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携带抗口蹄疫病毒ScFv基因猪成纤维细胞系的建立: 2012年; 根据口蹄疫病毒的感染特征及其在临床发病过程中呈现的症状,筛选抗口蹄疫病毒单链抗体基因。通过EcoRⅠ/NotⅠ双酶切中间质粒pGEX-ScFv获得单链抗体基因片段,并克隆至反转录病毒载体质粒pFB-neo,构建反转录病毒穿梭载体质粒pFB-ScFv。将pFB-ScFv与辅助质粒pVPack-GP、pVPack-10A1共转染HEK293T细胞,包装重组反转录病毒MMLV-ScFv。同时,构建含增强型绿色荧光蛋白基因的重组反转录病毒MMLV-EGFP作为对照。利用所包装重组反转录病毒感染猪成纤维细胞,通过G418筛选获得携带目的基因的单克隆细胞集落。试验结果表明,本试验在成功构建反转录病毒穿梭载体pFB-ScFv和pFB-EGFP的基础上,获得了分别携带抗口蹄疫病毒单链抗体基因和增强型绿色荧光蛋白基因的反转录病毒,并最终筛选出分别携带上述基因的猪成纤维细胞克隆,为抗口蹄疫病毒转基因动物的研究奠定了基础。; 孙丹丹李霄王婧尹熙俊康锦丹鲁月李太元金宁一; 关键词：口蹄疫病毒反转录病毒单链抗体转基因

体细胞核移植技术生产转单体红色荧光蛋白五指山小型猪: 本实验首次构建pCX-mRFP1-pgk—neoR基因，生产表达红色荧光蛋白的小型猪，为以后基因敲除的研究提供理想动物模型。; 鲁月康锦丹梁爽高青山李所朱海瑛王伟尹熙俊; 关键词：五指山小型猪体细胞核移植红色荧光蛋白基因敲除动物模型

利用体细胞核移植技术生产转单体红色荧光蛋白五指山小型猪研究: 红色荧光蛋白及其突变体能实时监测蛋白表达、蛋白和细胞荧光示踪、研究蛋白质之间相互作用。单体红色荧光蛋白是一种能够快速成熟的荧光蛋白，其激发与发射波长更长，具有更高的组织渗透性，毒性低，比绿色荧光蛋白成熟速度快，抗干扰能力...; 鲁月; 关键词：五指山小型猪转基因猪体细胞核移植; 文献传递

Demecolcine处理对猪卵母细胞内MPF的影响: 本实验研究意在检测DEME处理的猪卵母细胞，为理解化学辅助去核方法对MPF含量的影响做出初步的研究。; 李所王伟康锦丹鲁月尹熙俊; 关键词：胚胎移植猪卵母细胞体外培养

生产转基因五指山小型猪重构胚条件优化: 2013年; 利用体细胞核移植技术是得到具有优良特征及抗病性五指山小型猪快速有效方法,因此将外源基因安全高效导入到供核细胞至关重要。利用不同转染试剂、转染方法对转染效率进行研究,确定G418筛选浓度。同时利用体细胞核移植技术生产转单体红色荧光蛋白重构胚。结果表明,使用U-023细胞核电转程序能有效介导质粒pCX-mRFP1转染猪耳成纤维细胞,转染率可达到83.33%。确定G418最佳筛选浓度为200μg.mL-1。利用转基因细胞作为核供体生产重构胚卵裂率是83.08%(221/266),囊胚率是11.65%(31/266)。研究结果为生产表达单体红色荧光蛋白五指山小型猪提供参考,从而为人类疾病发病机理研究以及生产人类疾病模型动物奠定了基础。; 鲁月康锦丹李所王伟朱海瑛金君学洪禹尹熙俊; 关键词：五指山小型猪转基因体细胞核移植

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鲁月