑制物(inhibitor)/阴性对照物(NC)共转染到PK15细胞,检测荧光素酶活性及CEBPB表达情况。结果表明:成功构建了CEBPB的3′UTR野生型和突变型表达载体,双荧光素酶报告基因检测显示wt-3′UTR/miR-155 mimics组的萤火虫荧光素酶活性受到显著抑制(p<0.05);而mut-3′UTR/miR-155 inhibitor组的萤火虫荧光素酶相对活性与对照组相比变化不显著(p>0.05)。实时荧光定量结果显示,miR-155 mimics组CEBPB、BMP1和PPARG表达水平显著低于miR-155 NC组(p<0.05),而miR-155 inhibitor组CEBPB表达水平高于miR-155 NC组(p<0.05)。综上表明,miR-155可以靶向负调控CEBPB的表达。
- 李军义刘娣马红汪亮霍秀鹏郝丽
- 关键词：繁殖性能MIR-155
- 梅花鹿鹿茸生长顶端组织CaM基因全长cDNA的克隆及表达分析
- 郝丽李和平
- 关键词：鹿茸
- 一株H9N9亚型禽流感病毒的全基因组测序与遗传进化分析被引量：1
- 2021年
- 为了了解从广西地区有流感症状的病鸡中分离出的低致病性禽流感病毒(LPAIV)CK/GX/C283/2013(H9N9)的生物学特性,试验对该毒株进行了病毒的纯化、PCR扩增和测序,以及关键氨基酸位点和全基因组的遗传进化分析。结果表明:CK/GX/C283/2013(H9N9)毒株的外部基因HA、NA和内部基因PB2、PB1、PA、NP、M和NS基因长度分别为1 683,1 398,2 280,2 274,2 151,1 497,982,844 bp。CK/GX/C283/2013(H9N9)毒株与H7N9及H9N2亚型AIV的核苷酸序列有较高同源性,为98.99%~99.88%;内部基因与H5N1、H5N6、H10N6和H10N8等亚型AIV核苷酸序列同源性也较高,为97.66%~99.64%。CK/GX/C283/2013(H9N9)毒株的HA蛋白裂解位点基序为330PSRSSR↓GL340,与LPAIV氨基酸序列特征符合;HA蛋白氨基酸的第226位点由Q突变为L,使其与人源α2,6受体的结合能力增强;M2蛋白氨基酸的第31位点发生了突变,由S突变为N。CK/GX/C283/2013(H9N9)毒株的外部基因HA位于Y280-Like分支上,NA基因与A/Nanjing/6/2013(H7N9)毒株的遗传距离较近,属于Group 3分组。CK/GX/C283/2013(H9N9)毒株的内部基因PB2、PB1、PA、NP、NS和M分别与A/Chicken/Zhejiang/DTID-ZJU01/2013(H7N9)、A/Chicken/Wuxi/0405005/2013(H7N9)、A/Chicken/Zhejiang/C483/2013(H7N9)、A/Pigeon/Jiangsu/K23/2013(H9N2)、A/Zhejiang/DTID-ZJU01/2013(H7N9)和A/Shanghai/4664T/2013(H7N9)毒株的遗传距离最近。说明CK/GX/C283/2013(H9N9)毒株是H7N9亚型和H9N2亚型的重组毒株,H9N9亚型AIV内部基因来源十分复杂,与H10N8、H5N6、H5N1、H7N9、H10N6和H9N2亚型AIV间都可能存在基因重组现象。
- 杨岑李玉磊李明慧刘丽娜郝丽王亚君李雁冰
- 关键词：禽流感病毒H9N2亚型遗传进化
- 鹿茸尖端组织的EST分析及其生长相关功能基因的表达
- 鹿茸是哺乳动物中惟一失去后还能完全再生的器官,其惊人的生长速率也是哺乳动物任何组织和器官所无法比拟的。推测鹿茸的生长有它特殊的物质基础,存在自身的规律。多年来,许多学者从各种角度、采用各种科学手段对这一特殊的、绝无仅有的...
- 郝丽
- 关键词：鹿茸基因文库表达序列标签
- 鹿茸尖端组织核心蛋白多糖基因全长cDNA的克隆及其表达分析被引量：2
- 2011年
- 为了进一步了解鹿源DCN基因的结构与功能,揭示该基因在鹿茸尖端不同组织层的表达规律,本研究从梅花鹿鹿茸尖端组织cDNA文库中首次克隆具有完整编码区的DCN基因全长cDNA序列,并结合生物信息学方法和实时荧光定量RT-PCR技术对该基因的氨基酸序列结构和表达特征进行分析。结果表明,梅花鹿DCN基因cDNA全长为1 831bp,编码360个氨基酸;其编码蛋白具有N端信号肽,相对分子质量为39.9ku,理论等电点为8.8,其一级结构中亮氨酸所占比例最高(12.5%);梅花鹿与绵羊DCN氨基酸序列的相似性最高(98%)。实时荧光定量RT-PCR分析表明,DCN在间充质层的表达显著高于其他3层组织,提示DCN的抗纤维化活性可能是维持鹿茸间充质层快速生长的重要调节因素。
- 郝丽
- 关键词：鹿茸核心蛋白多糖CDNA文库克隆实时荧光定量RT-PCR
- 中草药对水霉病病原菌的抑制效果及作用机制的研究进展
- 2022年
- 水霉病是一种常见的鱼类疾病,给水产养殖业造成了巨大的经济损失。中草药具有来源广、成本低、安全环保、不易产生耐药性等特点,近年来,应用其防治水霉病成为研究热点。笔者阐明了水霉病病原菌的致病机制,归纳整理了38科、60种有效抑制水霉病病原菌中草药的抑菌效果、提取方法、有效成分和安全性,并分析了中草药对水霉病病原菌的作用机制。结果表明:黄连、前胡、羌活、川楝子、大黄、苦参、丁香、凤尾蕨、使君子和油茶饼等对水霉病病原菌的抑菌效果显著;丙酮超声波法和水煎法是主要的提取方法;抑菌有效成分多为酚类和酮类;中草药对鱼类的有害影响小,安全性较高;提高鱼体的抗病能力和破坏水霉病病原菌菌体是中草药对水霉病病原菌的作用机制。
- 马箐阳谷若曦曹雨菲黄璞祎郝丽
- 关键词：水霉病中草药鱼类抑菌效果
- “互联网+”时代关于新形态教材建设与应用的思考被引量：42
- 2017年
- "互联网+"时代,传统纸质教材与数字化教学资源融合形成的新形态教材,将成为教材建设的一种新趋势。作者结合实践应用,探讨了新形态教材建设与应用过程中的注意事项:重视教材纸质部分的编写,充分融合精品资源共享课、MOOC等在线开放课程已有数字化教学资源,重视读者对数字化教学资源建设的意见,开发支持多种智能终端的APP,优化数字资源内容。考虑到数字资源在不同终端运行的兼容性和优化应用模式,提出应建设一支稳定的制作团队。
- 柴龙会肖向红张晶钰张立娜郝丽
- 关键词：数字化教材教材建设
- 东北梅花鹿鹿茸尖端组织全长cDNA文库的构建被引量：7
- 2009年
- 为克隆出与鹿茸生长发育相关基因的全长序列,采用SMART技术构建了东北梅花鹿鹿茸尖端组织的全长cDNA文库。用SVTotal RNAIsolation System试剂盒提取总RNA,以逆转录酶PowerScriptTM反转录合成第一链cDNA,然后通过LD-PCR合成并扩增ds cDNA。扩增产物经纯化、SfiⅠ酶切、过CHROMASPIN-400柱去除小片段后,连接到SfiⅠ消化过的pDNR-LIB质粒载体中,最后用电转化法将重组质粒转化到E.coliDH5α内得到原始文库。经测定,构建的原始文库约含有2.56×106个重组子,插入片段多在0.5～2 kb之间,平均插入片段长度约1.1 kb,重组效率接近100%。结果表明,东北梅花鹿鹿茸尖端组织的全长cDNA文库已构建成功。
- 郝丽李和平严厉
- 关键词：东北梅花鹿鹿茸全长CDNA文库SMART技术
