颛孙永勋
- 作品数：22 被引量：96H指数：6
- 供职机构：中山大学孙逸仙纪念医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 小鼠骨髓间充质干细胞的分离、培养及鉴定被引量：6
- 2008年
- 目的建立一种从小鼠骨髓中分离培养间充质干细胞(MSCs)的高效方法。方法采取贴壁细胞分离法分离和纯化小鼠骨髓间充质干细胞(mMSCs),检测mMSCs在不同诱导条件下向成骨细胞及脂肪细胞分化能力,用流式细胞术及显微镜分别检测mMSCs纯度和形态特征。结果mMSCs贴壁生长后形态较均一,细胞形态呈成纤维细胞样,流式细胞术检测:CD45、CD11b、CD44及CD29分别为(3.34)%、(2.41)%、(98.46)%及(99.36)%。第4代mMSCs经诱导后可向成骨细胞和脂肪细胞分化。结论通过贴壁培养可以从小鼠骨髓中分离培养出高纯度mMSCs,该方法效率高,稳定性好。
- 李建国颛孙永勋冉丕鑫张炜莫晓能吴浩李依群
- 关键词：骨髓间充质干细胞小鼠细胞培养
- 间充质干细胞对去除CD4^+CD25^+调节性T细胞哮喘小鼠气道炎症的影响被引量：3
- 2017年
- 背景:间充质干细胞具有免疫调节作用,可抑制哮喘小鼠气道炎症,但其机制尚不明确。前期研究表明,间充质干细胞可上调哮喘小鼠外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞(Treg)。目的:观察骨髓间充质干细胞移植对去除CD4^+CD25^+Treg哮喘小鼠气道炎症的影响。方法:将40只BALB/c小鼠随机分为5组:正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、去除Treg细胞哮喘模型组(C组)、MSCs处理组(D组)、去除Treg细胞哮喘模型MSCs处理组(E组)。除A组外,其余各组以卵白蛋白致敏和激发的方法建立哮喘动物模型;C组和E组在激发前1 d及激发实验第3天经尾静脉注射大鼠抗小鼠CD25^+单克隆抗体,以去除CD4^+CD25^+Treg;D组、E组于诱导哮喘的第10天尾静脉注射0.2 mL骨髓间充质干细胞(1×109 L-1)。最后1次激发后24 h,检测各组小鼠外周血CD4^+CD25^+Treg占淋巴细胞的比例,支气管肺泡灌洗液中炎症细胞总数及分类计数,并进行肺组织病理观察。结果与结论:(1)外周血CD4^+CD25^+Treg占淋巴细胞比例:B组、D组低于A组(P<0.01),D组高于B组(P<0.01);(2)支气管肺泡灌洗液中炎症细胞计数:B组﹑C组﹑D组炎症细胞总数﹑嗜酸性粒细胞计数均显著高于A组(P<0.01),C组炎症细胞总数﹑嗜酸性粒细胞计数显著高于B组(P<0.01),D组炎症细胞总数、酸性粒细胞计数显著低于B组(P<0.01),E组炎症细胞总数﹑嗜酸性粒细胞计数显著低于C组(P<0.01);(3)肺组织病理:间充质干细胞可显著抑制哮喘小鼠气道炎症;去除Treg细胞可加重哮喘小鼠气道炎症,但间充质干细胞仍能显著抑制去除外周血CD4^+CD25^+Treg哮喘小鼠的气道炎症;(4)结果表明:间充质干细胞可显著抑制去除CD4^+CD25^+Treg哮喘小鼠的气道炎症反应。
- 颛孙永勋张炜杜雨末冉丕鑫陈瑞林琳李建国
- 关键词：干细胞间质干细胞哮喘间充质干细胞调节性T细胞
- 骨髓间充质干细胞对哮喘小鼠CD4^＋CD25^＋调节性T细胞及气道炎症的影响被引量：16
- 2008年
- 背景:CD4+CD25+调节性T细胞功能降低、数量下降已被公认为是哮喘患者免疫失调的重要表现。间充质干细胞具有免疫调节功能,可上调CD4+CD25+调节性T细胞,抑制淋巴细胞增殖,并已在许多免疫性疾病方面成功应用。目的:观察骨髓间充质干细胞移植对哮喘小鼠外周血CD4+CD25+调节性T细胞及气道炎症的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-09/2008-05在中山大学附属第二医院中心实验室完成。材料:SPF级BALB/c小鼠34只,其中3～4周龄雄鼠4只,用于制备骨髓间充质干细胞;6周龄雌鼠30只,随机分为正常对照组、模型对照组、细胞移植组,10只/组。方法:模型对照组、细胞移植组以500mg/L卵白蛋白溶液0.2mL腹腔注射致敏,以50g/L卵白蛋白溶液雾化吸入激发建立小鼠哮喘模型。正常对照组以生理盐水代替卵白蛋白溶液,细胞移植组在诱导哮喘的第10天经尾静脉注入体外分离培养的小鼠骨髓间充质干细胞。主要观察指标:流式细胞仪检测小鼠外周血CD4+CD25+调节性T细胞占淋巴细胞的比例,并检测小鼠支气管肺泡灌洗液中的炎症细胞总数,计数嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、中性粒细胞,结合病理切片分析气道炎症情况。结果:与正常对照组比较,模型对照组外周血CD4+CD25+调节性T细胞占淋巴细胞的比例明显降低(t=7.742,P<0.05);与模型对照组比较,细胞移植组该比例明显升高(t=7.455,P<0.05)。3组小鼠支气管肺泡灌洗液炎症细胞总数、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、中性粒细胞计数比较差异显著(P均<0.05);两两比较,模型对照组支气管肺泡灌洗液炎症细胞总数高于正常对照组(P<0.05),细胞移植组支气管肺泡灌洗液炎症细胞总数低于模型对照组(P<0.05)。正常对照组小鼠气道无明显炎症改变;模型对照组小鼠支气管、血管粘膜下和周围肺组织有明显炎症细胞浸润、气道上皮增生、气道黏液增多、气�
- 李建国颛孙永勋冉丕鑫张炜莫晓能吴浩李依群
- 关键词：骨髓间充质干细胞调节性T细胞哮喘免疫调节
- 吸入复方异丙托溴铵与异丙托溴铵对COPD肺功能的影响被引量：11
- 2012年
- 目的观察单剂量吸入复方异丙托溴铵与异丙托溴铵对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者静态肺功能的不同影响。方法 26例稳定期COPD患者随机分为两组,分别吸入复方异丙托溴铵和异丙托溴铵后,进行静态肺功能测定。结果 14例吸入复方异丙托溴铵的患者,第一秒用力呼气量(FEV1)和用力肺活量(FVC)、呼气流速指标均有显著改善,第一秒用力呼气量占肺活量比值(FEV1/FVC)无明显的改变;深吸气量(IC)增加;12例吸入异丙托溴铵的患者,FEV1,FVC,FEV1/FVC无显著改变,呼气流速指标亦无显著改变但IC增加。结论单剂量吸入复方异丙托溴铵能够显著改善COPD患者肺通气功能。
- 吴浩张海霞颛孙永勋李建国
- 关键词：复方异丙托溴铵静态肺功能FEV1/FVC一秒用力呼气量用力肺活量呼气流速
- 骨髓间充质干细胞外泌体调节哮喘小鼠Foxp3^＋ Treg/Th17的平衡被引量：12
- 2018年
- 背景:Th1/Th2失衡是哮喘的基本的病理生理表现,但近来的研究表明哮喘还与调节T细胞(Foxp3^+Treg)/Th17的失衡有关。许多研究表明间充质干细胞的免疫调节作用与其分泌的外泌体相关。目的:观察骨髓间充质干细胞外泌体注射对哮喘小鼠气道炎症及Foxp3^+Treg细胞、Th17细胞及支气管肺泡灌洗液中细胞因子的影响。方法:将27只SPF级BALB/c小鼠分为3组:正常对照组、哮喘模型组、外泌体处理组。除正常对照组外,其他两组以卵白蛋白致敏和激发的方法建立哮喘动物模型,外泌体处理组在第21天激发的同时尾静脉注射外泌体。最后1次激发后24 h,检测各组小鼠脾中Foxp3^+Treg及Th17占淋巴细胞的比例,检测Foxp3^+Treg中CTLA-4及PD-1表达,检测CD4^+T细胞中p27^(kip1)表达,支气管肺泡灌洗液中炎症细胞总数及分类计数,肺泡灌洗液中白细胞介素4,5,13,10,17及干扰素γ表达,并进行肺组织病理观察。结果与结论:(1)小鼠脾组织中Foxp3^+Treg占淋巴细胞比例及Foxp3^+Treg上CTLA-4和PD-1表达:外泌体处理组高于哮喘模型组(P<0.01);(2)脾组织中Th17细胞占淋巴细胞的比例:哮喘模型组>外泌体处理组>正常对照组(P<0.01);(3)支气管肺泡灌洗液中炎症细胞总数及分类计数:外泌体处理组炎症细胞总数、嗜酸性粒细胞计数,单核巨噬细胞计数显著低于哮喘模型组(P<0.01);(4)肺组织病理变化:正常对照组气道无明显炎症细胞浸润,哮喘模型组气道炎症显著,外泌体组气道炎症明显减轻;(5)支气管肺泡灌洗液中细胞因子水平检测:与哮喘模型组相比,外泌体处理组白细胞介素13和Th17相关的白细胞介素17水平降低(P<0.05,P<0.01),Foxp3^+Treg相关的白细胞介素10水平升高(P<0.01);(6)CD4^+T细胞中p27^(kip1)的表达:外泌体处理组p27^(kip1)的表达高于哮喘模型组;(7)结果表明:骨髓间充质干细胞外泌体可以抑制哮喘小鼠气道炎症反应,逆转哮喘小鼠Foxp3^+Treg
- 林颖胡锦章颛孙永勋冉丕鑫陈瑞杜雨末林琳李建国
- 关键词：哮喘外泌体免疫失衡
- 新媒体辅助教学在诊断学心电图见习教学中的效果被引量：6
- 2018年
- 目的探讨应用新媒体的方法辅助心电图教学在诊断学心电图见习课教学中的效果。方法在中山大学临床医学系2015级本科生中抽取50名学生,随机分为两组,每组25名学生,分别进行新媒体辅助下的心电图教学及常规心电图教学,在课后进行随堂小测。结果新媒体辅助教学组及常规教学组的考核平均成绩为(91.8±2.4)分、(85.2±2.5)分,新媒体教学组优于常规教学组(P=0.010);新媒体教学组及常规教学组的优秀率分别为80%、52%,新媒体教学组优于常规教学组(P=0.037)。结论应用新媒体的方法辅助心电图教学在诊断学心电图见习课教学中取得了较好的效果。
- 颛孙永勋罗颖嘉李建国
- 关键词：诊断学心电图新媒体教学见习
- 小干扰RNA抑制成熟树突细胞表面抗原CD80/CD86的表达被引量：2
- 2014年
- 背景:成熟树突细胞可通过其表面抗原CD80/CD86来启动Th细胞活化,促使Th细胞向Th1细胞分化减少、向Th2细胞方向分化增多。目的:探讨小干扰RNA抑制哮喘小鼠成熟树突细胞表面抗原CD80/CD86表达后对Th1及Th2型细胞因子干扰素γ、白细胞介素4分泌的影响。方法:建立哮喘小鼠模型,分离哮喘小鼠骨髓成熟树突细胞,流式细胞术检测表面标记物CD11c、CD80、CD86的阳性表达率;设计合成CD80/CD86相关小干扰RNA转染哮喘小鼠成熟树突细胞,荧光定量PCR、流式细胞术检测干扰前后成熟树突细胞中CD80/CD86 mRNA和相应蛋白的表达,将干扰组、未干扰组、转染试剂对照组的成熟树突细胞分别与小鼠T淋巴细胞共培养,ELISA检测上清液中Th1及Th2型细胞因子干扰素γ、白细胞介素4分泌水平。结果与结论:①正常组成熟树突细胞的CD80/CD86的表达与哮喘组相比均明显降低(均P<0.05)。②小干扰RNA转染哮喘小鼠成熟树突细胞后,干扰组CD80/CD86 mRNA及其蛋白表达水平较其他组均明显降低(均P<0.05)。③小干扰RNA转染后干扰组共培养体系中干扰素γ水平明显高于其他组(均P<0.05),白细胞介素4水平则明显低于其他组(均P<0.05)。提示哮喘小鼠成熟树突细胞高表达CD80/CD86,小干扰RNA特异性抑制哮喘小鼠成熟树突细胞中CD80/CD86的表达,能增加干扰素γ并减少白细胞介素4的分泌,从而纠正Th1/Th2失衡。
- 严志东闫佳颛孙永勋陈瑞张蔚冯素玲李建国
- 关键词：树突细胞表面抗原CD80CD86
- 骨髓间充质干细胞逆转支气管哮喘小鼠气道重构及其机制的初步研究被引量：5
- 2016年
- 目的：探讨骨髓间充质干细胞逆转支气管哮喘小鼠气道炎症及对气道重构的影响。方法：采用40只雌性的BALB/c小鼠，随机分组为骨髓间充质干细胞对照组、骨髓间充质干细胞治疗组、哮喘模型组、正常对照组。分离雄性4周龄的小鼠中分离出骨髓间充质干细胞。应用卵白蛋白制备慢性哮喘的小鼠模型，采用流式细胞计数法检测小鼠外周血中CD4＋、CD25＋调节性T细胞的情况，并观察骨髓间充质干细胞抑制之后气道的重构及气道炎症的情况。结果：病理检查可见哮喘模型支气管上皮黏膜有杯状细胞增生，上皮黏膜脱落，部分管腔有大量的炎性细胞浸润，气道平滑肌细胞肥大增生；正常对照组与骨髓间充质干细胞对照组无气道重构及炎症表现，而骨髓间充质干细胞治疗组有气道炎症并且气道重构现象明显降低。哮喘模型组的CD4＋、CD25＋调节性T细胞占淋巴细胞比例比骨髓间充质干细胞对照组及正常对照组明显降低（P＜0.05）；骨髓间充质干细胞治疗组CD4＋、CD25＋调节性T细胞占淋巴细胞比例比哮喘组明显上升（P＜0.05）；而骨髓间充质干细胞治疗组、骨髓间充质干细胞对照组、正常对照组之间无统计学差异。结论：骨髓间充质干细胞移植可逆转支气管哮喘小鼠的气道炎症和气道重构的程度，通过上调CD4＋、CD25＋调节性T细胞的比例发挥作用的。
- 刘仕欣颛孙永勋谭磊
- 关键词：气道重塑气道炎症
- 间充质干细胞上调CD4<'+>CD25<'+>调节性T细胞对哮喘小鼠气道炎症的影响
- 研究背景:
支气管哮喘是多种细胞(嗜酸性粒细胞、肥大细胞、淋巴细胞、中性粒细胞和气道上皮细胞等)和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾患。这种慢性炎症导致气道高反应性，通常出现广泛多变的可逆性气流受限，并引起反复发作...
- 颛孙永勋
- 关键词：间充质干细胞调节性T细胞哮喘气道炎症
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- 恙虫病致肺部损害54例临床分析被引量：5
- 2006年
- 目的加深对恙虫病所致肺损害的认识。方法对54例恙虫病所致肺损害病例进行回顾性分析。结果肺损害占恙虫病患者的47.8%(54/113),其中咳嗽占37%(20/54),咳痰占25.9%(14/54),气促占24.1%(13/54),胸痛占14.8%(8/54),肺部口罗音占29.6%(16/54);X线胸片肺部炎症渗出占27.8%(15/54),间质性炎症占42.5%(23/54),胸腔积液和(或)肺水肿占33.3%(18/54)。结论恙虫病所致肺损害较常见,应引起重视,以免误诊。
- 冯素玲李建国罗泽如颛孙永勋莫晓能
- 关键词：恙虫病肺损害
