阮杰
- 作品数：25 被引量：50H指数：4
- 供职机构：广东医学院医学检验学院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 以Ad-Easy载体系统快速构建PTEN重组腺病毒表达载体被引量：6
- 2007年
- 目的目的应用Ad-Easy腺病毒载体系统构建携带抑癌基因PTEN的重组腺病毒表达载体。方法用插入有抑癌基因PTEN和绿色荧光蛋白的穿梭载体pAdTrack-CMV转化已经含有腺病毒骨架载体pAdEasy1的E.coliBJ5183(Ad-1cells)进行同源重组,获得重组腺病毒质粒,经PacⅠ线性化后,转染293细胞。结果得到重组腺病毒,转染重组腺病毒DNA的293细胞出现细胞病变,经PCR对传代的Ad-PTEN分析证实得到目的基因,荧光显微镜能观察到293细胞内有绿色荧光。结论腺病毒Ad-Easy系统是一种较为简便、快速的构建重组腺病毒的好方法,且生成的病毒滴度高、转导效率好,为进一步研究PTEN基因应用于癌症基因治疗提供实验基础。
- 熊亮谢富华赵树勇阮杰马华谋林观平周克元
- 关键词：重组腺病毒PTEN基因治疗
- 《临床输血学检验》教学实践与体会被引量：3
- 2013年
- 《临床输血学检验》是一门多学科交叉性学科,而临床输血科已拥有多项专业技术,能为临床解决相关难题。因此,培养具有丰富输血医学知识和较高技术水平的人才具有重要意义。全面加强输血医学教育,提高临床输血学检验教学效果和质量,培养学生分析问题、解决问题和独立工作的能力是培养应用型和创新性输血医学人才的重要举措[1-5]。
- 阮杰马丽刘新光曾涛陈亚芹
- 关键词：教学实践问题情境
- 蛋白激酶CK2β siRNA对肺腺癌细胞A549生长的抑制作用
- 2007年
- 目的：探讨蛋白激酶CK213特异性干扰RNA对肺腺癌细胞系A549增殖的影响。方法：构建蛋白激酶CK2psiRNA表达质粒pGPU6-CSNK2B，以与人编码序列无同源性的通用阴性对照表达质粒pGPU6一NC作对照，分别用脂质体转染法转染A549细胞。采用RT-PCR、Western Blot、免疫细胞化学技术检测转染后（K2pmRNA和蛋白表达，同位素参入法检测CK2活性，细胞计数法检测转染后A549的细胞生长曲线和倍增时间，流式细胞术检测转染后对A549细胞周期的影响。结果：重组质粒稳定转染A549细胞后，转染pGPU6一CSNK2B组CK213mRNA、细胞胞浆蛋白表达和CK2激酶活性均较转染pGPU6一NC组和未转染组细胞明显下降（P〈0．05），各组间细胞胞核蛋白CK213表达无明显差异（P〉0．05）；CK2活性的抑制率与CK213蛋白表达抑制率大致平行；转染pGPU6一CSNK2B组细胞生长相对缓慢，细胞的倍增时间为56h，而未转染组细胞的倍增时间为39h；流式细胞结果显示转染pGPU6-CSNK2B组A549细胞增殖指数明显降低（P〈0．05），细胞阻滞于G0／G1期。结论：蛋白激酶CK2B特异性siRNA表达质粒可以阻抑A549细胞CK2t3的表达，抑制细胞增殖和CK2激酶活性，为CK2 siRNA作为抗肿瘤药物的开发和CK2药靶的研究奠定了基础。
- 刘新光阮杰梁念慈
- 关键词：肺腺癌细胞A549蛋白激酶细胞计数法核糖核酸
- 临床输血学检验实验教学方法探讨被引量：4
- 2014年
- 随着医学技术和临床输血学的发展,临床输血学已被设立为一门独立的学科。它涉及的知识面广、实践性强,其实验教学旨在对医学检验本科生的输血理论知识进行强化,提高他们的实际操作能力,培养其临床逻辑思维能力[1-4]。
- 阮杰陈亚芹马丽曾涛刘新光
- 关键词：临床输血学医学检验专业教学方法探讨血型鉴定临床检验基础交叉配血
- 黄色黄素抑制人白血病HL-60细胞内蛋白激酶CK2的实验研究被引量：3
- 2007年
- 蛋白激酶CK2在寻找抗肿瘤及抗病毒药物方面是一个具有吸引力的分子靶点,其特异性抑制剂具有潜在的临床应用价值.通过测定药物作用后转移到CK2底物上[γ-32P]ATP的放射性活度,探讨黄色黄素对重组人CK2全酶以及细胞内CK2活性的影响;采用多重RT-PCR检测CK2α、α'和β亚基的mRNA表达水平;Lineweaver-Burk作图法分析CK2的酶动力学机制.发现黄色黄素能显著抑制重组人CK2全酶(IC50=0.86μmol/L)以及HL-60细胞内的CK2活性,其作用效果均强于阳性对照TBB.另外,黄色黄素作用2h可使CK2α和α'亚基的mRNA表达下降,对β亚基则无明显的影响.酶动力学分析表明,黄色黄素与ATP呈竞争性抑制CK2的活性,与酪蛋白则呈混合性抑制CK2的活性.研究说明,黄色黄素是一种有效的细胞内蛋白激酶CK2抑制剂.
- 林小聪刘新光阮杰陈小文梁念慈
- 关键词：蛋白激酶CK2HL-60细胞
- Mmu-miR-107与Cacna2d1基因3'UTR结合位点的预测及验证被引量：1
- 2015年
- [目的]预测并验证mmu-miR-107与Cacna2d1基因3'UTR的结合位点。[方法]生物信息学预测miR-107与小鼠Cacna2d1基因3'UTR的结合位点,将包含3个靶位点的3'UTR片段克隆至荧光素酶载体p GL3中,构建野生型p GL3-Cacna2d1-WT3'UTR载体;并用重叠延伸PCR技术构建分别含有单个突变位点的载体Mut1200-207、Mut2361-367、Mut3902-908和同时含有3个突变结合位点的载体Mut4plus。将各重组质粒与miRNA mimics共转染C2C12细胞,检测荧光素酶活性。[结果]与共转染p GL3-Cacna2d1-WT 3'UTR和miR-NC组相比,共转染p GL3-Cacna2d1-WT 3'UTR和mimics-miR-107组荧光素酶活性显著下降(P<0.01);与共转染对应的突变体和miR-NC组相比,转染突变体Mut2361-367/Mut3902-908和mimics-miR-107组的荧光素酶活性均下降(P<0.05);转染突变体Mut1200-2077/Mut4plus和mimics-miR-107组的荧光素酶活性下降不明显(P>0.05)。[结论]Cacna2d1基因3'UTR段双荧光素酶基因报告载体及突变体构建成功,初步证实miR-107与Cacna2d1 3'UTR的200-207位点结合。
- 阮杰翁亚光赵炜熊兴东张春龙李江滨刘桂平黄池荣付思莹刘新光
- 关键词：结合位点
- 蛋白激酶CK2在信号转导中的作用及其与肿瘤发生的关系被引量：5
- 2007年
- 蛋白激酶CK2是一种在真核细胞中普遍存在的信使非依赖性丝/苏氨酸蛋白激酶,可横向介导多条信号途径,以级联和垂直的方式发挥作用,调节细胞的生长和凋亡。其精细调控一旦失衡,可诱发肿瘤;而其特异性抑制剂和以其为靶向的基因治疗可抑制肿瘤。以CK2调节为中心的致瘤机制研究和以CK2为靶点的肿瘤药物开发具有重要的临床应用价值。
- 阮杰刘新光梁念慈
- 关键词：蛋白激酶CK2信号转导肿瘤发生
- 蛋白激酶CK2β SiRNA对肺腺癌细胞A549增殖的抑制作用被引量：3
- 2009年
- 目的:探讨蛋白激酶CK2B特异性小干扰RNA对肺腺癌细胞系A549生长增殖的影响。方法:构建CK2βsiRNA表达质粒稳定转染A549细胞,RT-PCR、免疫印迹、免疫细胞化学技术检测转染前后CK2β的mRNA和蛋白表达水平,同位素掺入法测定细胞内CK2活性,细胞计数法绘制细胞生长曲线,计算细胞倍增时间,流式细胞术分析细胞周期。结果:与空白组和阴性对照组相比,稳定转染pGPU6-CSNK2B质粒后,A549细胞中CK2β的mRNA水平、胞浆蛋白表达水平以及CK2活性均明显下降(P<0.05),但各组间细胞核中CK2β的蛋白表达水平无明显差异(P>0.05);A549细胞生长明显受到抑制,倍增时间增加;A549细胞阻滞于G0/G1期。结论:CK2β siRNA可以下调A549细胞中CK2β的表达及其激酶活性,并抑制细胞增殖;本研究为CK2特异性siRNA作为抗肿瘤药物的开发和CK2药靶的研究奠定了基础。
- 阮杰王菲菲刘新光骆艳婷刘振杰梁念慈
- 关键词：肺肿瘤蛋白激酶CK2SIRNA
- 医学检验成人教育课程设置的现状与建议
- 2016年
- 为增强检验医学成人教育课程设置与培养可持续发展和适应岗位新需求检验人才的适应性,根据医学检验专业特点、该校成人教育的办学经验及部分成教学员的意见,建议课程设置具有前瞻性、针对性和实用性,减少公共课,精选专业基础课,提升强化专业课程,多开设深化职业发展相关的选修课,以满足医学检验成人学生的学历教育和职业培训双重需求。
- 阮杰刘新光马丽陈亚芹
- 关键词：医学检验教育成人教育课程设置
- miRNA-107与衰老相关疾病被引量：2
- 2015年
- miRNA(miR)-107于2002年在人宫颈癌He La细胞系中首次被发现并克隆测序〔1〕,随着研究深入,人们越来越认可其生物学中的关键功能。miR-107转录于泛酸激酶(PANK)1基因的内含子,通过靶向Caveolin-1(Cav1)、DICER1、CDK6等重要蛋白,参与调节乙酰辅酶A的水平、细胞应激、胰岛素的敏感性、脂质代谢。
- 阮杰翁亚光刘新光
- 关键词：阿尔茨海默病2型糖尿病癌症
