严丹丹
- 作品数：13 被引量：38H指数：3
- 供职机构：沈阳医学院更多>>
- 发文基金：辽宁省教育厅高等学校科学研究项目国家自然科学基金辽宁省教育科学“十一五”规划课题更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学一般工业技术更多>>
- NZW小鼠中CD4^+T细胞活化后IL-10R1表达的研究
- 2014年
- 目的:检测系统性红斑狼疮小鼠(NZW小鼠)CD4+T细胞在活化后表面IL-10R1的表达变化,为进一步研究白细胞介素10(Interleukin 10,IL-10)相关免疫疾病的发病机制及进展提供有力支持。方法:取小鼠的脾细胞,经溶血后采用尼龙毛法去除B淋巴细胞,细胞经抗-CD3和抗-CD28多克隆抗体刺激,分别在活化后0,18,24和48 h采用流式细胞术以FITC抗-CD4抗体标记CD4+T淋巴细胞检测il-10r1的表达情况。结果:未活化时NZW小鼠CD4+T淋巴细胞不表达白细胞介素10受体1(interleukin receper 1,IL-10R1),在活化过程中IL-10R1开始表达,表达水平无明显波动,且表达水平远低于C57BL/6小鼠高峰时。而C57BL/6小鼠未活化时不表达IL-10R1,在活化过程中,随时间延长IL-10R1表达增加,24 h达到高峰,随后下降,48 h情况与0 h基本相同。结论:NZW小鼠体内淋巴细胞表面IL-10R1表达水平下降,IL-10对其包括调控功能在内的作用下降。并且NZW小鼠IL-10R1表达时间延长,由于IL-10R1基因免疫调控区的突变,导致IL-10对CD4+T淋巴细胞调节功能失调。这些都与系统性红斑狼疮发病及进展有关。
- 刁骋曾艳杨芳莉严丹丹韦星呈
- 关键词：T淋巴细胞白细胞介素10
- 外源性重组激活基因在人类细胞中的表达研究
- 2022年
- 目的:通过恢复RAG-1、RAG-2分子的表达挽救功能性淋巴细胞的分化、发育,探讨从基因水平上根治RAG-免疫缺陷病的技术方法,为进一步进行基因治疗打下基础。方法:(1)采用RT-PCR方法克隆人类RAG-1、RAG-2编码基因,同时构建RAG-1、RAG-2真核表达载体;(2)采用转染方法得到转染细胞体,使目的基因在人类细胞得到表达。结果:阳性克隆的测序结果与人类RAG-1、RAG-2基因完全相同,并且分别在获得重组细胞中检测到782 bp的人类RAG-1 mRNA转录产物和378 bp的人类RAG-2 mRNA转录产物,而pcDNA3.1空白对照未检测到任何hRAG-1 mRNA。结论:成功克隆了人类RAG-1、RAG-2基因,并在转染的人类细胞中获得了外源RAG-1、RAG-2的mRNA表达。
- 曾艳孙洪海王敏刘旭严丹丹孙龙飞刘志超韦星呈
- 关键词：真核表达载体基因表达
- 小鼠CD4^+T细胞活化后IL-10受体Ⅰ表达的研究被引量：2
- 2011年
- 目的:检测抗小鼠CD4+T淋巴细胞活化后表面白细胞介素10受体I(IL-10R1)表达变化,为进一步研究白细胞介素10(IL-10)相关免疫疾病的发病机制及进展提供有力支持。方法:取C57BL/6小鼠脾细胞,溶血后采用尼龙毛去除B淋巴细胞后,流式细胞仪无菌分选CD4+T淋巴细胞,利用anti-CD3和anti-CD28多克隆抗体刺激分选后细胞,分别在第0、12、24、48和72小时流式细胞术检测IL-10R1表达情况。结果:0小时时小鼠CD4+T淋巴细胞不表达IL-10R1,随着刺激时间的延长IL-10R1表达增加,24小时时达到最高,随后表达水平开始下降,72小时时表达情况与0小时基本相同。结论:CD4+T淋巴细胞活化后IL-10R1表达短暂,以24小时时表达最高。
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- 关键词：T淋巴细胞白细胞介素10免疫调节
- TBL教学法在医学免疫学教学中的探索与应用被引量：3
- 2021年
- 为解决学生免疫学学习缺乏主动性、团队协作性的问题,探讨TBL教学法在免疫学理论教学中应用效果。连续多年在临床等6个专业本科生免疫学理论教学中采用TBL教学法,结果TBL教学法有助于学生对免疫学基本知识理解和掌握,有助于激发学生学习热情,增强学生的团队意识及综合分析能力。
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- 关键词：医学免疫学TBL
- PBL与传统教学方法在医学免疫学实验教学中的比较研究被引量：19
- 2009年
- 与传统教学法相比较,分析PBL在本科医学免疫学实验课的教学效果。结果:PBL班对理解与分析型试题的考试成绩提高极为显著(P<0.01)。在反馈意见调查中,95.35%的受试学生对PBL持肯定态度。结论:PBL在医学免疫学实验教学中是可行的,其教学效果明显好于传统教学法。
- 韦星呈曾艳刁骋严丹丹杨芳莉
- 关键词：医学免疫学实验教学教学改革PBL
- 抗原刺激后小鼠CD4^+ T细胞IL-10受体Ⅰ表达情况的研究
- 2011年
- 目的:检测抗原刺激后小鼠CD4+T淋巴细胞表面白细胞介素10受体Ⅰ(interleutin-10 receptorⅠ,IL-10R1)表达变化情况。方法:取C57BL/6小鼠脾细胞,溶血后采用尼龙毛去除B淋巴细胞后,流式细胞仪无菌分选CD4+T淋巴细胞,利用anti-CD3和anti-CD28多克隆抗体刺激分选后细胞,分别在第0、12、24、48和72 h应用流式细胞术检测IL-10R1表达情况。结果:0 h时小鼠CD4+T淋巴细胞不表达IL-10R1,随着刺激时间的延长IL-10R1表达增加,24 h时达到最高,随后表达水平开始下降,72 h时表达情况与0 h基本相同。结论:白细胞介素10(interleutin-10,IL-10)对小鼠CD4+T淋巴细胞的调节可能是在IL-10R1短暂表达的72 h内。
- 杨芳莉刁骋韦星呈曾艳严丹丹
- 关键词：T淋巴细胞白细胞介素10免疫调节
- 不同连接肽的双价单链抗体基因的构建及表达被引量：6
- 2007年
- 采用基因重组技术分别借助不同长度的连接肽[G4S和(G4S)3],将两个相同的抗人大肠癌单链抗体基因ND-1scFv共价连接,构建表达载体pET-28a(+)ND-1sc(Fv)2,并在大肠杆菌BL21中表达ND-1sc(Fv)2的融合蛋白。应用Ni2+亲和层析方法对表达产物进行纯化,SDS-PAGE、免疫荧光法(IFA)和ELISA对纯化后的蛋白质进行纯度和免疫活性分析。结果表明成功构建了表达载体pET-28a(+)ND-1sc(Fv)2,并在大肠杆菌中获得高效表达,其表达产物以不溶性包涵体形式存在。纯化后ND-1sc(Fv)2-5、ND-1sc(Fv)2-15的蛋白质纯度分别为90%和86%。IFA及ELISA结果表明,二者均保留了亲本抗体的免疫活性,对表达在人大肠癌细胞上的肿瘤相关抗原LEA具有特异结合活性,其免疫活性均明显高于ND-1scFv,其中ND-1sc(Fv)2-15的免疫活性更接近于亲本单抗ND-1,该抗体有望成为大肠癌临床导向诊断和治疗的理想载体。
- 严丹丹方瑾宋今丹
- 关键词：连接肽大肠癌
- 锂-匹罗卡品致癫痫大鼠模型时程机制探讨
- 2012年
- 目的观察锂-匹罗卡品致癫痫大鼠模型各时程c-fos mRNA和fos蛋白表达水平。方法采用免疫组化和实时荧光定量PCR技术检测fos蛋白和基因水平的表达。结果 fos基因和蛋白在癫痫持续状态后1h升高,6h同时达高峰。24h表达仍有升高。结论癫痫持续状态后6hfos蛋白和mRNA表达同时达高峰。
- 金戈王俊平王春红严丹丹姜殿君郝伟付首用周桦地
- 关键词：癫痫模型实时荧光定量
- 共价连接的抗人大肠癌双价单链抗体基因的构建及表达
- 大肠癌是常见的恶性肿瘤之一，目前其发病率在我国居第三位，死亡率呈逐年上升趋势，因此探讨有效的诊断和治疗手段是大肠癌研究的重要课题。利用单克隆抗体作为载体的大肠癌导向诊断和治疗已经取得了一定进展，但是完整抗体由于分子量较大...
- 严丹丹
- 关键词：大肠癌
- 文献传递
- RAG1保守3'-UTR序列Er1对RAG2转录调控活性作用初步研究
- :Er1是在位于RAG1的3'-UTR发现的具有B细胞特异性的转录调控序列.Er1在人类和小鼠之间保持高度同源,说明了其在进化过程中的保守性特征.为明了Er1对RAG1和RAG2的调控作用机制,在B细胞中,进行了...
- 韦星呈曾艳刁骋严丹丹杨芳莉
- 关键词：免疫化学
