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中药化学整体观的教学理念与教学方法探讨被引量：4: 2017年; 通过中药化学与中药炮制学、中药制剂学、中药鉴定学等中药学专业课程之间关系的阐述,表明中药化学在整个课程体系中处于重要的地位与作用。又通过实例对中药化学研究内容与相关专业课程的关联性进行阐述,为更好地培养学生对中药学的整体观科学理念的认识,今后从事中药相关专业的工作提供重要的基础。; 魏娜王勇高炳淼张小坡王宁靳德军; 关键词：中药化学中药炮制中药鉴定

毕赤酵母高效电转化条件的研究被引量：12: 2010年; 目的建立毕赤酵母的高效电转化方法,为利用毕赤酵母重组表达海洋药物功能基因提供方法基础。方法采用电穿孔的方法把外源DNA转化进毕赤酵母基因组中。通过对毕赤酵母生长状态,电击条件等影响因素进行探索。结果当采用对数生长中期的菌体制备感受态细胞、电压为1.5kV、质粒浓度为0.15g.L-1和0.2cm电转化杯时,转化效率达到最大值,为每微克质粒DNA 36个转化子。经抽样PCR鉴定所得到的转化子均为阳性克隆。结论通过对电转化各种条件的优化,获得了高效电转化技术方法。; 高炳淼高炳淼长孙东亭唐天乐; 关键词：毕赤酵母电转化转化率

利用SMART技术构建疣缟芋螺毒管cDNA噬菌体文库及芋螺毒素新基因的克隆被引量：4: 2012年; 利用RNA 5'末端移动反转录(switching mechanism at 5'end RNA transcription,SMART)技术构建及鉴定疣缟芋螺毒管cDNA噬菌体文库,克隆新型芋螺毒素基因.提取疣缟芋螺毒管总RNA,用RT-PC反转录成单链cDNA(single-stranded cDNA,ss-cDNA),长距离PCR(long-distance PCR,LD-PCR)扩增合成双链cDNA(double-stranded cDNA,ds-cDNA),依次用蛋白酶K和SfiⅠ酶进行酶切孵育,用CHROMA SPIN-400柱进行分级分离.得到的ds-cDNA与λTripIE×2噬菌体载体体外连接并体外包装,感染大肠杆菌E.coli XL1-blue,测定原始文库滴度和重组率.进行文库扩增,测定扩增文库滴度.用PCR鉴定插入cDNA片段的大小,构建的疣缟芋螺毒管cDNA噬菌体原始文库滴度为1.47×106pfu/mL,重组率为90.72%,扩增文库的滴度为4.07×108pfu/mL,插入cDNA片段为200～1 200 bp.利用SMART技术成功构建了疣缟芋螺毒管cDNA噬菌体文库并克隆出新型芋螺毒素基因,为芋螺毒素基因的筛选和鉴定奠定了基础.; 李宝珠高炳淼吴勇于津鹏吴潇洒罗素兰长孙东亭; 关键词：噬菌体 CDNA文库 SMART技术

芋螺毒素ImI的化学合成及其杀虫活性研究被引量：9: 2018年; 为研究芋螺毒素Im I的杀虫活性,本研究采用化学方法合成芋螺毒素线性肽,经氧化折叠后质谱鉴定获得芋螺毒素Im I,采用MTT法和昆虫注射法研究其杀虫活性。结果表明采用化学合成法可以成功合成芋螺毒素线性肽,经氧化折叠后质谱鉴定形成2个二硫键;活性实验表明芋螺毒素Im I具有抑制昆虫细胞sf9生长的活性,半数有效量为0. 13 n M;对黄粉虫具有杀虫活性,半数致死剂量为0. 11μg/mg。通过化学合成法可以有效合成芋螺毒素Im I,其具有良好的杀虫活性,可为研发新型多肽类生物杀虫剂奠定基础。; 吴小英安婷婷高炳淼; 关键词：芋螺毒素化学合成杀虫活性

一种海胆壳提取物及其制备方法和抗氧化应用: 一种海胆壳提取物，所述提取物为海胆壳蛋白和/或海胆壳蛋白酶解寡肽，所述海胆壳为长刺海胆的海胆壳。本发明所述海胆壳蛋白，通过将海胆壳洗净，干燥，粉碎，并用有机溶剂浸泡除去杂质后，用水提法获得；所述海胆壳蛋白酶解寡肽通过海胆...; 高炳淼杨涛符金星廖燕玲邓富荣; 文献传递

海南白沙县青松乡人工栽培益智种质资源的调查与分析被引量：3: 2017年; 目的:对海南白沙县青松乡栽培的益智种质资源进行调查,对3个主要益智种质资源的外观形态和次生代谢产物含量进行评价,为益智优质种质资源选育提供基础。方法:测量益智不同种质资源叶片的长度和宽度,称量益智不同种质资源的果实粒重,用LC-MSMS分析不同种质资源果实中次生代谢产物的含量。结果:不同益智质资源的叶片长宽度、果实粒重和次生代谢产物含量间具有明显差异,以圆果益智的质量最佳。结论:益智不同种质资源的外观形态和次生代谢产物含量差异较大,圆果益智为优质品种,建议推广种植。; 李永辉王勇田建平高炳淼张俊清; 关键词：益智种质资源次生代谢产物

海葵多肽Ap-TxⅠ及其制备方法与应用: 本发明提供海葵多肽Ap‑TxⅠ及其制备方法与应用。本发明利用高通量转录组学从套膜海葵(Aiptasia pallida)中发现海葵多肽Ap‑TxⅠ，其序列为SGACAEICVHRCIPSCNFACCVAR，形成3个二硫键...; 高炳淼符金星袁琳廖燕玲

南药益智SRAP-PCR体系优化及引物筛选被引量：8: 2018年; 为了建立适用于南药益智的SRAP-PCR体系,并筛选特异性引物用于研究不同地理居群的南药益智的遗传多样性,采集了海南不同地理居群的益智资源,利用植物基因组DNA提取试剂盒提取益智基因组DNA,并检测其纯度和浓度。采用正交试验对SRAP-PCR体系进行优化,最终建立了最优反应体系(总体积为25μL):Taq酶0.5 U,d NTPs 4mmol/L,Mg^(2+)2 mmol/L,引物各2μmol/L,DNA模板10 ng,10×PCR buffer 2.5μL。再利用最优反应体系对144对引物进行筛选,共获得7对特异性引物,其扩增片段的大小均在100~2 000 bp以内且分布较均匀,多态性条带比率皆达85%以上。该研究结果为南药益智遗传多样性的研究奠定了基础。; 欧虹雅韩冬苗黄兹宝张明康周聪聪高炳淼; 关键词：益智 SRAP标记引物筛选

基于SRAP技术的姜科植物遗传多样性分析被引量：4: 2020年; 为姜科植物资源的保护与利用提供科学依据,以采自海南岛内的11种姜科样品为材料,采用相关序列扩增多态性(Sequence-related amplified polymorphism,SRAP)分子标记技术对基因组进行提取与扩增,并分析其遗传多样性。结果表明:姜科植物提取的DNA条带明显清晰、未见降解、质量良好;SRAPPCR扩增共获得条带59条,均为多态性条带,多态性比率均为100%;姜科植物的遗传相似系数在0.500 0~0.838 4,其中草豆蔻与大苞闭鞘姜、海南砂仁与皱叶山姜、红豆蔻与光叶山姜、阳春砂与阳荷两两间遗传相似系数最大,均为0.838 4,表明其亲缘关系最近;在遗传相似系数0.500 0处,11种姜科药用植物分为两大类,Ⅰ类包括益智、草豆蔻、大苞闭鞘姜、海南砂仁和皱叶山姜,Ⅱ类包括红豆蔻、光叶山姜、高良姜、阳春砂、阳荷和爪哇白豆蔻。; 袁琳代亚坤高炳淼; 关键词：姜科植物 SRAP 聚类分析

海马提取物的制备方法及其应用: 本发明公开了一种海马提取物的制备方法，所述方法包括如下步骤：步骤一、称量海马粉末于圆底烧瓶中，按照料液比加入95％乙醇溶液，加热回流提取2～4次，每次2～4h，过滤并收集药渣；步骤二、将步骤一收集的药渣按照料液比加入蒸馏...; 高炳淼魏娜刘雪菲丹杨涛廖燕玲; 文献传递

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高炳淼