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龚兴国: 作品数：88 被引量：618H指数：12; 供职机构：浙江大学生命科学学院生物化学研究所更多>>; 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金国家科技型中小企业技术创新基金更多>>; 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>

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TBP-like Protein(TLP)通过G_2/M期阻滞抑制HeLa细胞的增殖被引量：1: 2014年; TBP-like protein(TLP)是真核细胞中一种常见的转录因子,在调节生长发育方面起着重要的作用。该实验构建重组质粒pEGFP-N1-TLP,研究TLP对人宫颈癌细胞HeLa增殖的影响。利用流式细胞仪检测质粒的转染效率,通过激光共聚焦显微镜观察外源TLP蛋白的亚细胞定位。经过MTT检测、RNAi-TLP诱导的基因沉默及Hoechst33258染色研究TLP对HeLa细胞的增殖抑制作用。流式细胞术、Western blot和RT-PCR实验结果表明,TLP将HeLa细胞周期阻滞于G2/M期,并抑制周期相关基因CDK1和CyclinB1的转录和翻译。研究表明,外源TLP在HeLa细胞的细胞核中表达,通过降低细胞周期相关基因CDK1和CDK1的表达水平,将HeLa细胞的细胞周期阻滞于G2/M期,从而抑制细胞的增殖。; 王宏伟龚兴国; 关键词：TLP HELA细胞 CDK1 CYCLINB1

内含子Ⅱ的作用机制和演化被引量：6: 2003年; 内含子是广泛存在于原核生物的叶绿体、线粒体以及真核生物基因组中的非编码DNA序列,但其含有的调控元件却常常影响基因的表达效率。内含子的自我剪接在mRNA的成熟过程中起着重要作用,内含子也可利用逆转录剪接作用插入到同源或异源DNA中,同时也常常通过“外显子改组”来促进基因进化。文章重点介绍了近年来在内含子Ⅱ作用机制及演化方面研究的最新进展。; 于红龚兴国

猪脾血红素加氧酶的纯化和某些性质研究: 1993年; 通过DEAE－纤维素层析，羟基磷灰石层析及Sepharose CL-6B层析，从猪脾中获得了纯的血红素加氧酶。纯化的酶在聚丙烯酰胺凝胶电泳及SDS－聚丙烯酰胺电泳中均呈现单一条带。测得该酶分子量约为30500道尔顿，含272个氨基酸残基。氨基酸组成分析表明该酶中谷氨酸、谷氨酰胺含量丰富，而半胱氨酸和色氨酸含量低。在280nm处具有较低的消光系数（E1cm^1%=8.12)，而在406nm处具有强烈的光吸收。Triton×-100和EDTA对酶有稳定作用。; 曾冬云龚兴国等; 关键词：纯化猪脾谷氨酰胺消光系数光吸收

蛋白激酶B的研究进展被引量：7: 2003年; Protein kinase B (Akt) is a Ser/Thr kinase,which in mammals comprise three highly homologous members known as PKBα/Akt1,PKBβ/Akt2 and PKBγ/Akt3. PKB is activated by hormones?growth factor and extra cellular matrix. The activation occurs downstream of PI3K. PKB phosphorylates and regulates the function of many cellular protein involved in processes that include survival,apoptosis, proliferation,glycogen metabolism and cancer progression. Although many mechanisms remains to be fully characterized,the research of PKB is thought to have a useful profect.; 王华祖龚兴国; 关键词：蛋白激酶B 细胞存活糖代谢细胞增殖细胞代谢

羊栖菜多糖的提取工艺研究被引量：24: 2006年; 为了开发利用羊栖菜资源,对羊栖菜中多糖的提取工艺进行了研究。对羊栖菜多糖提取工艺中的参数:提取介质、料液比、提取温度、提取时间、pH值、提取次数、醇沉倍数分别进行了单因素试验,并且在单因素实验的基础上,通过对其中3个主要影响因子(温度、料液比、时间)进行正交试验,以及比较几种粗多糖脱蛋白和脱色方法,最终确定了羊栖菜多糖的最佳提取工艺,即:pH=3.0、浸提温度85℃、料液比1∶30、浸提时间5h、提取次数2次、3倍体积醇沉、大孔树脂脱色、酶解与Sevag法结合除蛋白。; 张锐曾冬云龚兴国郭建军王华祖; 关键词：羊栖菜水溶性多糖

LC-1ScFv偶联GFP基因的构建及表达: 2005年; 从具有高效蛋白表达及活力的抗肺癌杂交瘤单克隆细胞株(LC-1)抽提总RNA,反转录成cDNA.根据肿瘤单链抗体(ScFv)基因设计引物,用多聚酶链式反应(PCR)克隆出抗体的重链和轻链基因,并通过重叠延伸PCR法将重链基因与修饰后的轻链基因连接为单链抗体基因.改造后的ScFv与绿色荧光蛋白(GFP)基因连接,构建表达质粒ProGFP-ScFv,随后转化大肠杆菌JM109,用诱导剂IPTG进行诱导表达.表达产物采用Ni-NTA树脂进行纯化,进行SDS-PAGE电泳分析其纯度.酶联免疫检测(ELISA)表明该蛋白已具有抗体活性.395nm激光激发显示绿色荧光,表明目的基因在原核生物中存在表达.; 龚兴国于红徐飞虎谭皓思; 关键词：绿色荧光蛋白单链抗体原核表达系统

藻类多糖的提取分离方法: 本发明公开的藻类多糖的提取分离方法是利用多糖、糖蛋白溶于水的特性，用水提法浸取，并用乙醇分级沉淀的方法分离，最后用阴离子交换柱，和凝胶排阻层析纯化多糖。本发明方法以一般藻类为原料，提取、纯化各种藻类的胞内、外多糖，并且可...; 龚兴国曾冬云郭建军; 文献传递

从红细胞中提取超氧化物歧化酶的方法: 本发明公开的从红细胞中提取超氧化物歧化酶的方法，步骤包括动物新鲜血液抗凝处理后，离心收集红细胞，经溶血，热变性，丙酮分级沉淀，冻干得SOD粗品。粗品经离子交换层析和/或分子筛层析得SOD精品。本发明彻底摒弃了氯仿乙醇，只...; 郦剑勇龚兴国曾冬云叶跃国; 文献传递

从禽畜血中提取血红蛋白和超氧化物歧化酶的方法: 本发明公开的从禽畜血中提取血红蛋白和超氧化物歧化酶的方法，步骤包括新鲜禽畜血抗凝处理后，离心收集血球，溶血后加热处理提取血红蛋白和SOD粗提液；SOD粗提液经热变性，超滤浓缩，丙酮分级沉淀和离子交换剂吸附处理获得SOD精...; 龚兴国郦剑勇叶跃国曾冬云秦勇; 文献传递

藻类多糖的提取分离方法: 本发明公开的藻类多糖的提取分离方法是利用多糖、糖蛋白溶于水的特性，用水提法浸取，并用乙醇分级沉淀的方法分离，最后用阴离子交换柱，和凝胶排阻层析纯化多糖。本发明方法以一般藻类为原料，提取、纯化各种藻类的胞内、外多糖，并且可...; 龚兴国曾冬云郭建军; 文献传递