乔来艳
- 作品数:25 被引量:63H指数:6
- 供职机构:中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 一种免疫佐剂和含有该佐剂的疫苗
- 本发明提供了一种新型免疫佐剂,其主要成分是从卡介菌中提取的CpG-DNA,其为富含CpG基序的DNA。该佐剂为免疫刺激型佐剂,本身具有免疫活性作用,在体内诱导的是Th1型免疫应答,可作为治疗与预防用疫苗佐剂。
- 王国治赵爱华贾淑珍乔来艳寇丽杰
- 文献传递
- 国内外卡介菌的分子遗传学特性被引量:7
- 2009年
- 目的比较我国生产用卡介菌上海菌株与国际常用卡介菌亚株(巴斯德1173P2株、法国F6株、丹麦1331株、丹麦2株、日本172株、Connaught)在分子遗传学上的差异。方法应用PCR和多重PCR方法,对国内外不同卡介菌的各缺失区(RD1、RD2、RD8、RD14、RD16、nRD18、RDDenmark/Glaxo)、插入序列IS6110拷贝数及基因座SenX3-Regx3串联重复序列拷贝数进行检测。结果我国生产用卡介菌上海菌株(BCG Chinese)缺失RD1和RD2,不缺失RD8、RD14、RD16、nRD18及RDDen-mark/Glaxo,含有1个IS6110插入序列,SenX3-Regx3基因座有3个串联重复序列,PCR产物为353bp;巴斯德1173P2株缺失RD1、RD2、RD14和nRD18,含有1个IS6110插入序列,SenX3-Regx3基因座有2个串联重复序列;法国F6株缺失RD1、RD2和nRD18,含有1个IS6110插入序列,SenX3-Regx3基因座有2个串联重复序列;丹麦1331株缺失RD1、RD2及RDDenmark/Glaxo,含有1个IS6110插入序列,SenX3-Regx3基因座有2个串联重复序列;丹麦2株与丹麦1331株相似,只是SenX3-Regx3基因座有2个串联重复序列和3个串联重复序列并存的现象;日本172株只缺失RD1,RD16只显示401bp的产物,含有2个IS6110插入序列;Connaught株缺失RD1、RD2、RD8及nRD18,含有1个IS6110插入序列,SenX3-Regx3基因座有1个串联重复序列。结论我国生产用卡介菌上海菌株与国外其他卡介菌亚株在分子遗传学特性上有一定的差异。
- 赵爱华贾淑珍寇丽杰乔来艳王国治
- 关键词:多重PCR
- BCG-CpG-DNA免疫活性作用的初步研究被引量:17
- 2006年
- 目的研究BCG-CpG-DNA的免疫学活性。方法通过淋巴细胞增殖、T细胞亚群分析、细胞因子产生、对NK细胞杀伤功能影响等试验,检测BCG-CpG-DNA的免疫活性。结果BCG-CpG-DNA能促进小鼠T、B淋巴细胞增殖,活化巨噬细胞分泌IL-12,并能增强ConA诱导IFN-γ产生,提高小鼠脾细胞中CD3+、CD4+、CD8+T细胞亚群的含量,同时增强小鼠NK细胞的杀伤活性。实验组与对照组所有结果差异均有显著意义(P<0.05)。结论BCG-CpG-DNA能活化抗原呈递细胞(APC),并具有较好的免疫活性。
- 赵爱华寇丽杰乔来艳贾淑珍王国治
- 关键词:BCG-CPG-DNA佐剂免疫活性
- BCG-CpG-DNA对A群脑膜炎球菌多糖疫苗的免疫佐剂作用被引量:6
- 2010年
- 目的探讨免疫佐剂BCG-CpG-DNA对A群脑膜炎球菌多糖疫苗的作用。方法将不同剂量(5、10、100μg)的免疫佐剂BCG-CpG-DNA与A群脑膜炎球菌多糖疫苗直接混合后,皮下免疫小鼠,与未添加佐剂疫苗比较,ELISA法检测抗原特异性IgG抗体水平,并分析抗体亚类IgG1和IgG2a的水平。结果BCG-CpG-DNA能提高A群脑膜炎球菌多糖疫苗特异性抗体IgG水平,并能促进抗原特异性抗体亚类的产生,其中佐剂中、高剂量(10、100μg)实验组IgG、IgG2a水平与未加入免疫佐剂疫苗之间差异有统计学意义。结论BCG-CpG-DNA对A群脑膜炎球菌多糖疫苗有免疫佐剂作用。
- 赵爱华李凤祥贾淑珍寇丽杰乔来艳王国治
- 关键词:BCG-CPG-DNA免疫佐剂A群脑膜炎球菌多糖疫苗
- 卡介菌多糖核酸注射液效力实验动物模型致敏原的选择被引量:1
- 2009年
- 目的针对目前卡介菌多糖核酸注射液效力试验模型不稳定的现状,比较猪血清、牛血清白蛋白、鸡卵清蛋白3种不同致敏原对小鼠的致敏效果,探讨该动物模型致敏原的选择。方法猪血清、冻干牛血清白蛋白、冻干鸡卵清蛋白腹腔注射致敏小鼠,隔天1次,共3次,末次致敏后14d,尾静脉攻击相同的致敏原,观察小鼠的全身发病情况,记录发病指数。结果牛血清白蛋白的致敏效果最差,猪血清和鸡卵清蛋白致敏效果好,但是反复冻融后的猪血清致敏效果较猪血清效果显著性降低(P<0.05)。鸡卵清蛋白的致敏浓度选择结果,在5mg/ml的攻击浓度下,动物的发病指数0.5mg/ml致敏浓度组高于0.25mg/ml剂量组和1mg/ml剂量组。结论鸡卵清蛋白更适合用于卡介菌多糖核酸注射液效力试验的致敏原,最佳的致敏浓度和攻击浓度分别为0.5mg/ml和5mg/ml。
- 赵爱华贾淑珍寇丽杰乔来艳王国治
- 关键词:分枝杆菌动物
- BCG-CpG-DNA免疫佐剂的研究
- 目的:介绍BCG-CpG-DNA免疫佐剂的研究。
方法:以药理学结果介绍BCG-CpG-DNA免疫佐剂本身的免疫刺激作用,以药效学结果介绍BCG-CpG-DNA免疫佐剂作用及通用性,以毒理学结果介绍BCG-Cp...
- 赵爱华贾淑珍寇丽杰乔来艳王国治
- 关键词:医学免疫免疫佐剂核酸疫苗免疫生物学
- 文献传递
- 我国生产用卡介菌的传代稳定性被引量:6
- 2009年
- 目的研究我国生产用卡介菌上海株在传代过程中分子遗传学特性的稳定性。方法应用多重PCR法,对我国生产用卡介菌上海株工作种子批及其不同代次菌的各缺失区、插入序列IS6110及基因座SenX3-RenX3串联重复序列拷贝数进行检测。结果我国生产用卡介菌上海株的工作种子批及其第6、9、12代菌均缺失RD1、RD2,未缺失RD8、RD14、RD16、nRD18及RDDenmark/Glaxo;含有1个IS6110插入序列和3个SenX3-RenX3基因座串联重复序列。结论我国生产用卡介菌上海株在传12代以内,其分子遗传学特性是稳定的。
- 赵爱华乔来艳贾淑珍寇丽杰王国治
- 关键词:传代稳定性
- BCG-CpG-DNA重复给药对小鼠免疫毒性的初步评价被引量:5
- 2010年
- 目的观察BCG-CpG-DNA重复给药对小鼠免疫器官和免疫功能的影响,评价BCG-CpG-DNA的免疫毒性。方法将BALB/c小鼠随机分为4组,对照组注射生理盐水,实验组分别注射低(100μg)、中(250μg)、高(500μg)剂量的BCG-CpG-DNA,于28d内分别经背部皮下免疫7次,分别于初次免疫后14d、末次免疫后3d和3周,检测各组小鼠免疫器官脏器系数、淋巴细胞转化功能、细胞因子释放(ELISPOT法)、T细胞亚群变化(免疫荧光法)和NK细胞杀伤活性(乳酸脱氢酶法)。结果 BCG-CpG-DNA重复给药7次,主要影响小鼠初级免疫器官,表现为脾肿大,对胸腺、肝脏和肾脏无影响;对细胞免疫功能的影响是增强淋巴细胞转化功能;降低中、高剂量组CD3+T细胞亚群含量;提高体内分泌IFNγ和IL-4的细胞数二者的比例;增强NK细胞的杀伤能力。结论 BCG-CpG-DNA重复给药累计达3.5mg,小鼠表现为免疫功能增强,对免疫器官和免疫功能无不良影响,未见免疫毒性副作用。
- 郑亮赵爱华王雯乔来艳贾淑珍寇丽杰李凤祥吴小南王国治
- 关键词:BCG-CPG-DNA免疫毒性安全性评价
- 一种未甲基化CpG二核苷酸的含量的检测方法
- 本发明提供了一种测定未甲基化CpG含量的方法,该方法采用特异甲基化酶SssI修饰CpG二核苷酸的胞嘧啶为5-甲基胞嘧啶,然后利用核酸酶P1和细菌碱性磷酸酶将DNA水解为单个脱氧核苷,利用反相-高效液相法对修饰和未修饰的D...
- 王国治赵爱华贾淑珍乔来艳寇丽杰
- 文献传递
- 应用四唑鎓盐法快速检测卡介苗活菌含量被引量:6
- 2009年
- 目的通过四唑鎓盐(XTT)方法快速检测卡介苗样品中的活菌含量,结果与传统培养法菌落形成单位计数结果进行相关性分析,探讨应用XTT方法快速检测卡介苗(BCG)制品中的活菌含量的可行性。方法活菌含量是BCG疫苗重要的质控指标,它决定疫苗的效力。传统活菌含量的检测采用固体培养法计数菌落形成单位,但耗时长,重复性差。因此快速检测卡介苗活菌含量的方法急需建立和应用。四唑鎓盐(XTT)由于其水溶性的显色反应能够反映细胞的活力,同样也能应用于细菌的活力检测。其原理是细菌在代谢过程中,通过氧化-还原反应将XTT还原为可溶性的高色产物甲臢(formazan),甲臢含量反应了细菌的活菌数量。将该方法应用于卡介苗活菌含量的快速检测中,通过已知活菌含量BCG参考品制备活菌含量和XTT有色产物吸光度值的参比曲线,根据未知样品的吸光度值,在此参比曲线上读出未知样品的活菌含量。同时将该快速检测方法得到的结果和传统培养法活菌含量结果进行相关性分析。结果XTT法能反应BCG制品中活菌的含量差异,在一定的浓度范围内,活菌含量和有色产物吸光度值间有线性关系,相关系数R2达到0.99以上,应用该方法对10批BCG样品活菌含量进行快速检测,结果和培养法菌落形成单位(CFU)结果的相关系数r=0.834,实验可在24h左右完成。结论XTT法能够快速检测BCG制品中的活菌含量,结果与培养法菌落形成单位计数结果有较好的相关性,实验耗时由4周减少到24h,该法可以用于BCG活菌含量快速检测。
- 赵爱华贾淑珍寇丽杰乔来艳王国治
- 关键词:卡介苗结核