雷延昌
- 作品数：6 被引量：20H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 阻断Wnt-β-catenin信号通路对肝星状细胞活化的影响
- 2007年
- 目的探讨活化的肝星状细胞(HSC)内是否存在功能性的Wnt-β-catenin信号通路的激活,以及阻断该信号通路对HSC活化的影响。方法免疫细胞化学染色检测β-catenin在HSC-T6细胞内的表达。通过转染T细胞因子(T-cell factor,TCF)依赖的荧光素酶报告质粒(pTOPFLASH)测定HSC-T6细胞内的Wnt-β-catenin信号。将TCF的显性负性突变体dnTCF表达质粒转染HSC-T6阻断Wnt-β-catenin信号的转导,用Western印迹法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅰ型胶原表达变化。结果HSC-T6细胞核内有β-catenin的表达;转染pTOPFLASH的细胞荧光素酶活性显著高于转染pFOPFLASH的对照组(P<0.01);与转染空质粒的对照组相比,转染dnTCF的HSC-T6细胞α-SMA及Ⅰ型胶原表达分别下降52.9%和37.5%(P<0.05)。结论活化的HSC中存在Wntβ-catenin信号通路的激活,阻断该信号通路可抑制活化HSC的功能。
- 翁志宏雷延昌彭程张淑玲
- 关键词：星形细胞肝硬化
- 阻断Wnt/β-catenin信号通路对肝星状细胞活化的影响被引量：7
- 2007年
- 目的:探讨活化的肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)内是否存在功能性Wnt/β-catenin信号通路的激活,以及阻断该信号通路对HSC活化的影响。方法:免疫细胞化学染色检测β-catenin在HSC-T6细胞内的表达。通过转染T细胞因子(T-cellfactor,TCF)依赖的荧光素酶报告质粒(pTOPFLASH)测定HSC-T6细胞内的Wnt/β-catenin信号。将TCF的显性负性突变体(dominant negative TCF,dnTCF)表达质粒转染HSC-T6阻断Wnt/β-catenin信号的转导,用Westernblot法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅰ型胶原表达变化。结果:HSC-T6细胞的核内有β-catenin的表达,转染pTOPFLASH的细胞荧光素酶活性显著高于对照组(P<0.01)。与对照组相比,转染dnTCF的HSC-T6细胞α-SMA及Ⅰ型胶原表达均显著下降(P<0.05)。结论:活化的HSC中存在Wnt/β-catenin信号通路的激活,阻断该信号通路可抑制HSC的活化。
- 翁志宏雷延昌彭程张淑玲
- 关键词：肝硬化肝星状细胞信号通路
- 商陆抗病毒蛋白体外抑制乙型肝炎病毒复制的研究被引量：2
- 2007年
- 商陆抗病毒蛋白（pokeweed antiviral protein，PAP）是从美洲商陆种子或叶子中提取的一种碱性蛋白，具有抑制流感病毒、脊髓灰质炎病毒、疱疹病毒、巨细胞病毒、HIV等多种病毒复制的作用。我们先前的研究发现：天然PAP种子体外直接作用于HepG2．2．15细胞，显示有较强的抗HBV作用，但在高剂量时对细胞有一定毒性。本研究旨在探讨PAP真核表达质粒体外对HBV的抑制作用。
- 贺永文郭春霞雷延昌
- 关键词：乙型肝炎病毒复制体外抑制HEPG2.2.15细胞抗HBV作用脊髓灰质炎病毒巨细胞病毒
- 商陆抗病毒蛋白在急性人乙型肝炎病毒感染小鼠体内的抑制作用
- 2010年
- 目的探讨商陆抗病毒蛋白（PAP）在急性HBV感染小鼠模型体内抗HBV的效果。方法通过尾静脉注射具有复制能力的HBV真核表达质粒来建立小鼠急性HBV感染模型，根据注射后第1天小鼠血清HBsAg和HBeAg水平，从35只小鼠中选出24只进行配对，分为PAP治疗组（腹腔注射0．25mg／kgPAP）和对照组。于PAP注射前、注射后第1、3、5、7天，时问分辨免疫荧光分析法检测小融血清HBsAg、HBeAg和抗HBc水平，荧光定量PCR检测小鼠血清HBVDNA水平。注射后第7天HE染色检测肝组织病理变化，免疫组织化学检测肝组织HBsAg、HBeAg表达。采用配对t检验进行统计学分析。结果与对照组相比，在PAP腹腔注射后第1、3、5天对HBsAg的抑制率分别为23％（t=116．3，P〈O．05）、47％（t=38．2，P〈0．05）、68％（t=23．7，P〈0．05），对HBeAg的抑制率分别为36％（t=34．2，P〈0．05）、55％（t=61．6，P〈0．05）、83％（t=98．8，P〈0．05），对HBVDNA的抑制率分别为70．7％（t=6．6，P〈0．05）、86．9％（t=5．9，P〈0．05）、95．2％（t=36．6，P〈0．05）、95．3％（t=19．7，P〈0．05）。结论0．25mg／kg剂量的PAP在急性HBV感染小鼠模型体内对血清和肝组织的HBsAg、HBeAg的表达及HBVDNA的复制均有明显的抑制效果。
- 郭春霞贺永文彭程雷延昌翁志宏
- 关键词：商陆抗病毒药(中药)乙型疾病模型病毒
- 阻断Wnt／β-Catenin信号通路对活化肝星状细胞凋亡的影响被引量：11
- 2007年
- HSC的活化是肝纤维化的中心环节,参与HSC活化的多种因素如生长因子、细胞因子、氧化应激产物等,需通过HSC细胞内的信号转导才能发挥作用。Wnt／β-catenin信号通路是调控细胞生长、增殖和凋亡的关键通路,在胚胎发育和肿瘤发生中起着重要作用。近年来发现该信号通路与肺及肾纤维化的形成密切相关。
- 翁志宏雷延昌彭程张淑玲
- 关键词：肝纤维化肝星状细胞细胞凋亡
- 商陆抗病毒蛋白不同结构域的抗乙型肝炎病毒活性
- 2010年
- 目的比较全长和不同片段缺失型商陆抗病毒蛋白（PAP）基因真核表达质粒体外抗HBV作用及其细胞毒性作用。方法将全长和不同片段缺失型PAP基因真核表达质粒用脂质体转染HepG2．2．15细胞，收获生长良好的HepG2．2．15细胞，转染前1d，接种于24孔培养细胞板，培养20h后，待细胞密度达到40％～50％时进行转染。细胞随机分为4组：pXF3H组，转染空质粒pXF3H作为对照；pXF3H—PAP12组，转染全长PAP的真核表达质粒pXF3H-PAP12；pXF3H-PAP14组，转染C端缺失25个氨基酸的PAP的真核表达质粒pXF3H-PAP141;pXF3HPAP34组，转染既缺失N端69个氨基酸又缺失C端25个氨基酸的PAP的真核表达质粒pXF3H—PAP34。转染的质粒剂量为每孔1．0μg，终浓度为2．0μg／ml，质粒DNA（μg）和脂质体（μl）的比例为1：2．5，转染72h后收集细胞及培养上清液。酶联免疫吸附法检测培养上清液HBsAg和HBeAg，荧光定量PCR检测HBV DNA水平，四甲基偶氮唑盐比色法检测各质粒对转染细胞的毒性作用。应用SPSS12．0软件包处理数据，两样本均数的比较采用t检验，率的比较采用Х^2检验。结果对HBsAg、HBeAg、HBV DNA的抑制率，pXF3H—PAP14组分别为56．3％、75．8％和61．7％，pXF3H—PAP12组分别为61．4％、84．2％和63．2％，两组间差异无统计学意义。但pXF3H-PAP14组细胞毒性（抑制率为10．2％）明显低于pXF3H—PAP12组（抑制率为27．1％），Х^2=7．7，P〈0．01。pXF3H-PAP34组无细胞毒性，但其抗HBV作用也丧失，对HBsAg、HBeAg、HBV DNA的抑制率分别为7．8％、11．0％、20．5％。结论PAP的C端25个氨基酸与细胞毒性相关，与抗HBV活性无关；PAP的N端69个氨基酸与抗HBV活性相关。
- 郭春霞贺永文彭程雷延昌李文庭
- 关键词：抗病毒药
