魏培
- 作品数：6 被引量：6H指数：1
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- 重组hIL-31抗体制备及其拮抗皮肤炎症的研究
- 2011年
- 目的:高效表达重组hIL-31制备IL-31抗体,探讨IL-31抗体拮抗皮肤炎症的作用,为研发IL-31抗体治疗性新药奠定基础。方法:①培养工程菌、IPTG诱导、菌体、超声破碎,用镍NTA柱纯化重组蛋白。②重组hIL-31蛋白溶液加佐剂免疫家兔,制备兔抗IL-31多克隆抗体。③将IL-31抗体分为3个剂量,经皮下注射和皮肤直接涂抹的途径,对已经致皮肤炎症的BALB/c小鼠治疗7d,治疗后3d取治疗部位皮肤作石蜡切片进行HE染色观察组织学变化,并检测血清中IL-6、IL-8、L选择素和MIP-3β等细胞因子的变化。结果:①SDS-PAGE电泳证实获得了高纯度的纯化人IL-31蛋白。②用重组hIL-31蛋白疫苗免疫家兔,在免疫后4周抗体滴度达到高峰,经ELISA法测血清抗体滴度为1∶15000～1∶20000,双扩滴度为1∶16。Western blot结果重组IL-31蛋白能与抗IL-31抗体特异性结合。③小鼠皮肤组织切片HE染色显示,治疗组皮下和皮内均有炎症细胞浸润,呈现剂量依赖性趋势。④血清中炎性因子ELISA检测,涂抹组和注射组小鼠血清中IL-6、IL-8、MIP-3β均明显低于阴性对照组(P<0.05)。结论:①获得稳定表达的重组人IL-31蛋白,以此作为免疫原免疫家兔,诱导分泌高滴度的IL-31抗体。②IL-31抗体使皮肤炎症中炎性细胞减少,血清中炎症相关细胞因子明显降低。
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- 关键词：IL-31抗体拮抗皮肤炎症
- 白细胞介素-31多克隆或单克隆抗体的制备方法及应用
- 本发明涉及一种白细胞介素-31多克隆或单克隆抗体的制备方法及应用，白细胞介素－31是近年发现的具有4个螺旋结构的多肽链，为Th2型细胞因子，具有调节细胞增殖分化、促进造血、参与炎症反应等多种生物学功能，是一种重要的炎症因...
- 黄俊琼孙万邦魏培郑静曹雪梅董革辉
- 文献传递
- IL-31单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立被引量：3
- 2014年
- 目的:制备抗人IL-31单克隆抗体,建立ELISA检测体系。方法:采用合成免疫原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备抗IL-31单克隆抗体,用HRP标记单克隆抗体,ELISA和Western blot法检测抗体的亚类、滴度和特异性;采用ELISA技术制备IL-31检测试剂盒,并对自制试剂盒进行评价。结果:获得了两株稳定产生抗IL-31单克隆抗体的杂交瘤细胞,抗体亚类均为IgG3,抗体特异性好,杂交瘤细胞诱生的腹水抗体效价达106。试剂盒检测灵敏度为5.726 pg/ml,检测IL-1、IL-6、TNF-α、RF的P/N值均小于2.1,为阴性,靶抗原IL-31的检测结果为阳性(P/N值=13.76);自制试剂盒检测特应性皮炎血清IL-31水平为(532.83±90.39)pg/ml,对照组血清IL-31水平为(103.31±19.17)pg/ml,皮炎组明显高于对照组,有显著性差异(P<0.001)。结论:成功制备了抗IL-31单克隆抗体,建立的ELISA试剂盒可用于临床检测IL-31。
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- 关键词：IL-31单克隆抗体
- 重组人IL-31抗体制备及其拮抗皮肤炎症的研究
- 目的:高效表达重组人IL-31,从而制备IL-31抗体/(多克隆抗体//单克隆抗体/),探讨IL-31抗体拮抗皮肤炎症的作用,为研发IL-31抗体治疗性新药打下基础。方法:/(1/)培养工程菌株E.coli BL21/(...
- 魏培
- 关键词：IL-31多克隆抗体单克隆抗体拮抗皮肤炎症
- 文献传递
- CD4^+CD25^+T细胞的生物学特性和临床研究进展被引量：1
- 2009年
- 魏培孙万邦
- 关键词：CD25^+T细胞CD4^+生物学特性免疫耐受状态自身抗原
- 重组人白细胞介素-31表达条件的优化被引量：1
- 2008年
- 目的优化重组人白细胞介素-31(rhIL-31)的表达条件。方法以不同浓度IPTG、不同诱导时间、不同诱导温度对含有pET32a/rhIL-31的工程菌E.coliBL21(DE3)进行诱导表达,用SDS-PAGE对表达产物进行分析。结果诱导时间为5h,IPTG浓度为1.5mmol/L,诱导温度为37℃时,rhIL-31的表达量最高。结论已初步优化了重组蛋白rhIL-31的表达条件。
- 余妍孙万邦黄俊琼曹雪梅郑静魏培
- 关键词：重组蛋白
