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韦艳霞: 作品数：11 被引量：10H指数：2; 供职机构：徐州医科大学更多>>; 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金江苏省“青蓝工程”基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学文化科学轻工技术与工程更多>>

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双歧杆菌Ⅱ型毒素-抗毒素系统-MazEF的分子进化分析: 2014年; 目的:对双歧杆菌属编码的Ⅱ类毒素-抗毒素(TA)系统MazEF进行分子进化分析。方法:利用PSI-BLAST在NCBI中搜索获得双歧杆菌编码的MazF分子序列,在NCBI蛋白数据库、核酸数据库分别下载其他菌属基因组编码的MazF蛋白序列和本研究所涉及菌属的16 S rRNA序列,应用Clustal X2和MEGA4软件对Maz F做分子进化分析。结果:共搜索到双歧杆菌株染色体编码毒素蛋白MazF 26个。分子进化分析显示:整个双歧杆菌属的MazF保守性不好;MazF与16 S rRNA的共进化仅在个别菌种中发现,大部分MazF的聚类结果与相应菌种16 S rRNA的聚类结果不同。结论:双歧杆菌中的TA系统MazEF可能是通过基因的水平转移整合入基因组中,属于菌株非核心基因组部分。; 韦艳霞刘佃滨郑纪伟尤红娟张鹏李阳汤仁仙; 关键词：毒素-抗毒素系统分子进化双歧杆菌

Nrf2和Trx1在华支睾吸虫感染小鼠肝脏中表达的初步研究被引量：1: 2014年; 目的分析华支睾吸虫感染小鼠肝脏中Nrf2和Trx1编码基因的表达情况,初步探讨Nrf2及Trx1在华支睾吸虫致病过程中的作用。方法选用健康Balb/c小鼠建立华支睾吸虫感染模型,分别在实验第0、3、5、7、10、14、21、28和35d摘除小鼠眼球采血,分离血清,检测血清中天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性;颈椎脱臼处死小鼠取肝脏,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝脏中Nrf2和Trx1的m RNA表达情况。结果与对照组相比,感染组小鼠在感染第5、7、10、14、21和35d血清ALT活性显著升高(P<0.05);分别为(19.9332±1.98180)U/L、(64.3699±14.53874)U/L、(46.7455±6.27572)U/L、(99.0038±25.34329)U/L、(46.7590±8.85478)U/L和(50.3374±14.19886)U/L。感染组小鼠抗氧化应激通路上游基因Nrf2和下游Trx1的m RNA表达升高;其中Nrf2在感染第5天升高显著(P<0.05);Trx1在感染第21d升高显著(P<0.05)。结论 Nrf2和Trx1 m RNA在华支睾吸虫感染过程中表达升高,提示Nrf2/Trx1通路可能在华支睾吸虫致病过程中发挥一定的作用。; 韦艳霞于倩李阳刘宜升王庆苓汤仁仙郑葵阳; 关键词：华支睾吸虫硫氧还蛋白-1 天冬氨酸氨基转移酶丙氨酸氨基转移酶

大肠埃希菌TA系统mazEF的研究进展被引量：1: 2012年; 大部分细菌的遗传物质中含有毒素-抗毒素系统(TA)的遗传基因。mazEF是大肠埃希菌染色体上的一对毒素抗毒素基因,由毒素基因mazF和抗毒素基因mazE组成。其在细菌的生长调控和细胞程序性死亡中发挥了重要的作用。环境压力激活mazEF后,MazF可以通过对mRNA的剪切作用造成翻译停止。mazEF的存在可以增加细菌对环境压力的耐受性、保持细菌遗传物质的稳定、参与抗生素引起的细胞死亡、也在细菌的耐药性中发挥重要作用。; 叶露韦艳霞; 关键词：大肠埃希菌

牙龈卟啉单胞菌FtsZ降解试验模型-clpP基因缺失株的构建: 2013年; 目的建立牙龈卟啉单胞菌分裂关键蛋白FtsZ （FtsZPg）体内降解试验模型,即构建蛋白酶编码基因clpP缺失的E.coli MG1655.方法将一段两端含靶基因同源臂的PCR产物电转入L-阿拉伯糖诱导后表达λ噬菌体重组蛋白、具有较强重组能力、含质粒pKD46的菌株E.coli MG1655感受态细胞,以PCR产物中的氯霉素抗性基因替代靶基因.结果利用氯霉素抗性平板筛选阳性重组体,得到E.coli MG1655的ClpP蛋白酶基因敲除突变株.通过琼脂糖凝胶电泳和DNA测序最终鉴定阳性clpP基因缺失株.结论本试验成功构建了E.coli MG1655 clpP敲除株;该敲除株有望在探讨重要牙周致病菌牙龈卟啉单胞菌分裂关键蛋白FtsZPg与蛋白酶clpP的关系中发挥一定作用.; 刘佃滨韦艳霞杨锋杜华丽韩建国; 关键词：牙龈卟啉单胞菌大肠埃希菌

根管感染中产甲烷古细菌基于mcrA序列的系统发育分析被引量：1: 2014年; 目的:分析根管感染中产甲烷古细菌的多样性,建立基于功能基因--甲基辅酶M还原酶(methyl coenzyme M reductase,MCR)基因α亚基(mcr A)的系统发育树。方法:利用一对特异性引物选择性扩增感染根管中产甲烷古细菌的mcr A片段,在此基础上建立mcr A克隆文库。通过蓝白斑筛选的方法,筛选出阳性重组克隆子,进一步通过基因测序获得重组克隆子中的插入片段mcr A序列。利用Clustalx和Mega 4软件包分析mcr A序列,对其进行同源性比较和系统发育学分析。结果:4例根管样本的其中1例检出了产甲烷古细菌;构建了基于mcr A序列的系统发育树。随机选出的8个mcr A克隆片段高度同源,均为类口腔甲烷短杆菌序列型。结论:本例根管感染中产甲烷古细菌的多样性局限于类口腔甲烷短杆菌序列型。; 韦艳霞郑纪伟杨锋刘佃滨; 关键词：根管感染 MCRA 基因系统发育

长双歧杆菌JDM301基因组及重要功能基因的研究: 近年来,越来越多的人开始使用益生菌制品以预防疾病、保持健康。作为一种模式益生菌,双歧杆菌经常与其他乳酸菌一起用于益生菌制品的生产。由于益生菌具有对宿主多方面的益生作用、应用广泛,其功能性与安全性便成为研究者聚焦的热点。我...; 韦艳霞; 关键词：长双歧杆菌功能基因致病因子安全性评估焦磷酸测序

长双歧杆菌抗毒素基因mazE细菌双杂交诱饵质粒的构建与鉴定: 2016年; 目的构建细菌双杂交系统中的诱饵载体pBT-mazE，为长双歧杆菌的压力调控机制研究奠定基础。方法PCR扩增抗毒素蛋白MazE的编码基因，插入到带有XcI基因的载体pBT构建诱饵质粒pBT-mazE。将pBT-mazE转化至大肠杆菌报告菌株XL-1 BlueMRF’Kan，检测诱饵蛋白maze-λcI的表达。将pBT-mazE和pTRG空载体共转化报告菌株XL-1 BlueMRF’Kan，通过3-氨基-1，2，4-三氮唑（3-amino-1，2，4-triazole，3-AT）选择性筛选平板检测诱饵质粒的自激活作用。结果酶切和测序结果显示MazE蛋白编码序列成功克隆入载体pBT，融合区读码框正确。诱饵质粒pBT-mazE能够表达诱饵蛋白maze-λcI。pBT-mazE和pTRG空载体共转化的报告菌株XL-1 BlueMRF’Kan在含有3-AT的选择性筛选平板上无菌落生成，而在no3-AT非选择性筛选平板上生长良好，表明诱饵质粒pBT-mazE在细菌双杂交系统中无自激活作用。结论所构建的诱饵载体pBT-mazE可以用于细菌双杂交的进一步实验。; 李阳杨帆韦艳霞郑葵阳汤仁仙; 关键词：诱饵载体长双歧杆菌

长双歧杆菌染色体上的基因BLJ_864和BLJ_865构成的Ⅱ型毒素—抗毒素系统: 2014年; 目的鉴定Bifidobacterium longum JDM301(B.longum JDM301)染色体上的BLJ_864、BLJ_865是否构成mazEF家族的一组Ⅱ型毒素—抗毒素系统(TA系统)。方法通过RT-PCR分析BLJ_864和BLJ_865在B.longum JDM301以及E.coli中的共转录;通过将带有BLJ_864和BLJ_865的完整操纵子的质粒转化入E.coli,证明同一操纵子中的BLJ_864、BLJ_865所编码的抗毒素蛋白和毒素蛋白共表达;通过在E.coli中单独表达BLJ_864编码的毒素蛋白或将其与BLJ_865编码的抗毒素蛋白共表达,鉴定BLJ_864编码的毒素蛋白对细菌生长的抑制作用及其对应的BLJ_865编码的抗毒素蛋白能否消除毒素蛋白的生长抑制作用。结果 BLJ_864和BLJ_865构成一个二元操纵子,两者在其天然菌株B.longum JDM301中可以共转录;异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下,BLJ_864和BLJ_865所编码的抗毒素蛋白和毒素蛋白在异源宿主E.coli中共表达。BLJ_864编码的毒素蛋白的表达抑制异源宿主E.coli的生长,而将BLJ_865所编码的抗毒素蛋白与BLJ_864编码的毒素蛋白共表达则可以拮抗毒素蛋白的生长抑制作用。结论 B.longum JDM301基因组中的假定基因BLJ_864和BLJ_865编码一组有功能的、隶属mazEF家族的Ⅱ型TA系统。; 韦艳霞叶露刘佃滨郭晓奎; 关键词：长双歧杆菌

大肠埃希菌MG1655 Lon蛋白酶编码基因敲除株的构建: 2014年; 目的构建Lon蛋白酶编码基因缺失的大肠埃希菌（E．coli MG1655）菌株。方法PCR扩增基因序列，该序列两端与Lon蛋白酶基因部分序列同源，中间部分为氯霉素抗性基因。电转化法将该片段转入大肠埃希菌MG1655。利用宿主菌-大肠埃希菌MG1655内pKIM6编码的入重组系统，以PCR产物中的氯霉素抗性基因替代靶基因-Lon编码基因。氯霉素抗性平板筛选阳性重组体，琼脂糖凝胶电泳和DNA测序两种方法鉴定lon敲除突变株。结果氯霉素抗性平板成功筛选出重组菌株，基因检测结果表明Lon编码基因被氯霉素抗性基因替代。结论本研究通过该方法成功获得了E．coliMG1655蛋白酶编码基因lon敲除突变株，为探讨大肠埃希菌Lon在牙菌斑形成中的作用奠定了基础。; 韦艳霞李阳刘佃滨; 关键词：基因敲除大肠埃希菌牙菌斑

上海地区大米样品黄曲霉素B_1含量检测被引量：5: 2011年; 目的对上海市区内出售的大米样本进行黄曲霉素B1含量的测定和分析。方法以在上海市区内的散装粮食店、中型超市、大型超市和淘宝网店采购的苏北产大米和东北产大米作为受试样本,采用酶联免疫吸附法测定样本大米中黄曲霉素B1的含量。采用独立样本T检验分析不同产地样本大米中黄曲霉素B1含量的差异;单因素方差分析比较不同购物来源样本大米中黄曲霉素B1的含量差异。结果 60个受试样本中黄曲霉素B1含量的总体均值为1.926 ppb,其中超过国家标准样本数为2个,分别为购自散装店和中型超市的东北产大米;苏北和东北样本大米中黄曲霉素B1的含量分别为(1.221±1.055)ppb和(2.631±2.903)ppb,两者差异具有统计学意义(P<0.05)。散装店、网店、中型超市和大型超市样本大米中黄曲霉素B1的含量分别为(2.900±2.457)ppb、(1.570±1.416)ppb、(1.743±2.683)ppb和(0.569±0.608)ppb,四者比较差异有统计学意义(P<0.05),进一步的多重检验表明散装店与大型超市来源样本大米中黄曲霉素B1的含量存在统计学差异(P<0.05)。结论上海市区出售的大米样本中黄曲霉素B1含量总体较低。受试样本中的黄曲霉素B1的含量,东北产大米高于苏北产大米,散装粮食店来源大米高于大型超市来源大米。在散装店和中型超市的受试样本中发现黄曲霉素B1含量超标样本。; 叶露韦艳霞刘畅; 关键词：黄曲霉素B1 大米酶联免疫吸附法

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