陈攀科
- 作品数：30 被引量：55H指数：4
- 供职机构：遵义医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省国际科技合作计划贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学金属学及工艺更多>>
- CXCR4基因修饰骨髓间充质干细胞移植对损伤血管内皮化的影响被引量：2
- 2014年
- 目的:探讨基质细胞衍生因子受体4(CXCR4)基因修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对大鼠颈动脉球囊成形术后内皮修复的影响。方法:运用密度梯度离心法、贴壁培养并扩增BMSCs,用携带增强绿色荧光蛋白(EGFP)的慢病毒转染BMSCs,获得CXCR4修饰的BMSCs(EGFP-CXCR4-BMSCs)。建立大鼠颈动脉球囊损伤模型,随机分成PBS移植对照组(对照组)、空病毒转染BMSCs组(EGFP-BMSCs组)及CXCR4转染BMSCs移植组(CXCR4-BMSCs组)。MTT分别检测慢病毒转染细胞后第1、2、3、4、5d的细胞活力,计算细胞增殖率;细胞移植后14d取血管组织行免疫荧光检测GFP表达,28d行免疫组织化学染色检测血管内膜血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达;苏木精-伊红(HE)染色检测血管形态学变化;Western blot检测血管局部内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达。结果:BMSCs转染EGFP空病毒载体及CXCR4后,与对照组相比,各时间点细胞增殖率无统计学差异。CXCR4-BMSCs组损伤血管处有较多的阳性GFP表达。CXCR4-BMSCs与EGFP-BMSCs组血管新生内膜面积、新生内膜/中膜面积均较对照组减轻(均P<0.05),CXCR4-BMSCs组尤为明显(P<0.05)。CXCR4-BMSCs与EGFP-BMSCs组血管内膜较对照组相比均有CD31及VEGF的表达(均P<0.05),损伤血管eNOS表达量较对照组均明显增高(均P<0.05),以CXCR4-BMSCs组较为明显。结论:CXCR4基因修饰不影响BMSCs的增殖,CXCR4-BMSCs较单纯EGFP-BMSCs移植更能促进动脉损伤后早期再内皮化,降低血管成形术后再狭窄。
- 刘志江石蓓许官学赵然尊沈长银陈攀科
- 关键词：CXCR4骨髓间充质干细胞内皮化
- 慢病毒载体介导CGRP基因体外转染及对MSC生物学特性的影响被引量：2
- 2015年
- 目的探讨慢病毒载体介导降钙素基因相关肽(CGRP)基因体外转染间充质干细胞(MSC)及其对MSC生物学特性的影响。方法大鼠MSC进行分离、培养及鉴定。CGRP重组慢病毒转染MSC后,采用荧光显微镜和流式细胞技术测定其转染率。实时定量PCR、免疫荧光细胞化学及ELISA法检测MSC中CGRP的表达。慢病毒转染后通过MTT、β-半乳糖苷酶染色和诱导分化评价MSC的增殖、衰老及分化能力。结果慢病毒载体介导CGRP基因转染MSC后48h可稳定表达,MOI=30时,转染率达80%以上。与MSC组和空载病毒转染(MSC-EGFP组)比较,CGRP修饰的MSC(MSC-CGRP组)中CGRP的mRNA和蛋白表达水平增高(均P<0.01)。MTT、β-半乳糖苷酶染色和诱导分化结果显示,病毒转染后对MSC增殖、衰老及向内皮分化基本没有影响。结论 MSC是一种理想的基因载体细胞,可作为CGRP基因转染的靶细胞用于基因治疗,为后续体内、体外实验奠定基础。
- 陈攀科石蓓许官学刘志江龙仙萍张巍马帅
- 关键词：降钙素基因相关肽转染生物学特性
- 降钙素基因相关肽调节平滑肌细胞表型改变对动脉损伤后新生内膜增生的作用
- 2014年
- 目的通过降钙素基因相关肽(CGRP)干预体外培养的血管平滑肌细胞(VSMC)和体内颈动脉损伤大鼠模型,探讨其对VSMC表型改变和动脉损伤后新生内膜增殖的影响。方法取大鼠胸主动脉,以组织块贴壁培养法获得VSMC,给予血小板源生长因子(PDGF,终浓度为2.0×10-8 mol/L)和(或)CGRP(终浓度为3.5×10-7 mol/L)处理,利用Western blot法检测细胞表型改变,噻唑蓝法和流式细胞仪检测细胞增殖,细胞划痕实验检测细胞迁移能力;同时建立颈动脉损伤大鼠模型,并分为对照组和CGRP组,通过HE染色观察新生内膜形成情况,Western blot法检测损伤动脉中VSMC表型改变和信号转导通路细胞外信号调节激酶(ERK)激活情况。结果PDGF明显诱导体外培养的VSMC表型改变;而CGRP处理则显著抑制PDGF诱导的细胞表型转换,降低细胞增殖[48h:CGRP组(0.20±0.03)×105比PDGF组(0.67±0.08)×105,P<0.05;72h:CGRP组(0.17±0.04)×105比PDGF组(1.42±0.11)×105比对照组(0.45±0.05)×105,P<0.05]和迁移能力[24h:CGRP组(2.12±0.21)%比PDGF组(5.04±0.52)%比对照组(4.87±0.44)%,P<0.05;48h:CGRP组(2.84±0.43)%比PDGF组(5.78±0.74)%比对照组(5.50±0.37)%,P<0.05];CGRP降低新生内膜形成,伴随着损伤动脉中VSMC合成表型标志蛋白骨桥蛋白表达减少,并抑制细胞外信号激活途径ERK的激活。结论 CGRP可能通过抑制ERK1/2信号途径激活而调节VSMC表型,抑制细胞增殖和迁移,从而降低动脉损伤后新生内膜形成。
- 赵然尊龙仙萍陈攀科崔璨盛瑾王冬梅石蓓
- 关键词：血管平滑肌细胞降钙素基因相关肽表型改变
- 高迁移率族蛋白B1修饰间充质干细胞对球囊损伤大鼠颈动脉的保护效应被引量：1
- 2013年
- 目的探讨高迁移率族蛋白B1(high mobility group box1,HMGB1)修饰间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)对球囊损伤大鼠颈动脉的作用及分子机制。方法 HMGB1重组腺病毒(ad5GFP-HMGB1)转染MSC后,实时定量PCR、Western blot和免疫组化法检测MSC中HMGB1、血管内皮生长因子(VEGF)、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平。构建球囊损伤大鼠颈动脉模型,Evans Blue染色评价损伤血管再内皮化;ELISA检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和C反应蛋白(CRP)水平。结果与对照组和空载ad5GFP组比较,HMGB1修饰增加MSC中VEGF和PCNA的mRNA和蛋白表达水平(P均<0.05)。Evans Blue染色显示,与对照组(11.35±2.25)和空载ad5GFP组(36.78±3.75)比较,ad5GFP-HMGB1组(47.66±9.11)损伤血管再内皮化面积明显增加,差异均具有统计学意义(P均<0.01)。ELISA结果显示,HMGB1修饰MSC能降低颈动脉损伤大鼠血清中TNF-α和CRP的表达水平(P均<0.05)。结论 HMGB1修饰MSC对大鼠颈动脉损伤具有保护效应,其机制可能与上调VEGF和PCNA表达及抑制炎症反应有关。HMGB1可能是MSC修复内皮过程中的一个新的治疗靶点。
- 陈攀科石蓓许官学刘志江王正龙马帅赵红彦
- 关键词：间充质干细胞炎症血管损伤
- 银杏达莫注射液对急性心肌梗死再灌注后无复流的作用被引量：5
- 2015年
- 目的探讨分析银杏达莫注射液对兔急性心肌梗死再灌注后无复流的作用。方法以新西兰大白兔为研究对象,建立急性心肌梗死再灌注模型后随机分为对照组(n=14)和治疗组(n=15),模型建立后分别给予生理盐水或银杏达莫注射液干预。通过采集外周血分析血小板参数;计算两组动物治疗前后心电图ST段抬高指数,并使用Evans Blue染色和硫黄素S染剂行心肌染色后测定心肌缺血面积和无复流程度。结果对照组和治疗组血小板计数比较无差异,但治疗组的平均血小板容积、血小板-大细胞比率和血小板分布密度明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。冠状动脉结扎90 min后,两组动物均见ST段显著抬高,ST段抬高指数比较亦无明显差异;而应用银杏达莫注射液或生理盐水注射后于再灌注120 min时再次心电图检测显示,两组ST段抬高发生显著变化,与对照组比较,治疗组心电图ST段抬高指数显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。同时治疗组的缺血面积和无复流程度显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论在急性心肌梗死再灌注动物模型中应用银杏达莫注射液能改善血小板参数,减轻心电图ST段抬高指数,降低心肌缺血面积和无复流程度,对防治临床再灌注治疗后无复流现象具有一定应用价值。
- 沈长银陈攀科盛瑾刘德斌何尤夫赵然尊
- 关键词：无复流银杏达莫急性心肌梗死
- CGRP修饰大鼠MSCs对血管平滑肌细胞增殖及表型转化的影响被引量：3
- 2013年
- 目的:探讨降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)修饰的大鼠间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在体外对大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖和表型转化的影响及其机制。方法:分离、培养及鉴定大鼠MSCs和VSMCs。CGRP重组慢病毒(Lv-CGRP-EGFP)转染MSCs后,real-time PCR和ELISA法检测MSCs中CGRP的表达。MSCs-CGRP与VSMCs共培养后MTT、台盼蓝染色及划痕实验评价VSMCs增殖、迁移能力及细胞存活率。Western blotting法检测VSMCs中α-平滑肌肌动蛋白(alphasmooth muscle actin,α-SMA)和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达水平。结果:与MSCs组和空载病毒转染组(MSCs-EGFP)比较,CGRP修饰的MSCs(MSCs-CGRP组)中CGRP的mRNA和蛋白表达水平增高(均P<0.01)。MTT法和划痕实验显示,与MSCs组和MSCs-EGFP组比较,MSCs-CGRP组中VSMCs的增殖和迁移能力明显减弱(P<0.05),而且台盼蓝染色显示,各组细胞存活率均大于90%。Western blotting结果显示,与MSCs-CGRP共培养的VSMCs中α-SMA较MSCs组和MSCs-EGFP组表达增加,OPN的表达减少(均P<0.05)。结论:CGRP修饰的MSCs能分泌CGRP蛋白,并且能抑制VSMCs的增殖和迁移,其机制可能通过抑制VSMCs的表型从收缩表型向合成表型转化有关。
- 陈攀科石蓓龙仙萍刘志江王正龙王冬梅
- 关键词：降钙素基因相关肽血管平滑肌细胞
- 腺病毒介导hRAMP1基因转染血管平滑肌细胞的增殖和凋亡被引量：3
- 2011年
- 背景:外源性受体活性修饰蛋白1基因转染可能对血管平滑肌细胞增殖调控具有重要的作用。目的:探讨腺病毒载体介导人受体活性修饰蛋白1基因对体外培养的兔血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响。方法:分离培养获得兔主动脉血管平滑肌细胞,分别以携带人受体活性修饰蛋白1基因的腺病毒和空腺病毒转染后,分成人受体活性修饰蛋白1组、空病毒组和对照组。结果与结论:腺病毒转染细胞后随时间延长,报告基因绿色荧光蛋白表达逐渐增加,72h表达最强,感染率达80%,96h时仍有绿色荧光蛋白表达。人受体活性修饰蛋白1组的受体活性修饰蛋白1蛋白表达增加,血管平滑肌细胞凋亡率增加,细胞增殖明显抑制,与空病毒组和对照组比较差异有显著性意义(P<0.05)。提示人受体活性修饰蛋白1基因感染血管平滑肌细胞后明显抑制血管平滑肌细胞增殖,促进细胞凋亡。
- 龙仙萍赵然尊石蓓崔璨盛瑾陈攀科
- 关键词：降钙素基因相关肽血管平滑肌细胞增殖凋亡
- 急性单核细胞白血病合并骨髓坏死一例报告被引量：2
- 2012年
- 1病例简介患者,男,61岁,因＂双下肢骨痛,发热伴皮肤出血点半月＂入院。骨痛以骶尾部明显,有发热,体温最高超过39℃,全身皮肤可见散在出血点,以胸部多见。体格检查：
- 陈攀科谭天海段丽娜
- 关键词：急性单核细胞白血病骨髓疾病
- 前列地尔对急诊PCI术后无复流患者的影响被引量：1
- 2013年
- 目的探讨前列地尔对急诊经皮冠状动脉治疗(Percutaneous Coronary Intervention,PCI)术后无复流患者的心电图、心功能及心血管事件的影响。方法我院2008年8月至2012年4月因急性ST段抬高型心肌梗塞(小于12h)并行急诊PCI术,术后出现TIMI血流<3级患者共36例,随机分为治疗组(20例)和对照组(16例),对照组予常规治疗,治疗组为常规治疗+前列地尔20μg ivgtt每天1次,疗程10 d。对比两组患者术前及术后24 h心电图变化,心脏彩超检测心功能(住院期间和8个月后),并随诊8个月后返院复查冠脉造影评价血管狭窄率、观察两组心血管事件的发生率。结果与对照组相比,治疗组术后24h心电图ST段回落大于50%者多于对照组(P<0.05);给药后8个月左室射血分数(LVEF%)提高(P<0.05);心绞痛、心肌梗死等心血管事件发生率降低(P<0.05);血管再发狭窄率降低(P<0.05)。结论前列地尔能改善急诊PCI术后无复流患者的左心功能,降低术后8个月内心血管事件的发生率及血管再狭窄率。
- 陈攀科段丽娜石蓓刘志江王正龙杨菊
- 关键词：急性心肌梗塞经皮冠状动脉介入治疗无复流前列地尔
- CGRP修饰MSCs调控平滑肌细胞增殖对球囊损伤后血管狭窄的干预研究
- 目的:
经皮冠状动脉介入治疗(PCI)技术的广泛应用，显著地改善了冠心病的临床疗效及预后，但PCI术中对血管的机械损伤等所导致的术后血管内再狭窄，仍是当今临床上未能解决的重要问题[1]。目前的研究表明，再狭窄的发生...
- 陈攀科
- 关键词：降钙素基因相关肽球囊损伤血管狭窄平滑肌细胞细胞增殖
- 文献传递
